The interaction of the carcinogenic mycotoxin, Aflatoxin $B_1$, with the electron-donating molecule, benzene, was studied spectrophotometrically. The formation of charge-transfer complex between Aflatoxin $B_1$ and benzene in the presence of zinc chloride was observed and the apparent equilibrium constant of this charge-transfer complex was found to be 0.198 (liter $mole^{-1}$). It is assumed that, as the result of this study, some charge-transfer complexes could be formed between the weak electron-accepting Aflatoxin $B_1$ and strong electron-donating molecules, and the spectral changes occurred in the binding of Aflatoxin $B_1$ with proteins or DNA is attributed to the existence of charge-transfer type interaction.
Fluorescence of quinolones including norfloxacin, ciprofloxacin and S- and R-ofloxacin is quenched upon association with single and double-stranded DNA (ss- and ds-DNA). The ratios of fluorescence intensity in the presence of DNA to its absent were plotted with respect to the DNA concentration to construct the Stern-Volmer plot. The slope of the Stern-Volmer plot become larger as the temperature is lowered, ensuring that the fluorescence quenching is static process, i.e., the fluorescence is quenched by formation of the non-fluorescent complex between quinolone and DNA. In the static quenching mechanism, the quenching constant which is equivalent to the slope of the Stern-Volmer plot, is considered as the equilibrium constant for the association of quinolones and DNA. From the temperature-dependent equilibrium constant, ${\Delta}H^0\;and\;{\Delta}S^0$ was obtained using the van’t Hoff relation. In general, association of the quinolone with ds- as well as ss-DNA is energetically favorable (an exothermic) process while the entropy change was unfavorable. Due to the steric effect of the substituents, the effect of the quinolone ring is smaller on the ss-DNA compared to ds-DNA.
The Aconitum alboviolaceum Kom. complex includes four controversial species described from Korea; A. albouiolaceum, A. pseudolaeue, A. longecassidatum, and A. quelpaertense. The main objective of this study was to determine the taxonomic identities and systematic relationships among the species in the A. albouiolaceum complex based on morphology, numerical analyses and DNA sequence analysis. In the present study, variations in the principal morphological characters and chloroplast DNA noncoding region sequences (psbA-trnH IGS, trnL intron, and trnL-trnF IGS) were examined for 95 individuals from 20 populations. Also, neighbor-joining analysis was adopted to infer their relationships. Morphological variation appeared to be considerably high but not to be related to geographic distribution. These morphological results suggest that reevaluation of key morphological characters are needed for the proper taxonomic treatment of the complex. The length of psbA-trnH IGS region ranged from 241 to 250 bp, that of the trnL intron from 526 to 532 bp, and that of the trnL-trnF IGS region from 466 to 472 by in all taxa. Nine haplotypes were recognized from the analysis. Seven populations shared more than two haplotypes, while other thirteen populations shared only one haplotype. In the phylogenetic analysis, the nine haplotypes formed four groups, separated A. sibiricum, one of the sister groups of the complex. There also was no distinct grouping pattern supporting the species and populations observed. These results suggest that introgression or speciation might have been involved in the formation of taxa of A. alboviolaceum complex.
Ionizing radiation can be used to sanitize herbs contaminated by various microorganisms. However, health concerns related to irradiation damage to complex molecules in plants necessitate that methods be developed to monitor such damage. To elucidate DNA damage of herbs caused by irradiation, the DNA comet assay was used for Astragalus membranaceus Bunge and Havenia dulcis Thumb, irradiated at 1, 5, 7, and 10 kGy. With increasing irradiation doses, the tails of comets became longer with average tail length increasing from 17 (non-irradiated) to 124 (10 kGy) $\mu$m in Astragalus membranaceus Bunge. Above 7 kGy, some of the tails were separated from the heads of comets. Distribution patterns of the tail length of In comets selected randomly in the irradiated herbs were analyzed to quantify the DNA damage. These results clearly suggest that the DNA comet assay is an effective and inexpensive tool for the detection of irradiation damage to DNA in herbs.
Homeodomain (HD) is a highly conserved DNA-binding domain composed of helix-turn-helix motif. Drosophila Vnd (Ventral nervous system defective) containing HD acts as a regulator to either enhance or suppress gene expression upon binding to its target sequence. In this study, kinetic analysis of Vnd binding to DNA was performed. The result demonstrates that DNA-binding affinity of the recombinant protein containing HD and NK2-specific domain (NK2-SD) was higher than that of the full-length Vnd. To access whether phosphorylation sites within HD and NK2-SD affect the interaction of the protein with the target sequence, alanine substitutions were introduced. The result shows that S631A mutation within NK2-SD does not contribute significantly to the DNA-binding affinity. However, S571A and T600A mutations within HD showed lower affinity for DNA binding. In addition, DNA-binding analysis using embryonic nuclear protein also demonstrates that Vnd interacts with other nuclear proteins, suggesting the existence of Vnd as a complex.
Ay, Ahmet Nedim;Zumreoglu-Karan, Birgul;Oner, Reyhan;Unaleroglu, Canan;Oner, Cihan
BMB Reports
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v.36
no.4
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pp.403-408
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2003
The relative activities of neutral, cationic, and anionic chromium ascorbate complexes toward isolated human mitochondrial and genomic DNA were investigated at physiologically relevant conditions by agarose gel electrophoresis. A direct relationship between the charge of the Cr(III) species and their DNA-damaging properties was found. The cationic species were found to be fully capable of DNA-cleavage, even in short incubation periods. Incubations were also performed in the presence of amino acids. No apparent effect was observed under the applied experimental conditions to facilitate or prevent damage through the ternary amino acid-Cr-DNA adduct formation or binary chromium-amino acid complex formation.
Proceedings of the Korea Crystallographic Association Conference
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2003.05a
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pp.16-16
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2003
Mismatches in a DNA duplex are mainly due to DNA duplication errors that are generated by improper function of DNA polymerase. MutS, MutL and MutH are crucial proteins for the initiation of the methyl-directed mismatch repairing in bacteria. MutS has an ATPase activity md recognize the mismatched or unpaired bases on DNA. After binding to a mismatch, MutS recruits MutL to mediate the activation of MutH an endonuclease, which cleaves the 5' site of d(GATC) on the un-methylated strand. Both MutL and MutS also have essential roles in the subsequent removal and re-synthesis of the daughter strand. We have determined the crystal structures of either intact or active fragments of each of these proteins, both alone and complexed with ligands (DNA, ADP and ATP). The biochemical and mutagenesis studies based on the detailed 3-D structures led to new insights into the role of the ATPase activity of MutS in the mismatch recognition and directions for future investigation of mismatch repair.
To investigate the importance of the hydrophobic interaction in the spermine-induced collapse of DNA to a compact structure, the effect of urea on the anomalous absorbance-temperature profile of calf thymus DNA has been investigated. With the increase of the urea concentration, the trough phase of the anomalous absorbance-temperature profile was eliminated eventually. The cooperativity, enthalpy, and the midpoint of the transition to the trough region are more sensitive to urea than those of the Tm-region transition. The present data of the adverse effect of urea, a hydrophobic environmental reagent, on the thermal stabilization of the condensed state of DNA, suggest that hydrophobic interaction may play an important role in the stabilization of the tertiary structure of the collapsed state of DNA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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