Purpose: Adipose tissue-derived stem cells(ADSC) has an osteoconductive potential and demineralized bone matrix(DBM) is an osteoinductive material. A combination of DBM and ADSC wound probably create osteoinductive properties. The purpose of this study is to determine the effect of the combination of DBM and ADSC mixture on healing of rat calvarial defect. Methods: Thirty adult male Sprague-Dawley rats were randomized into 3 groups(n=10) as 1) Control, 2) DBM alone, 3) DBM with ADSC mixture. DBM with ADSC mixture group has had a 3-day preculture of ADSC from groin fat pad. An 6 mm critical size circular calvarial defect was made in each rat. Defect was implanted with DBM alone or DBM with ADSC mixture. Control defect was left unfilled. 6 and 12 weeks after the implantation, the rats were sacrificed and the defects were evaluated by histomorphometric and radiographical studies. Results: Histomorphometric analysis revealed that DBM with ADSC mixture group showed significantly higher bone formation than DBM alone group(p<0.05). Although radiographs from DBM alone group and DBM with ADSC group revealed similar diffuse radiopaque spots dispersed throughout the defect. Densitometric analysis of calvarial defect revealed DBM with ADSC mixture group significantly higher bone formation than DBM alone(p<0.05). There was correlation of densitometry with new bone formation(Spearman's correlation of coefficient=0.804, 6 weeks, 0.802, 12 weeks). Conclusion: The DBM with ADSC mixture group showed the best healing response and the osteoinductive properties of DBM were accelerated with ADSC mixture. It will be clinically applicable that DBM and ADSC mixture in plastic and reconstructive surgery, such as alveolar cleft and congenital facial deformities that bone graft should be required.
The purpose of this study was to evaluate the osteogenic capacity of water extract of danshen (Salvia miltiorrhiza Bunge). We have established in rat critical-sized calvarial defect model using the combination with collagen scaffold and danshen hydrophilic extract. All rats were extinguished at 8 weeks after bone graft surgery, and the bone regeneration ability of bone grafting sides was evaluated by plain radiography and micro-CT. These results revealed water extract of danshen had the potential to promote osteogenesis especially continuous oral administration with local treatment compared to one-shot local treatment. This compound may provide a new alternative agent for growth factors to promote bone healing and bone regeneration. In conclusion, these results suggest that danshen hydrophilic extract have the potential to promote osteogenesis in bone defects. Further studies about fusion technology with salvianolic acid B, peptides, growth factors, and scaffolds using of the combination of tissue engineering, cell engineering and mechanical engineering are needed.
We tested the bone regenerating capacity and histologic response of bioresorbable matrix-type implant, which was made with Poly(lactide-co-glycolide)(PLGA) and bone apatite for the carrier of bone morphogenetic protein(BMP). The critical size defect of 8mm in diameter was created at the calvaria of SD rats(n=18), and repaired with polymer implant with $15{\mu}g$ of rhBMP-2(n=9) or without it(n=9). At 2 weeks, 1 months after implantation, the animals were sacrificed(3 animals at every interval and group) and histologically evaluated. The calvarial defect which was repaired with polymer with BMP healed with newly formed bone about 70% of total defect. But that without BMP showed only 0 to under 30% bony healing. Inflammatory response was absent in both group through the experimental period, but there's marked foreign body giant response though it was a little less significant in polymer with BMP group. As the polymer was resorbed, the space was infiltrated and replaced by fibrovascular tissue, not by bone. In conclusion, our formulation of bioresorbable matrix implant loaded with bone morphogenetic protein works good as a bone regenerating material. However, it is mandatory to devise our system to have better osteoinductive and osteoconductive property, and less multinucleated giant cell response.
Purpose: Recombining bone morphogenetic protein (BMP) is usually acquiredfrom high level animals. Though this method is effective, its high cost limits its use. The purpose of this study was to evaluate the effect of bone morphogenetic protein-2 with protein transduction domain (BMP-2/PTD;TATBMP-2) on bone regeneration. Rat calvarial defect model and osteoblastic differentiation model using MC3T3 cell were used for the purpose of the study. Materials and Methods: MC3T3 cells were cultured until they reached a confluence stage. The cells were treated with 0, 0.1, 1, 10, 100, 500 ng/ml of BMP-2/PTD for 21 days and at the end of the treatment, osteoblastic differentiation was evaluated usingvon Kossa staining. An 8mm, calvarial, critical-size osteotomy defect was created in each of 48 male Spraque-Dawley rats (weight $250{\sim}300\;g$). Three groups of 16 animals each received either BMP-2/PTD (0.05mg/ml) in a collagen carrier, collagen only, or negative surgical control. And each group was divided into 2 and 8 weeks healing intervals. The groups were evaluated by histologic analysis(8 animals/group/healing intervals) Result: In osteoblastic differentiation evaluation test, a stimulatory effect of BMP-2/PTD was observed in 10ng/ml of BMP-2/PTD with no observation of dose-dependent manner. The BMP-2/PTD group showed enhanced local bone formation in the rat calvarial defect at 2 weeks. New bone was observed at the defect margin and central area of the defect. However, new bone formation was observed only in 50% of animals used for 2weeks. In addition, there was no new bone formation observed at 8 weeks. Conclusion: The results of the present study indicated that BMP-2/PTD(TATBMP-2) have an positive effect on the bone formation in vitro and in vivo. However, further study should be conducted for the reproducibility of the outcomes.
본 연구에서는 hydroxyapatite/poly $\varepsilon$-caprolactone composite (HA/PCL) 지지체와 matrigel을 랫드의 두개골 결손부 모델에 함께 이식 시의 골형성 정도를 평가하였다. 두개골결손부는 Sprague Dawley rat (n = 18)에서 수술적으로 형성하였으며 실험군은 Matrigel과 함께 HA/PCL 지지체를 이식한 군(M-HA/PCL group, n = 6)과 HA/PCL 지지체단독이식군(HA/PCL group, n = 6)으로 나누었고 대조군(CD group, n = 6)에는 아무 것도 이식하지 않았다. 수술 4주 후, 골형성은 방사선촬영, micro CT 및 조직검사를 통해 평가되었다. 방사선상에서 CD군의 골형성은 관찰되지 않았으나 HA/PCL과 M-HA/PCL군에서는 관찰되었고 골과 유사한 방사선비투과성이 M-HA/PCL군에서 더 많이 관찰되었다. Micro CT 평가에서 골부피는 HA/PCL군보다 M-HA/PCL군에서 더 높았으나 두 군 사이의 유의적 차이는 관찰할 수 없었다. 그러나 골밀도에서는 HA/PCL군보다 M-HA/PCL군이 더 유의적으로 높음을 확인할 수 있었다(p < 0.05). 조직학적 검사에서는 CD군에서 새로운 골은 원래 존재하던 골로부터만 형성되었으며 두개골결손부 내의 골형성은 보이지 않았다. HA/PCL군에서 새로운 골형성은 원래 존재하던 골로부터만 유래되었으나 M-HA/PCL군은 가장 많은 골형성을 보여주었으며 새로운 골이 원래 존재하던 골과 HA/PCL지지체 주변에서도 관찰되었다. 이러한 결과로 미루어볼 때 HA/PCL 지지체와 matrigel을 함께 사용하는 것이 골의 임계결손부에서 골형성을 증대시키는 효과적인 방법이 될 수 있을 것으로 생각된다.
Background: In guided bone regeneration (GBR) technique, many materials have been used for improving biological effectiveness by adding on membranes. The new membrane which was constructed with chitin-fibroin-hydroxyapatite (CNF/HAP) was compared with a collagen membrane (Bio-$Gide^{(R)}$) by means of micro-computed tomography. Methods: Fifty-four rats were used in this study. A critical-sized (8 mm) bony defect was created in the calvaria with a trephine bur. The CNF/HAP membrane was prepared by thermally induced phase separation. In the experimental group (n = 18), the CNF/HAP membrane was used to cover the bony defect, and in the control group (n = 18), a resorbable collagen membrane (Bio-$Gide^{(R)}$) was used. In the negative control group (n = 18), no membrane was used. In each group, six animals were euthanized at 2, 4, and 8 weeks after surgery. The specimens were analyzed using micro-CT. Results: Bone volume (BV) and bone mineral density (BMD) of the new bone showed significant difference between the negative control group and membrane groups (P < 0.05). However, between two membranes, the difference was not significant. Conclusions: The CNF/HAP membrane has significant effect on the new bone formation and has the potential to be applied for guided bone regeneration.
Introduction : The purpose of this study was to evaluate the possibility of the acellular dermal matrix (ADM) as a barrier membrane for bone regeneration, and to evaluate the osteogenic effect of ADM as a carrier system for rhBMP-2 in the rat calvarial defect model. Materials and Methods: An 8-mm, calvarial, critical-size osteotomy defect was created in each of 60 male Spraque-Dawley rats(weight $250{\sim}300g$). Three groups of 20 animals, each received either rhBMP-2(0.025mg/ml) in an ADM carrier, ADM only, or negative surgical control. And each group was divided into 2- and 8-weeks healing intervals. The groups were evaluated by histologic and histomorphometric parameters(10 animals/group/healing intervals). Data were expressed as $means{\pm}standard$ deviations($m{\pm}SD$). Comparisons between experimental and control groups were made using two-way ANOVA and post hoc t-test. Comparisons between 2 weeks and 8 weeks were made using paired t-test. The level of statistical difference was defined as P< 0.05. Results : The ADM group and rhBMP-2/ADM group results in enhanced local bone formation in the rat calvarial defect at both 2 and 8 weeks. The amount of defect closure and new bone formation were significantly greater in the rhBMP-2/ADM group relative to ADM group(P<0.05). At 8 weeks, the majority of ADM in the defect was contracted, and integrated with surrounding host tissues. In addition, host cell infiltration and neovascularization of the ADM in the absence of an inflammatory response were observed, and the newly formed bone around ADM showed a continuous remodeling and consolidation. Conclusion : The results of the present study indicated that ADM may be used as a barrier membrane for bone regeneration and that may be employed as a delivery system for BMPs.
목적: 견관절 전방 불안정성에서 관절와 및 상완골 두의 골 결손은 재탈구와 밀접히 연관되어 있다. 의미있는 골 결손이 동반된 전방 불안정성에서 적용될 수 있는 개방적 술식을 고찰하고 저자들의 경험을 소개하고자 한다. 대상 및 방법: 전방 불안정성에서 골 결손에 대해 연구하고 발표된 논문을 조사하여 시술되고 있는 개방적 술식들 요약하고 정리하였다. 결과: 전방 관절낭 관절와 순을 복원한 후 재탈구를 예방하기 위해 수술 전에 방사선학적으로 골결손을 정확히 평가하는 것은 중요하다. 관절와 결손을 복원하기 위해 오구돌기 이전술(Bristow 술식 또는 Latarjet 술식)이나 자가 장골 이식을 사용할 수 있고, 상완골 두의 후상방골 결손 (Hill-Sachs병변)에 대해서는 회전 절골술이나 동종골 이식 등이 사용될 수 있다. 골 결손에 대한 인공 관절 치환술은 시도되고 있으나 아직 제한적이며 더 많은 연구가 필요하다. 결론: 개방적 술식을 통해 골 결손을 복원해야 재탈구의 위험을 낮출 수 있다. 관절경술을 통한 골 병변의 치료가 시도되고 있으나 아직도 장기간의 노력과 연구가 필요하다.
Purpose: Hyaluronic acid (HA) affects angiogenesis and promotes the migration and differentiation of mesenchymal cells, thereby activating the osteogenic ability of osteoblasts. Although studies on the action of HA during bone regeneration are being actively conducted, the optimal dose of HA required for bone regeneration remains unclear. Therefore, the purpose of this study was to elucidate the most effective HA dose for bone formation using a rat critical-size defect model. Methods: Thirty rats were randomly divided into 5 groups, with 6 rats in each group. An absorbable collagen sponge soaked with HA or saline was used to fill an 8-mm defect, which was then covered with a collagen membrane. Different treatments were performed for each group as follows: (1) saline control, (2) 1 mg/mL HA, (3) 25 mg/mL HA, (4) 50 mg/mL HA, or (5) 75 mg/mL HA. After a healing period of 4 weeks, micro-computed tomography and histological analysis were performed. The obtained values were analyzed using analysis of variance and the Tukey test (P<0.05). Results: At week 4, the 75 mg/mL HA group had the highest bone volume/total volume ratio, new bone, and bone fill among the 5 groups, and these values were significantly different from those observed in the control group (P<0.01) and 1 mg/mL HA group (P<0.001). More active bone formation was observed in the higher-dose HA groups (25 mg/mL, 50 mg/mL, and 75 mg/mL HA), which included a large amount of woven bone. Conclusions: The 75 mg/mL HA group showed better bone formation than the other groups (1, 25, and 50 mg/mL HA and control).
This study was undertaken to investigate possibility of the allogenic type I collagen inducing osteoinduction or osteoconduction at critical sized bone defect in the rabbit. Twenty Newzealand white rabbit, weighted from 2.8 kg to 3.5 kg, were used in this study. The skull was exposed and two bony defects were created with diameter of 10 mm. Group I(n=10), the bony defects was grafted from the other side bone. Group II(n=10), the bony defects was grafted by the allogenic type I collagen with bone morphogenic protein(BMP). Group III(n=10), the bony defects was grafted by the allogenic type I collagen only. Group IV(n=10), the bony defects was lefted with no grafts. The grafted bones and allogenic type I collagen were investigated with radiologic densitometry, histologic analysis and immunohistochemistry after 12 weeks. No major difference was observed in the gross finding between Group I, II, III, but dura mater was exposed in bony defect,the Group IV. The radiologic study demonstrated more bony opacity in the Group I, but the other groups did not demonstrate a significant difference. In the histologic study, grafted bone edge was completely consolidated with original bone in group I and new bone ingrew into the grafted allogenic type I collagen(group II, III),but there is no bone regeneration from the original bony edge in the group IV. The percent of the new bone formation by cross-sectional area was considered statistically significant at a p value of less than 0.05(p<0.05). In the immunohistochemistry study about BMP antibodies, the group IV demonstrated osteogenic activity in front of advancing original bone edge, in which the osteoblast stained strongly for BMP antibodies, but other group does not demonstrated any osteoblastic expression. There was no immunologic rejection. In conclusion, this results do not demonstrate that the allogenic type I collagen is useful for bone substitute, but the characters of the collagen, such as pliability, easy-handling, sponge-like structure, are useful in interpositional bone graft substitutes. The further evaluation of long term results about the resorption, immunologic tissue reaction, response of applied tissue growth factor to the allogenic collagen is needed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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