Kim, Woo-Keun;Kim, Ja-Hyun;Yeom, Dong-Hyuk;Lee, Sung-Kyu
Environmental Analysis Health and Toxicology
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v.23
no.3
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pp.171-178
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2008
수백여 종의 개별물질이 불완전 연소 혹은 유기물의 열분해로 인해 발생되는 다환방향족 탄화수소(PAHs)는 환경에서 중요한 오염원이 되고 있다. 본 연구는 다양한 바이오마커를 이용하여 수서생태계에 벤조피렌(benzo[a]pyrene)과 같은 다환방향족 탄화수소의 영향을 분석하였고, 이에 대한 통합적 결과 모델을 도출하였다. 즉, 잉어(Cyprinus carpio)를 이용하여 여러 농도의 벤조피렌(3, 12, $34{\mu}g/L$, 측정농도 기준)에 10일간 노출시킨 다음, DNA single-strand break, ethoxyresorufin-O-deethylase (EROD), acetylcholine esterase (AChE)와 vitellogenin (VTG)의 농도를 측정하였다. 벤조피렌은 잉어의 DNA 손상을 유도하였고, 낮은 농도에서 EROD와 VTC의 유의적인 활성을 보였으나, 신경전달물질과 관련이 깊은 AChE 효소활성에는 영향을 미치지 않았다. 이 결과를 star plot를 이용하여 통합 및 분석하였으며, 노출농도에 따른 통합 반응지수(integrated biomarker response value: IBR)로 나타내었다. 이런 다양한 바이오마커의 결과들은 벤조피렌에 대한 어류의 영향과 수생태 모니터링 자료로 이용 가능할 것으로 여겨지며, 통합반응지수는 생태위해성평가에서 유용한 도구로 쓰일 가치가 있는 것으로 평가된다.
Cnidii Rhizoma water extract (CRW) was tested for liver cancer chemopreventive potential by measuring the inhibition of phase I enzyme and benzo[a]pyrene-DNA adduct formation and induction of phase II detoxification enzymes. There was 17.0% inhibition in the activity of cytochrome P450 1A1 enzyme with the treatment of 150 mg/ml CRW. At concentration of 30 mg/ml CRW, the binding of $[^3H]B[a]P$ metablites to DNA of NCTC-clone 1469 cell was inhibited by 33.3%. CRW was potent inducer of quinone reductase (QR) and glutathione S-transferase (GST) activities in cultured murine hepatoma Hepalc1c7 cells. However, hepatic glutathione (GSH) level was not influenced by CRW. These findings suggest that CRW has chemopreventive potential of liver cancer by inhibiting cytochrome P450 1A1 activity and benzo[a]pyrene-DNA adduct formation and inducing QR and GST activities.
Benzo[a]pyrene (B[a]P) is an environmental pollutant that has been implicated in carcinogenesis. Saccharomyces cerevisiae was treated with B[a]P, and the responses of its cytochrome P450 (CYP) enzyme and DNA-damage checkpoint genes were examined through gene expression profiles using a reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The DNA-damage checkpoint genes tested were the chk1 and pds1 genes, involved in a metaphase arrest, the swi6 gene targeted by G1 arrest, the pol2 gene related to S phase arrest, and the cln2 gene encoding a cyclin protein, all of which are based on rad9 and rad24. Among these genes, no noticeable effect was found when the cells were exposed to various concentrations of B[a]P. However, the transcriptional activity of CYP51 was significantly different when the cells were exposed to B[a]P. Accordingly, the present results indicate that cytochrome P450 plays a more significant role than DNA-damage checkpoint genes in the response of S. cerevisiae to B[a]P.
Kim, Jong Moon;Son, Gwan Su;Doh, Seong Tak;Kim, Seog Kyu;Park, Byung Kak
Journal of the Korean Chemical Society
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v.40
no.4
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pp.229-234
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1996
Carcinogenicities of Benzo[a]pyrene(BP) and its metabolites were investigated by PM3. The 4, 5, 5a, and 6 positions forming transbutadiene(TB) frame in BP have been proved to be carcinogenic region by LUMO. We have found that the carcinogenic region of BP-triol, ultimate cacinogen, is shifted from 4, 5, 5a, and 6 positions of precarcinogen to 10, 10a, 12c, and 12b ones. The appreximate charge transfer quantities turned out to have the largest value between HOMO of Guanine and LUMO of BP-triol corresponding to TB region on each other.
Cytochrome P450 (CYP1A) gene expression in the liver and sex steroid levels in plasma were investigated in olive flounder (Paralichthys olivaceus) exposed to tributyltin (TBT) and benzo[a]pyrene (BaP). We constructed a cDNA library and cloned a 230-base sequence encoding partial CYP1A DNA. The CYP1A gene expression level was estimated using northern blotting. Hepatic CYP1A mRNA levels in fish injected with BaP at 10 mg/kg body weight (b.w.) increased for 48 h after injection. However, fish injected with both BaP and TBT at 10 mg/kg b.w. showed no significant changes in CYP1A mRNA level after 48 h. Plasma concentrations of testosterone and $17{\beta}$-estradiol were not significantly different in males and females injected with BaP and TBT. We suggest that TBT-induced suppression of BaP bioactivity should be interpreted with caution in biomonitoring field studies.
Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) are an important class of environmentally prevalent xenobiotics that exert complex effects on the biological system and characterized as probably carcinogenic materials. Single cell gel electrophoresis assays were performed in order to evaluate DNA damage occurring in the T-and B lymphocytes, spleens (T/B-cell), bone marrow, and livers of mouse exposed to mixture of PAHs (Benzo(a)pyrene, Benzo(e)pyrene, Fluoranthene, Pyrene) at dose of 400, 800, or 1600 mg/kg body weight for 2 days. DNA damage of the cells purified from mice was increased in dose dependent manner. In the blood cells and organs, DNA damage was also discovered to vary directly with PAHs. Especially T-cells had been damaged more than B-cell. Plasma proteomes were separated by 2-dimensional electrophoresis with pH 4-7 ranges of IPG Dry strips and many proteins showed significant up-and -down expressions with the dose dependent manner. Of these, significant 4 spots were identified using matrix-assisted laser desorption/ionization-time of fight (MALDI-TOF) mass spectrometry. Identified proteins were related to energy metabolism and signal transduction.
Cho, Moo Youn;Eo, Wan Kyu;Lee, Sang Uk;Jeong, In cheol
Journal of Life Science
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v.5
no.3
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pp.105-116
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1995
To investigate genomic changes in c-myc gene by a chemical carcinogen, human lymphoblast NC-37 cells were exposed to benzo(a)pyrene(BP) and dimethylbenzanthracene(DMBA), and the c-myc gene expression was evaluated by Northern and Southern blot hybridization techniques. The results are as follows: When the genomic DNA of NC-37 cells exposed to several concentrations(1.25, 2.5 and 5ug/ml) of BP concentration. However, the c-myc gene was most significantly enhanced with 2.5ug/ml of BP. The expressions of c-myc gene in NC-37 cells was stimulated by BP and DMBA. Addition of TPA reduced the gene expression BP-treated cells, whereas it enhanced the gene expression in DMBA-treated cells. The expression of c-H-ras gene was slightly increased by treatment with BP and DMBA alone and in combination with TPA, however the magnitude of increase was not significantly different between each other. The expressions of c-myc c-H-ras genes in Burkitt's lymphoma cells were greater than those in NC-37 cells. When the DNA extracted from NC-37 cells exposed to various concentrations of BP were amplified by polymerase chain reaction using a primer set containing c-myc exon I, the amplified products were of the same size in all groups. To evaluate the BP toxicity in E.coli to which human c-myc gene-cloned pBR322 vector was inserted, Southern blot hybridization was conducted on c-myc genes digested with EcoRI/HindIII and Smal/Xbal restriction enzymes, and observing that in 2 ug/ml BP-treated cells a 3.5kb fragment was generated in addition to 1.3kb fragment which can be observed in normal cells. Direct nucleotide sequence analysis of polymerase chain reaction products showed a mutation of G$\longrightarrow$A transition at the Smal recognition site.
In order to compare the suppressive effect of galangin on the genotoxicity by N-methyl-N-nitrosourea (MNU) or benzo[a]pyrene B(a)P, in vivo micronycleus test using mouse peripheral blood and in vitro sister chromatid exchange(SCE) test using mouse spleen lymphocytes were performed. MNU or B(a)P-induced micronucleated reticulocytes in vivo was decreased by the simultaneous treatment of galangin. MNU or B(a)P-induced SCEs in vitro was also decreased by the simultaneous treatment of galangin. On the other hand, the determinations of [$^3$H]MNU-induced total DNA binding and methylated DNA were performed to find out the mechanism of action. [$^3$H]MNU-induced total DNA binding was inhibited by the treatment of galangin in calf thymus DNA. HPLC analysis of DNA hydrolysates showed that galangin caused a decrease of 7-methyl guanine and $O^{6}$-methyl guanine in calf thymus DNA. To elucidate the action mechanism of galangin against B(a)P, alteration of B(a)P metabolism was studied. Galangin inhibited B(a)P metabolism in the presence of S-9 mix and decreased B(a)P-DNA binding in calf thymus DNA with S-9 mix.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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