• Korean Journal of Acupuncture
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• 제25권4호
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• pp.89-104
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• 2008

Objectives : This study was undertaken to determine the in vitro antioxidant activity of the extract of Chilgitang herb-acupuncture solution (CHAS). Methods : The radical scavenging capacity was tested by 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH), hypoxanthine-xanthine oxidase system, DCFH-DA assay, nitric oxide and peroxynitrite generating system. In addition, antioxidant activity on copper and AAPH mediated human low-density lipoprotein (LDL) oxidation was measured by using TBARS assay and relative electrophoretic mobility assay. The amount of total phenolic compounds was assayed by the Folin-Ciocalteu method. Results : CHAS revealed a potent scavenging activity on DPPH radical(82%), superoxide anions(73%), hydroxyl radical(63%), nitric oxide (99%) and peroxynitrite (99%). Moreover, CHAS showed a strong inhibitory effect (59%) on $FeCl_2$-ascorbic acid induced lipid peroxidation of rat liver homogenate. CHAS also markedly inhibited copper(81%) and AAPH(56%)-mediated LDL oxidation, and effectively suppressed the electrophoretic mobility during exposure of human LDL to copper ions. CHAS (82 mg/g) contained higher concentration of total phenolic compounds than that of water extract (45 mg/g) obtained from Chilgitang. Conclusions : These results indicate that CHAS may protect against ROS- or RNS involved diseases, including cardiovascular diseases.

• 한방재활의학과학회지
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• 제26권3호
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• pp.51-58
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• 2016

Objectives This study was designed to investigate whether the Cheongajihwang-Tang (CT) has an inhibitory effect association with oxidation or inflammation in RAW264.7 cells. Methods Cytotoxic activity of CT extract on RAW264.7 cells was evaluated by using 3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) solution. Nitric oxide production was measured using Griess reagent system. The total phenolic contents and 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity was measured to evaluate the anti-oxidative effects of CT. Dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA) has been used as a substrate for measuring intracellular oxidant production. Results Cheongajihwang-Tang does not impair the cell viability in tested concentration. CT showed anti-oxidative effects in vitro by decreasing electron donating ability, and also showed anti-inflammatory effects suppressing NO and ROS expression in LPS induced RAW264.7 activation. CT inhibited the generation of intracellular ROS production as dose dependant manner. Conclusions CT has anti-oxidative effects and anti-inflammatory activities. These results indicate that CT extract has an anti-inflammatory activities via anti-oxidative effects.

• 생명과학회지
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• 제20권9호
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• pp.1365-1372
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• 2010

본 연구에서는 마를 건조 후 분말화하여 실험에 사용하였으며, 건조 마 분말에 대한 생리활성에 대한 연구로 건조된 마를 유기용매로 추출하여 마 추출물과 분획물들의 $H_2O_2$에 의해 유도된 산화적 스트레스 및 인체 암세포(HT1080 인체 섬유육종세포, HT-29 인체 결장암세포)에 대한 증식 억제 효과에 대해 검토하고자 하였다. 마는 항비만, 항변비, 항돌연변이, 혈당 및 혈중 콜레스테롤 감소 등의 활성이 있어 건강식품으로 알려져 있다. $H_2O_2$에 의해 유도된 산화적 스트레스 저해효과를 알아보기 위하여 DCFH-DA assay를 행하였다. 건조 마 A+M 추출물을 농도별로 인체 섬유육종세포(HT1080)에 처리하였을 때 농도 의존적으로 세포 내 활성산소종을 크게 억제시켰다. 각 분획물들 중 85% aq. MeOH 분획물은 다른 분획물과 비교하여 높은 지질 과산화물 생성 억제 효과를 보였다. 인체 암세포에 대한 증식 억제 실험에서 A+M 및 MeOH 추출물은 농도 의존적으로 인체 섬유육종 및 결장암세포의 증식을 억제하였다. 마 추출물로부터 얻어진 n-hexane, 85% aq. MeOH 및 n-butanol (n-BuOH) 분획물들은 첨가농도 0.5 mg/ml 이상 처리했을 때 이들 두 암세포의 증식을 유의적으로 억제하였다(p<0.05). 본 연구 결과로 부터 건조 마의 암세포 증식 억제 효과는 마의 A+M 추출물이 MeOH 추출물에 비해 높았고, 분획물들의 경우에는 water 분획물을 제외한 분획물들의 암세포 억제 효과가 높았다. 특히 85% aq. MeOH 분획물은 인체 암세포 증식 억제 효과뿐만 아니라 세포 내 활성산소종 감소시키는 효과가 높아 이들 분획물에 활성물질이 있을 것으로 추정된다.

• 생명과학회지
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• 제17권11호
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• pp.1533-1538
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• 2007

본 연구에서는 갈조류에 속하는 짝잎모자반을 용매별로 추출하여 인체 위암 및 결장암세포에 대한 증식 억제 및 지질 과산화물 생성 억제효과에 대해 검토하고자 하였다. Acetone/methylene chloride 추출물(A+M) 및 methanol 추출물(MeOH)을 인체 위암세포에 처리했을 때 농도 의존적으로 암세포 증식을 억제하였고(P<0.05), MeOH 추출물의 경우 인체 결장암 세포에 비해 위암세포에 대한 증식 억제효과가 높았다. 분획물들인 hexane, BuOH, 85% MeOH, water 분획물을 5 mg/ml의 농도로 인체 위암 및 결장암세포에 처리했을 때 암세포의 성장을 크게 억제시켰으며(P<0.05) 위암세포와 비교해 볼 때 결장암 세포에서 보다 높은 암세포 증식 억제효과를 보였다. A+M 추출물 및 MeOH 추출물과 각 분획물들을 10mg/ml의 농도로 HT-1080 섬유육종 세포에 처리하였을 때, 지질 과산화물의 생성을 억제시키는 활성을 나타내었다(p<0.05). A+M 추출물과 MeOH 추출물 처리군은 blank군과 control군과 비교하였을 때, 측정 시간 120분 동안 계속적으로 높은 세포내 지질 과산화물 생성 억제 능력을 나타내었으며(p<0.05), BuOH 및 hexane 분획물들을 처리한 경우에서는 A+M 추출물과 MeOH 추출물 처리군들보다는 다소 낮은 활성을 나타내지만, control군에 비해 지질 과산화물의 증가율이 현저히 낮았음을 관찰할 수 있다(p<0.05). 이상의 결과로부터 짝잎모자반의 추출물 및 각 분회물들은 인체 암세포의 증식을 크게 억제하였으며 지질 과산화물 생성을 억제시켜 우수한 산화 방지 효과가 있음을 확인할 수가 있었다.

• 대한한의학방제학회지
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• 제20권2호
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• pp.65-82
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• 2012

Objectives : The aim of this study was verification of the anti-oxidative and anti-inflammatory effects of Odukhwan(ODH) and Sasinhwan(SSH) in mouse macrophage, RAW264.7 cells. Methods : To investigate the anti-oxidative effect and scavenging activities of DPPH radical, superoxide anions, nitric oxide and peroxynitrite were measured. Cytotoxic activity of extract of ODH and SSH on RAW264.7 cells was measured using MTS assay. To proof the reductive activity of intracellular oxidation, DCFH-DA assay was performed. The nitric oxide(NO) production was measured and pro-inflammatory cytokines and $PGE_2$ were measured by ELISA kit. The levels of inducible nitric oxide synthase(iNOS), cyclooxygenase-2(COX-2) and nuclear NF-${\kappa}B$ p65 expression were detected by western blot. Results : After those analyses, we bring to a conclusion as follows. Both herbal formulations scavenged DPPH radical and nitric oxide. But ODH had no scavenging activity of superoxide anions and SSH had low scavenging activity in peroxynitrite. And the results indicated that ODH and SSH inhibited the LPS-induced NO, $PGE_2$ production and iNOS, COX-2 expression accompanied by an attenuation of IL-$1{\beta}$ and IL-6 production in RAW264.7 cells. They also have suppression effects of LPS-induced NF-${\kappa}B$ activation. Conclusions : ODH and SSH have anti-oxidative and anti-inflammatory effects and they may be a part of database for development of new anti-oxidative and anti-inflammatory drugs.

• 한국작물학회지
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• 제56권4호
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• pp.349-360
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• 2011

The objectives of present study were to characterize the peptides which were isolated from Korean fermented soybean paste, chungkukjang, and to determine their antioxidant activities. Four fractions were collected from the methanol extract of chungkukjang by using a recycling preparative HPLC. Among fractions, Fr-2 was identified to be highly potent free radical scavenging activity in the assay of 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) and nitroblue tetrazolium(NBT)-reduction inhibition. Base on antioxidant effects, fraction Fr-2 was employed for the refraction with a prep-column and separated into five fractions of which two fractions were identified to have higher antioxidant activity. To confirm the amino acid constituents of antioxidant fractions Fr-2-2 and Fr-2-3 were analyzed, and eight kinds of amino acids such as aspartic acid, threonine, serine, glutamic acid, glycine, lysine, histidine, and arginine were identified as the constituent amino acids. Antioxidant activities of the separated peptides were further assessed cell viability with 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl terazolium bromide (MTT), and fluorescence-activated cell sorting (FACS) analysis of H4IIE cells treated with hydrogen peroxide (H2O2). Chungkukjang peptides have shown their ability to protect H4IIE rat hepatoma cells against H2O2- induced oxidative stress by concentration and time-dependent manner. Therefore, These results indicated that fermented soybean paste chungkukjang will be promoted the antioxidant and radical scavenging activities, and beneficial for health. The antioxidant peptide fractions Fr-2-2 and Fr-2-3 were denominated as P-NICS-1 and P-NICS-2, respectively. However, further studies were required to clarify their amino acid sequences and molecular properties, and physiological significances.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제18권1호
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• pp.65-71
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• 2011

본 연구에서는 도라지 분말을 유기용매로 추출한 후 도라지의 추출물과 분획물들에 의한 세포 내 활성산소종 및 glutathione (GSH)를 측정하여 항산화효과를 검토하였고 NO 생성 저해 효과를 알아보았다. 세포 내 활성산소종 생성억제 실험에서 건조 도라지의 A+M 및 MeOH 추출물과 추출물을 n-hexane, 85% aq. MeOH, n-BuOH, water로 다시 추출하여 얻어진 각각의 분획물들을 농도별로 HT1080 세포에 처리하였을 때 A+M과 MeOH 추출물 모두 측정시간 120분 동안 $500\;{\mu}M$ $H_2O_2$만을 처리한 control군에 비해 세포 내 활성산소종을 크게 억제시켰으며, MeOH 추출물에 의한 항산화 효과가 더 높게 나타났다. 또한, 각 분획물들 중 n-BuOH 분획물이 다른 분획물들에 비해 우수한 항산화 활성을 보였다. GSH 농도 측정 실험에서 A+M 및 85% aq. MeOH 분획물를 처리했을 때 GSH 함량이 증가하였다. NO 생성 저해 실험에서는 A+M 및 MeOH 추출물이 0.01 및 0.05 mg/mL의 농도에서 NO 생성을 억제하는 것으로 나타났으며, A+M 추출물에 의한 저해 효과가 높았다. 각 분획물들은 모두 control보다 낮은 NO 생성량을 나타내었으며, 특히 85% aq. MeOH 및 n-BuOH 분획물은 0.05 mg/mL 농도에서 blank에 가까운 NO 생성 억제율을 나타냈다. 이상의 연구결과로부터 n-BuOH 분획물에 의한 세포 내 활성산소종 생성 억제 효과 및 NO 생성 저해 효과가 우수함을 알 수 있었으며, 향후 분획물의 분리 정제를 통한 새로운 기능성 물질의 개발이 필요할 것으로 사료된다.

• 생명과학회지
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• 제26권8호
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• pp.948-954
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• 2016

포도주 가공 중에 발생하는 포도주 부산물의 항산화 활성 검토를 위해 포도주 부산물을 유기용매로 추출 및 분획하여 총 플라보노이드 및 총 페놀 함량을 측정하고 포도주 부산물의 항산화 효과를 분석하였다. 포도주 부산물의 분획 및 추출물의 총 플라보노이드의 양을 측정한 결과 MeOH 추출물은 A+M 추출물보다 높은 함량의 총 플라보노이드를 함유하는 것으로 나타났고 분획물들 중에서는 85% aq. MeOH 분획물이 105.1±0.93 mg/g으로 가장 높았으며 총 페놀 함량은 MeOH 추출물과 n-BuOH 분획물에서 높은 함량을 나타내었다. DPPH를 통한 라디칼 소거활성능을 측정한 결과, 0.5 mg/ml 첨가농도에서 MeOH 추출물은 74%의 소거율을 나타내었으며 분획물들 중에서는 n-BuOH 분획물이 72%의 소거활성을 나타내었다. 또한 ABTS+를 통한 라디칼 소거활성능을 측정한 결과, 0.5 mg/ml 첨가농도에서 85% aq. MeOH 및 n-BuOH 분획물들은 각각 90% 및 92% 소거활성을 나타내어 동일한 BHT 농도에서 92%인 것과 비교해 보았을 경우 합성항산화제만큼 높은 항산화능을 나타내었다. 세포내 활성 산소종 소거 효과를 나타내는 ROS 실험을 통해 0.1 mg/ml 첨가농도에서 MeOH 추출물과 n-BuOH 분획물은 각각 64%와 60%의 소거 활성을 나타었다. 이상의 결과를 종합해 보면 포도 및 포도씨와 비교했을 때 포도주 부산물의 경우 총 플라보노이드 및 총 페놀 함유량은 다소 낮았지만 항산화 효과도 지속되는 것으로 여겨지므로 향후 포도주 부산물의 응용이 기대되어진다.

• 생명과학회지
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• 제27권7호
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• pp.796-804
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• 2017

본 연구는 어성초의 메탄올 추출물을 이용하여 항산화 효능이 가장 좋은 fraction을 찾고, 항산화 효능을 나타내는 성분을 분석하였다. 메탄올 추출에 의한 유기 용매 별 분획에서 항산화 효과가 가장 좋은 ethyl acetate 분획물을 칼럼 크로마토그래피하여 12가지의 fraction 중 가장 높은 항산화 효과를 보인 Fr. 10을 이용하여 DPPH 라디칼의 소거활성, 환원력, 지질과산화, 세포독성, DNA 산화 및 DCFH-DA를 이용한 세포내 과산화수소 제거효과를 조사하였다. DPPH radical scavenging activity, reducing power, TBARS, cell viability, DNA oxidation and DCF fluorescence 12가지의 fraction들 중 항산화 효능이 가장 좋은 Fr. 10의 DPPH radical 소거 활성 결과로 $64{\mu}g/ml$ 농도에서 양성대조군에 근접하는 60%의 억제능을 보였다. Reducing power 결과로 $32{\mu}g/ml$의 농도에서 140%로 양성대조군과 비슷한 결과 값을 보였다. TBARS 결과로 $2{\mu}g/ml$에서 양성대조군과 같은 값의 활성산소 억제능이 나타난다. 또한 cell viability 결과로 $32{\mu}g/ml$ 이상의 농도에서 세포 독성에 의해 생존율이 감소하였고, DCF fluorescence 결과로 농도의존적으로 $H_2O_2$에 의한 산화적 손상을 억제하는 것으로 나타났다. DNA oxidation 실험결과 $1{\mu}g/ml$ 이상의 농도에서 DNA의 손상을 감소시킴을 확인할 수 있었다. IR 및 LC-MS를 이용하여 Fr. 10의 유효성분을 조사한 결과 rutin (분자량, 610)으로 확인 되었다. 결론적으로 어성초의 메탄올 추출물로부터 분리한 Fr. 10은 농도 의존적으로 항산화 효능이 우수하게 나타났고, 어성초는 화장품 및 기능성 식품의 소재로 활용될 수 있음을 시사한다.