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N-glycoproteomic analysis of human follicular fluid during natural and stimulated cycles in patients undergoing in vitro fertilization

  • Lim, Hee-Joung;Seok, Ae Eun;Han, Jiyou;Lee, Jiyeong;Lee, Sungeun;Kang, Hee-Gyoo;Cha, Byung Heun;Yang, Yunseok
    • Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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    • 제44권2호
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    • pp.63-72
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    • 2017
  • Objective: Hyperstimulation methods are broadly used for in vitro fertilization (IVF) in patients with infertility; however, the side effects associated with these therapies, such as ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS), have not been well studied. N-glycoproteomes are subproteomes used for the remote sensing of ovarian stimulation in follicular growth. Glycoproteomic variation in human follicular fluid (hFF) has not been evaluated. In this study, we aimed to identify and quantify the glycoproteomes and N-glycoproteins (N-GPs) in natural and stimulated hFF using label-free nano-liquid chromatography/electrospray ionization-quad time-of-flight mass spectrometry. Methods: For profiling of the total proteome and glycoproteome, pooled protein samples from natural and stimulated hFF samples were selectively isolated using hydrazide chemistry to obtain the total proteomes and glycoproteomes. N-GPs were validated by the consensus sequence N-X-S/T (92.2% specificity for the N-glycomotif at p<0.05). All data were compared between natural versus hyperstimulated hFF samples. Results: We detected 41 and 44 N-GPs in the natural and stimulated hFF samples, respectively. Importantly, we identified 11 N-GPs with greater than two-fold upregulation in stimulated hFF samples compared to natural hFF samples. We also validated the novel N-GPs thyroxine-binding globulin, vitamin D-binding protein, and complement proteins C3 and C9. Conclusion: We identified and classified N-GPs in hFF to improve our understanding of follicular physiology in patients requiring assisted reproduction. Our results provided important insights into the prevention of hyperstimulation side effects, such as OHSS.

N-phenylbenzenesulfonamide 유도체들에 의한 모잘록병균 (Pythium ultimum)의 살균활성에 관한 CoMFA 및 CoMSIA분석 (CoMFA and CoMSIA Analysis on the Fungicidal Activity against Damping-off (Pythium ultimum) with N-phenylbenzenesulfonamide Analogues)

  • 장석찬;강규영;성낙도
    • 농약과학회지
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    • 제11권1호
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    • pp.8-17
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    • 2007
  • N-phenylbenzenesulfonamide 및 N-phenyl-2-thienylsulfonamide 유도체(1-34)들의 phenyl 및 theinyl 고리상치환기(R1-R5) 변화에 따른 모잘록병균(Pythium ultimum)의 살균활성에 관한 3차원적인 정량적 구조와 활성과의 관계(3D-QSARs)들을 비교 분자장 분석(CoMFA)과 비교분자 유사성 지수분석(CoMSIA) 방법으로 각각 검토하였다. 전반적으로 CoMSIA 모델들의 통계값은 atom based fit 정렬보다는 field fit 정렬시에 높은 값을 나타내었으나 CoMFA모델의 경우에는 차이가 없었다. 그리고 CoMSIA (FF1) 모델($r_{cv.}^2\;(q^2)=0.674$$r_{ncv.}^2=0.964$)이 CoMFA (AF5) 모델($r_{cv.}^2\;(q^2)=0.616$$r_{ncv.}^2=0.930$)보다 상관성과 예측성이 양호하였다. CoMSIA (FF1) 모델의 정보에 따라 살균활성은 분자의 정전기장과 소수성장에 의존적이었다. 또한, CoMSIA (FF3) 모델의 등고도 분석 결과로부터 N-phenyl 고리상 R4-치환기의 친수성과 수소결합 받게로서의 성질인 모잘록병균의 살균활성에 기여할 것으로 예상되었다.

PVA, PVP 및 pFF를 첨가한 체외성숙 한정배지가 미성숙 돼지 난포란의 성숙과 배발달에 미치는 영향 (Effects of Development and Viability of Pig Oocytes Matured in Defined Medium Containing PVA, PVP and pFF)

  • 김인덕;김세나;한숙기;석호봉
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제19권3호
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    • pp.219-227
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    • 2004
  • 본 연구는 체외 성숙액인 TCM-199 배지를 기초로 무혈청첨가물인 PVA, PVP 및 pFF의 한정배지를 이용하여 돼지 미성숙난자의 체외성숙, 수정 및 배양 후 난자의 수정율과 배발달에 미치는 영향과 나아가 BSA 대체물로서의 이용 가능성을 알아보았다. 1. 무혈청 첨가물을 이용하여 난포란의 체외 성숙을 유기한 결과 PVA, PVP, pFF, BSA의 전체 분할율은 각각 82.4%, 78.6%, 89.4%, 90.0%로 나타났으며, GV, MI-MII율은 PVA 첨가시 각각 15.1%, 84.9%, PVP는 각각 26.5%, 73.5%, pFF는 각각 11.8%, 88.2%, BSA는 각각 11.1%, 88.9%로 PVA 혹은 pFF 첨가시에는 모두 BSA와 유사한 결과를 보였으나 PVP와는 유의적인 차이를 나타내었다 (P<0.05). 2. 체외 성숙된 난자를 수정시킨 후의 배발달율을 확인한 결과 전체 난할율은 PVA가 73%, PVP는 64.1% , pFF가 77.2%, BSA가 73%로 PVA와 pFF는 BSA와 유사하게 나타났으나, PVP는 그 발달율이 다른 처리군 들과 비교하여 유의적(P<0.05)으로 낮은 결과를 보였다. 3. 각 처리구간의 morulae와 blastocyst의 합을 비교한 결과 체외성숙 첨가물 중 PVA와 pFF는 각각 63%, 69%로 BSA(65%)와 유사한 결과를 나타내었으나 PVP는 54%로 유의적으로 낮은 결과를 나타내었다(P<0.05). 4. 전체 성숙율과 수정율을 비교해 본 결과 성숙 율은 PVA, pFF, BSA가 82.4%, 89.4%, 90.0%인 반면 PVP는 72.4%로 유의적으로(P<0.05) 낮은 결과를 보였고, 수정율은 pFF, BSA가 각각 87.1%, 89.1%로 PVA, PVP의 78.0%, 70.6%에 비해 각각 유의적(P<0.05)으로 높았다. 이상의 연구결과 돼지 난자의 체외성숙 및 배양 배지에 있어 PVA, pFF 첨가는 BSA 대체물로서 이용이 가능하나 PVP는 그 이용에 제한이 따를 것으로 판단된다.

홀스타인종 유우의 혈청단백질 및 효소의 유전적 변이체 (Genetic Variants of Serum Proteins and Enzymes in Holstein-Friesian Cattle)

  • 상병찬;류승희;서길웅;이창수
    • 농업과학연구
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    • 제22권2호
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    • pp.163-169
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    • 1995
  • 본 연구는 홀스타인종 유우의 혈청단백질 및 효소에 대한 유전적 구조를 분석하기 위하여, 혈청단백질인 post-transferrin-2(pTf-2), transferrin(Tf), post-albumin(pAlb) 및 albumin(Alb)과 혈청효소인 ceruloplasmin(Cp)와 amylase-I(Am-I)을 polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE)와 starch g디 electrophoresis(STAGE) 방법으로 유전적 변이체를 분석하였다. 혈청단백질인 pTf-2 좌위는 pTf-2 F와 S 유전자에 의해 지배되는 pTf-2 FF, FS 및 SS 유전자형이 확인되었으며, 이들의 분포는 각각 76.34%, 14.50% 및 9.10%이었고, 유전자빈도는 pTf-2 F와 S가 각각 0.836 및 0.164이었다. 한편 Tf 좌위는 Tf A, D1, D2 및 E 유전자가 검출되었으며, 유전자형은 Tf AA, AD1, AD2, AE, D1D1, D1D2, D2D2 및 D2E형이 확인되었고, 이들의 분포는 각각 0.11, 32.06, 19.08, 1.53, 10.69, 18.32, 9.92 및 2.29%이었으며, 유전자빈도는 Tf A, D1, D2 및 E에서 각각 0.324, 0.359, 0.298 및 0.019이었다. 또한 pAlb 좌위는 pAlb F와 S 유전자가 검출되었고, 유전자형은 pAlb FF, FS 및 SS형이 확인되었으며, 이들의 분포는 각각 32.06, 29.77 및 38.17%이었고, 유전자빈도는 pAlb F와 S가 각각 0.469 및 0.531이었다. Alb 유전자 빈도에 있어서는 Alb A와 B가 각각 0.996 및 0.004이었다. 그리고 혈청효소인 Cp 좌위는 Cp F와 S 유전자가 검출되었으며, 유전자형은 Cp FF, FS 및 SS 형이 확인되었고, 이들의 분포는 각각 46.57, 27.48 및 25.95%이었으며, 유전자빈도는 Cp F와 S가 각각 0.603 및 0.394이었다. Am-I 좌위는 Am-I B와 C 유전자가 검출되었으며, 유전자형은 Am-I BB, BC 및 CC 형이 확인되었고, 이들의 빈도비율은 각각 39.69, 21.73 및 38.93% 이었으며, 유전자 빈도는 Am-I B와 C가 각각 0.503 및 0.497이었다.

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Comparison of Two Different Immobilization Devices for Pelvic Region Radiotherapy in Tomotherapy

  • Kim, Dae Gun;Jung, James J;Cho, Kwang Hwan;Ryu, Mi Ryeong;Moon, Seong Kwon;Bae, Sun Hyun;Ahn, Jae Ouk;Jung, Jae Hong
    • 한국의학물리학회지:의학물리
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    • 제27권4호
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    • pp.250-257
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    • 2016
  • The purpose of this study was to compare the patient setup errors of two different immobilization devices (Feet Fix: FF and Leg Fix: LF) for pelvic region radiotherapy in Tomotherapy. Thirty six-patients previously treated with IMRT technique were selected, and divided into two groups based on applied immobilization devices (FF versus LF). We performed a retrospective clinical analysis including the mean, systematic, random variation, 3D-error, and calculated the planning target volume (PTV) margin. In addition, a rotational error (angles, $^{\circ}$) for each patient was analyzed using the automatic image registration. The 3D-errors for the FF and the LF groups were 3.70 mm and 4.26 mm, respectively; the LF group value was 15.1% higher than in the FF group. The treatment margin in the ML, SI, and AP directions were 5.23 mm (6.08 mm), 4.64 mm (6.29 mm), 5.83 mm (8.69 mm) in the FF group (and the LF group), respectively, that the FF group was lower than in the LF group. The percentage in treatment fractions for the FF group (ant the LF group) in greater than 5 mm at ML, SI, and AP direction was 1.7% (3.6%), 3.3% (10.7%), and 5.0% (16.1%), respectively. Two different immobilization devices were affected the patient setup errors due to different fixed location in low extremity. The radiotherapy for the pelvic region by Tomotherapy should be considering variation for the rotational angles including Yaw and Pitch direction that incorrect setup error during the treatment. In addition the choice of an appropriate immobilization device is important because an unalterable rotation angle affects the setup error.

Effect of Vascular Endothelial Growth Factor on Porcine In Vitro Maturation

  • Biswas, Dibyendu;Hyun, Sang-Hwan
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제22권4호
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    • pp.213-218
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    • 2007
  • This study was performed to investigate the effect of VEGF on in vitro maturation of porcine oocytes. The base medium for IVM, TCM-199 was supplemented with 0.6 mM cysteine, 0.91 mM pyruvate, 10 ng/ml epidermal growth factor, $75{\mu}g/ml$ kenamycin, $1{\mu}g/ml$ insulin and 10% (V/V) porcine follicular fluid (pFF) as a Group A; Group B was consists of Group A plus 5 ng/ml VEGF; Group C was consists of replacement of pFF by 10% PVA and Group D: was consists of Group C plus 5 ng/ml VEGF. 1. The maturation rate was significantly higher (p<0.05) in control and VEGF+pFF group than other two groups ($76.1{\pm}9.6,\;78.9{\pm}6.0\;vs\;60.4{\pm}14.2\;and\;58.3{\pm}14.3$, respectively). 2. Addition of VEGF without pFF showed a negative effect on oocytes maturation and about 58.26% oocytes were reached to M-II stage. 3. In the parthenogenetic development, the cleavage rate was significantly higher (p<0.05) in control and VEGF+pFF group ($73.2{\pm}1.8\;and\;64.6{\pm}1.1$, respectively) than other groups ($47.9{\pm}1.8\;and\;48.3{\pm}1.7$, respectively). 4. The blastocyst formation rate was significantly higher (p<0.05) in VEGF+pFF group ($32.6{\pm}2.4$) compared to control and other groups. 5. There was no significant difference in cell numbers (inner cell mass or trophectoderm) among these groups.

각질형성세포에서 p38 MAPK 활성을 통한 연교의 VEGF 생성 효과 (Forsythiae Fructus Induces VEGF Production via p38 MAPK Activation in Human Keratinocytes)

  • 김미선;최윤호;박선규;이천구;이상화
    • 대한화장품학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.329-336
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    • 2016
  • 진피 상층부 모세혈관은 젊은 사람에 비해 노인에서 그 수와 크기가 감소되어 있어 피부에서 모세혈관이 차지하는 비율이 나이에 따라 급격히 낮아진다. 연교는 물푸레나무과에 속하는 개나리 열매를 건조한 것으로 주로 염증성 또는 항균성 질환에 오랫동안 사용되어져온 약재로서 지금까지 피부 혈관신생과 관련된 효능은 보고되지 않았다. 따라서 본 연구에서는 연교 추출물이 혈관신생과 관련된 인자들에 미치는 영향을 피부 각질형성 세포주를 이용하여 조사하고자 하였다. 우리는 먼저 연교 추출물이 혈관신생과 관련된 인자들의 발현에 어떤 영향을 주는지 알아보고자 각질형성세포에 연교 추출물을 처리하고 혈관신생과 관련된 55개 단백질의 발현을 분석하였다. 발현 변화를 보인 인자들 중 혈관내피세포 성장인자(VEGF, vascular endothelial growth factor)는 강력한 혈관신생 촉진인자로서 연교 추출물에 의해 유의하게 발현이 증가되었다. 따라서 연교 추출물이 VEGF 생성에 미치는 영향에 대해 자세히 알아보고자 연교 추출물을 농도별로 세포에 처리하고 단백질 발현과 mRNA 발현 변화를 조사한 결과, 연교 추출물은 VEGF의 유전자 수준뿐만 아니라 단백질 수준의 발현을 2배이상 농도 의존적으로 증가시켰다. 다음으로 연교 추출물에 의한 VEGF 발현 증가에 관여하는 신호전달 기전을 밝히고자 MAPK 활성을 살펴본 결과, 연교 추출물을 세포에 처리하면 5 min 내 p38 MAPK의 활성이 관찰되었으며, 특이적 억제제 전처리를 통해 p38 MAPK 활성을 억제하면 연교 추출물을 처리하더라도 VEGF의 유전자 및 단백질 발현이 완전히 억제됨을 확인하였다. 이러한 결과로부터 연교는 피부 각질형성세포에 작용하여 p38 MAPK 활성을 통해 VEGF 생성을 유도함을 알 수 있었고, 피부에서 노화에 따른 표피아래 모세혈관 손상을 개선하는데 도움을 줄 수 있는 후보 물질로서 연교의 새로운 효능을 제안한다.

PC1D를 이용한 junction depth에 따른 결정질 실리콘 태양전지의 특성 분석 (The characterization of crystalline silicon solar cell according to junction depth by using PC1D)

  • 임정규;이준신
    • 한국신재생에너지학회:학술대회논문집
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    • 한국신재생에너지학회 2011년도 추계학술대회 초록집
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    • pp.65.2-65.2
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    • 2011
  • 일반적으로 결정질 실리콘 태양전지에서는 junction depth가 얕아짐으로써 단파장 영역에서의 수집효율이 향상되고 Jsc가 상승하기 때문에 junction depth가 얕은 것이 좋다. 또, 태양전지의 효율을 높이기 위해서는 낮은 재결합 속도가 필요한데 이를 위해서도 얕은 junction depth가 필요하다. 하지만 junction depth가 너무 얕으면 FF와 Voc가 낮아져 효율이 떨어지므로 junction depth를 최적화 할 필요가 있다. 본 논문에서는 PC1D 시뮬레이션을 사용하여 표면 농도를 고정시키고 junction depth를 가변하면서 이에 따른 cell의 parameter변화를 관찰하였다. 그 결과, 면저항 $120{\Omega}/{\square}$에서부터 효율이 saturation되었고, 그에 따른 parameter 값은 FF=76.28%, Jsc=$38.17mA/cm^2$, Voc=596.5V이며 junction depth가 $0.1726{\mu}m$일 때 효율은 17.37%이다.

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4-Hydroxybenzyl alcohol 유도체들의 Tyrosinase 활성 저해에 대한 3D-QSAR 분석 (3D-QSAR Analyses on the Inhibition Activity of 4-Hydroxybenzyl alcohol Analogues Against Tyrosinase)

  • 김상진;성낙도
    • 대한화장품학회지
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    • 제39권4호
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    • pp.329-335
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    • 2013
  • 본 연구에서는 기질 화합물로써 일련의 4-hydroxybenzyl alchol (4-HBA) 유도체들의 치환기($R_1$$R_2$) 변화에 따른 tyrosinase 활성저해에 관한 3차원적인 구조-활성 상관관계(3D-QSARs) 모델을 유도하고 정량적으로 검토하였다. 그 결과, 입체장(S), 정전기장(E), 소수성장(Hy), 수소결합 받게장(HA) 및 수소결합 주게장(HD)의 조합조건에서 통계적으로 양호한 CoMSIA FF 모델(상관성; $r^2$ = 0.858 및 예측성; $q^2$ = 0.951)을 유도하였다. 등고도 분석결과에 의하면 기질분자의 $R_2$-치환기는 입체적으로 작고 음전하를 띄며, 소수성이면서 수소결합 주게장을 선호하지 않는 치환기가 올수록 tyrosinase 활성저해 작용이 용이하다. 그리고 $R_1$-치환기는 수소결합 주게장을 선호하는 치환기 이어서 $R_1$-치환체가 용이하게 탈 양성자화가 일어나야 tyrosinase 활성저해 작용을 용이하게 할 것이라고 예상되며, 이를 위해서는 $R_1$-치환기가 비 치환체(H)이어야 될 것으로 예상되었다.

우리나라 일부 초등학생과 중학생의 영양강화식품 섭취 실태 및 영양강화식품을 통한 비타민과 무기질 섭취량 조사 (Survey on the Patterns of Fortified Food Consumption and Intake of Vitamins and Minerals in Fortified Foods by Elementary School and Middle-School Students in Korea)

  • 김선효
    • 한국식생활문화학회지
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    • 제26권3호
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    • pp.295-306
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    • 2011
  • This study was performed to investigate patterns of fortified food (FF) consumption and intake of vitamins and minerals from FFs among 577 Korean children (12.4 years of age) who attended elementary or middle school. FFs eaten by children as a snack were surveyed using the food record method during 3 days, including 2 week days and one weekend. As a result, 114 FF items were eaten by the children, and several kinds of nutrients such as vitamin A, D, E, B complex, C, calcium (Ca), iron (Fe), and zinc (Zn) were fortified in these foods. Ca-FFs (65.8%) were most frequently consumed, followed by vitamin C-FFs (33.4%) and vitamin D-FFs (33.3%). The number of FF items in each food group was the most in the milk group (n=24, 21.0%), followed by the beverage group (n=19, 16.7%), and the cookie/bread/cake group (n=17, 14.9%). Fortified nutrients in FFs were in various combinations, but the major combination patterns were Ca, Ca plus vitamins, Ca plus vitamins plus other minerals, and Ca plus other minerals. Daily mean intakes of vitamins and minerals from the FFs were 66-300% more than those of the recommended nutrient intake (RNI ) or adequate intake (AI) for most vitamins and minerals. Daily maximum intakes (95th percentile) of vitamins and minerals from FFs were 1-15 times the RNI or AI for most vitamins and minerals. Vitamin and mineral consumption ratios from each FF group were different according to the kind of fortified nutrient. For example, vitamin C was mostly eaten in fortified beverages (46-54%), and Fe was mostly eaten in fortified cookie/breads/cakes (87%). The above results show that FF consumption varied widely among the children, and that most of the children's foods were fortified with several vitamins and minerals without a common rule; thus, subjects risked over consuming vitamins and minerals by eating FFs. Therefore, practical guideline on FF use for children's optimal nutrition and health should be provided through nutrition education.