The present work was conducted in order to survey bacterial flora inhabiting in Crassostrea gigas. The Crassostrea gigas, sea water and mud of its living environments were sampled at Goseong bay, Gyungnam and Dolsan, Yeochon-gun, Chungnam at the period of from December 1978 to February 1979. The obtained results are summarized as follows: 1. The range of bacterial counts found in Crassostrea gigas, sea water and mud was respectively 10$^4$~10$^{6}$ , 10$^{5}$ ~10$^{6}$ and 10$^3$~10$^4$. 2. Among the bacterial 382 strains isolated from the those sample sources, Vibrio genus was 43.5%, Pseudomonas 16.7%, Moraxella 11.5% and Flavobacterium-cytophaga 8.9%. 3. Among 173 strains classified as Vibrio genus, 56% of them was found in Crassostrea gigas, 54% in mud and 25% in sea water. 4. Pseudomonas type I was found only in sea water and type III/IV found in sea water, mud and Crassostrea gigas. Especially type III/IV was found much in sea water.
Park, Jong-Bok;Lee, Han-Woong;Lee, Soo-Youn;Lee, Jung-Ok;Bang, Iel-Soo;Park, Eui-So;Park, Doo-Hyun;Park, Yong-Keun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.6
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pp.929-935
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2002
The 5-stage biological nutrient removal (BNR) process with step feed system showed a very stable organic carbon and nutrient removal efficiency ($87\%\;COD\,;79\%\;nitrogen,\;and\;87\%$ phosphorus) for an operation period of 2 years. In each stage at the pilot plant, microbial communities, which are important in removing nitrogen and phosphorus, were investigated using fluorescence in-situ hybridization (FISH) and 165 rDNA characterization. All tanks of 5-stage sludge had a similar composition of bacterial communities. The totat cell numbers of each reactor were found to be around $2.36-2.83{\times}10^9$ cells/ml. About $56.5-62.0\%$ of total 4,6-diamidino-2-phenylindol (DAPI) cells were hybridized to the bacterial-specific probe EUB388. Members of ${\beta}$-proteobacteria were the most abundant proteobacterial group, accounting for up to $20.6-26.7\%$. The high G+C Gram-positive bacterial group and Cytophaga-Flexibacter cluster counts were also found to be relatively high. The beta subclass proteobacteria did not accumulate a large amount of polyphosphate. The proportion of phosphorus-accumulating organisms (PAOs) in the total population of the sludge was almost $50\%$ in anoxic-1 tank. The high G+C Gram-positive bacteria and Cytophaga-Flexibacter cluster indicate a key role of denitrifying phosphorus-accumulating organisms (dPAOs). Both groups might be correlated with some other subclass of proteobacteria for enhancing nitrogen and phosphorus removal in this process.
In order to investigate the diversity of bacterial community in the mud flat of Sunchon Bay, Chunnam province, diversity of amplified 16S rDNA was examined. Total DNA was extracted from sediment soils and 16S rDNAs were amplified using PCR primers based on the universally conserved sequences in bacteria. Clonal libraries were constructed and 111 clones were examined by amplified rDNA restriction analysis (ARDRA) using HaeIII. Clones were clustered based on restriction patterns using computer program, GelCompar II. One hundred different RFLP types were detected from 111 clones. The 20 clones were selected and sequenced according to dendrograms derived from ARDRA, to cover most of the bacterial diversity in the clone libraries. None of the clones were identical to any representatives in the Ribosomal Database Project small subunit RNA databases and GenBank. All sequences showed between 77 and 96.8% similarity to the known 16s rRNA sequence from cultured organisms. The 20 clones sequenced fell into seven major lineages of the domain Bacteria: alpha-, delta-, gamma-Proteobacteria, low G+C Gram positive bacteria, high G+C Gram positive bacteria, Sphingobacteria (Cytophaga) and Cyanobacteria (chloroplast). Among the clones, the Proteobacteria were dominant.
The effects of ultrasonication on phytoplankton were investigated in two ponds in which physicochemical and biological water quality was similar, one as a treatment and the other as a control. The samples were collected from August 18 to September 30 in 2003. Traditional morphological analysis showed that Bacillariophyceae dominated phytoplankton community in both ponds. The abundance of Cyanophyceae was lower in the phytoplankton community of the sonicated pond than that of control pond. We used DGGE (denaturing gradient gel electrophoresis) to analyze the diversity and change of phytoplankton community in two ponds. The DGGE banding patterns of 16S rRNA gene and sequence analysis demonstrated that Oscillatoria acuminata and CFB (Cytophaga-Flavobacterium-Bacteroides) group bacterium appeared in the treated pond, and the control pond was dominated by Synechococcus sp. and Aphanizomenon flos-aquae. Especially, Pseudanabaena sp. dominated during the ultrasonic cessation in the treated pond. The DGGE profiles of 18S rRNA gene and sequence analysis showed that the treated pond was dominated by Chlamydomonas reinhardtii and the control pond by C. reinhardtii and Pteromonas protracta. In conclusion, the ultrasonication affected the reduced growth of cyanobacteria, particularly Pseudanabaena.
To define the structure and diversity of bacterial communities in the aqutic ecosystem, Lake Soyang, the largest artificial reservoir in Korea, a new method, fluorescent in situ hybridization was applied. This technique relies on the specific hybridization of the nucleic acid probes to the naturally amplified intracellular rRNA. By this method, the bacterial community composition of Lake Soyang and bacterial numbers belong to eubacteria, proteobacteria and Cytophaga-Flavobacterium group were estimated. Total bacterial numbers ranged from $0.3{\times}10^6{\sim}2.0{\times}10^6cells{\cdot}ml^{-1}$, and vertical profile of total bacteria showed the peak at 2 and 5 m depths. The ratio of eubacteria to total bacteria were 22~100% and varied with depth and season. The percentage of Proteobacteria ${\alpha}$-group ranged 2.6~66.7%, ${\beta}$-group 4.5~53.5%, ${\gamma}$-group 4.6~76.7% and Cytophaga-Flavobacterium group 2.1~35.9%. Also, bacteria] community had spatial and temporal characteristics. The dominant groups were ${\beta}$-group in winter, ${\gamma}$-group in spring and early summer and ${\alpha}$-group in summer.
CHO Hak-Rae;CHANG Dong-Suck;LEE Myung-Suk;HUR Sung-Ho
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.23
no.1
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pp.7-11
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1990
As the putrefaction of fish is greatly relied on the microorganisms inhabited in the viscera of them, we investigated the microfloral changes in the viscera of sardine, Sardinops melanosticta, which has been caught a lot in adjacent sea of Korea but showed rapid spoilage, after storages with various temperature. The following results were obtained. Viable cell counts at $25^{\circ}C$ of the viscera of sardine were $1.6\times10^5/g$ at the fresh sample, $1.5\times10^5/g$ at the frozen sample, $2.9\times10^8/g$ at the spoiled samples. The most predominant microbial genera from the fresh sardine were Moraxella spp.($31.4\%$) and Pseudomonas spp.($28.6\%$), but Enterobacteriaceae($83.1\%$) was in spoiled sample. While Moraxella spp.($46.2\%$) and Flavobacterium-Cytophaga($21.0\%$) were predominant in the frozen sample and Enterobacteriacear($69.6\%$) was in the thawed-spoiled sample. The rates of proteolytic enzyme producing bacteria were $20\%$ in the fresh sample, $22\%$ in the frozen sample but the rates were increased to $52\%,\;29\%$ in the spoiled sample and the thawed-spoiled sample respectively.
The dynamics of bacterial populations belonging to $\alpha\;\beta\;\gamma-subclass$ proteobacteria, Cytophaga-Flavobacterium (CF) group and sulfate reducing bacteria (SRB) in water column of the middle reaches of Nakdong River depending on sediment harvesting were analyzed by fluorescent in situ hybridization (FISH) at sediment harvesting site (near the Seongju bridge) and non-sediment harvesting site (near the Gumi bridge). In addition, some physico-chemical parameters such as temperature, pH, $chi-\alpha$ and electrical conductivity were measured. Regarding the number of total cell counts, cells stained by DAPI, there were no substantial quantitative differences between both sites, but those fluctuation at sediment Harvesting site was greater. And also the ratios of CFgroup and SRB to total cell counts tend to increase at sediment harvesting site with higher $chl-\alpha$, maybe due to the resuspension of sediment into water column. But the total proportion of all determined bacterial populations to total cell counts were greater at non-sediment harvesting site, compared with those at sediment harvesting site. Since the detectibility of bacteria by FISH depends on their metabolic activity, those lower proportion at the sediment harvesting site implies that sediment harvesting may lead to malfunction of those bacteria respect to nutrient recycling and subsequently negative effects on microbial food web.
For comparative analysis of the eubacterial community structure at 8 sampling sites throughout the Nak-Dong River, FISH (fluorescence in situ hybridization) method was employed. The total ratio of each determined eubacterial group such as ${\alpha}\;{\cdot}\;{\beta}\;{\cdot}\;{\gamma}-subclasses$proteobacteria and Cytophaga-Flavobacterium(CF) group to total counts(DAPI) at each site varied 9.3-42.5% with the highest value at uppermost part. And each ratio of determined eubacterial groups reached mostly under 10% except that of CF group (23%) at uppermost part. Furthermore, compared to lower part, upper part represented unexpectedly higher proportions of ${\gamma}-subclass$ proteobacteria comprised almost fast growing bacteria on degradable organics. Also the variations of ammonia-oxidizing bacteria ranged from $2.7{\times}10^4$ to $18.0{\times}10^4$ cells $mL^{-1}$ with the lowest value in lower part and the highest value in mid part whereas those of nitrite-oxidizing bacteria varied 5.2-7.7{\times}10^4$ cells $mL^{-1}$ without noticeable differences throughout the sites. Additionally, the ratio of nitrifying bacteria to total counts ranged from 1.0% to 13.6% with no differences between ammonia-oxidizing bacteria and nitrite-oxidizing bacteria. In conclusion, FISH method introduced in this study for monitoring, normally used for the quantitative analysis of bacteria, provided also good information on their environmental status in the Nak-Dong River.
Oyster (Crassostrea virginica) and Weakfish (Cynoscion regalis) were stored at 6, 0, -4 and -20$^{\circ}C$ for up to 45 days and examined for changes in microflora. Aerobic plate counts (incubated at 21$^{\circ}C$) were performed at selected times during storage and 495 isolates (255 isolates from oyster and 240 isolates from Weakfish) were randomly selected from the plates during the storage. Before the storage of the fishes, viable counts of oyster were 4.9${\times}$10$\^$5/ CFU/g of meat and those of Weakfish were 1.5${\times}$10$^4$ CFU/cm$^2$of skin. Microflora of oyster before storage, the major isolates identified as Pseudomonas spp. (67%) and Vibrio spp. (20%). Pseudomonas ll1/1V-H and Flavobacterium/Cytophaga were predominant genus in the microflora of oyster during cold storage at 6, 0, -4 and -20$^{\circ}C$. The composition of the microflora of Weakfish before storage, Acinetobacter (40%) and Moraxella (33%) were the major species, with Pseudomonas and Vibrio constituting a small percentage of the total isolates. The microflora shifted to predominantly Pseudomonas spp. during storage at 6. 0 and -4$^{\circ}C$, making up from 60 to 100% of isolated strains. During frozen storage, the percentage of isolates identified as Mnraxella increased to 40-60% of the total isolates. During cold storage, halophilic bacteria (Pseudomonas lII/IV-H and Vibrio) were predominant in oyster while nonhalophilic bacteria (Pseudomonas III/IV-NH and Moraxella) were predominant in Weakfish. Vibrio spp. were higher in oyster than in Weak fish. Listeria spp. were not isolated but unidentified ${\beta}$-hemolytic bacteria were islolated from both of the fishes during cold storage.
Sapgyo Lake is an artificial freshwater reservoir which is located to the midwest of Korea and is the main water reservoir for industry and agriculture of the region. In this study we investigated environmental factors and the change of bacterial community with the influence of surrounding inflow water and the seasonal variation using the molecular ecological approach. Water samples were collected at front of the dike in May and August, 2001. Bacterial genomic DNAs were extracted directly and purified for the amplification of bacterial 16S rDNA. Clone libraries of the 16S rDNA were constructed using pGEM-T easy vector and RFLP analysis was performed to make a group as OTUs with 4 base recognizing enzymes (MspI and HaeIII). The estimated values of richness in August sample was higher than in May. Thirty-three of 153 clones in May and thirty-eight of 131 clones in August were sequenced from forward region of bacterial 16S rDNA for about 600~800 bp. Proteobacteria, Cytophaga, gram positive bacteria and Verrucomicrobia were observed both months. Especially, Planctomyces, cyanobacteria and chloroplast appeared in August when algal bloom occurred. On the whole investigation, Sapgyo lake showed a typical community structure of estuarine and was influenced by heterochthonous organic matters from the surrounding stream.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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