Ritika Singh;Ayushi Jain;Jayanth Kumar Palanichamy;T. C. Nag;Sameer Bakhshi;Archna Singh
Applied Microscopy
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제51권
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pp.20.1-20.12
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2021
We explored the link between mitochondrial biogenesis and mitochondrial morphology using transmission electron microscopy (TEM) in lymphoblasts of pediatric acute lymphoblastic leukemia (ALL) patients and compared these characteristics between tumors and control samples. Gene expression of mitochondrial biogenesis markers was analysed in 23 ALL patients and 18 controls and TEM for morphology analysis was done in 15 ALL patients and 9 healthy controls. The area occupied by mitochondria per cell and the cristae cross-sectional area was observed to be significantly higher in patients than in controls (p-value=0.0468 and p-value<0.0001, respectively). The mtDNA copy numbers, TFAM, POLG, and c-myc gene expression were significantly higher in ALL patients than controls (all p-values<0.01). Gene Expression of PGC-1α was higher in tumor samples. The analysis of the correlation between PGC-1α expression and morphology parameters i.e., both M/C ratio and cristae cross-sectional area revealed a positive trend (r=0.3, p=0.1). The increased area occupied by mitochondria and increased cristae area support the occurrence of cristae remodelling in ALL. These changes might reflect alterations in cristae dynamics to support the metabolic state of the cells by forming a more condensed network. Ultrastructural imaging can be useful for affirming changes occurring at a subcellular organellar level.
This study aims to demonstrate the effect of SOD (superoxide dismutase), one of the antioxidant enzymes, on the ultrastructural changes in the parietal cells caused by the administration of cisplatin in the rat. A total of 60 healthy Sprague-Dawley rats weighing about 200 gm were used as experimental animals. Cisplatin (6 mg/kg) was administered intraperitoneally to rats pretreated with 15,000 unit/kg of SOD or rats without the pretreatment. The experimental animals were sacrificed at 6 hours, 12 hours, 24 hours and 3 days after the administration of cisplatin. The results were as follows: 1. SOD alone did not affect the ultrastructural changes in the gastric parietal cells in the rat. 2. Irregular shaped mitochondria, mitochondria with dim cristae, dilated cristae, ruptured outer membrane, electron lucent matrix and degenerative mitochondria were seen in cisplatin treated rat. Whorled membranous body, many lysosomes and large vacuole were observed in the gastric parietal cells in cisplatin treated rat. 3. Mitochondria with dilated cristae and electron lucent matrix and irregular shaped mitochondria were observed in the gastric parietal cells of the cisplatin treated rat with pretreatment of SOD. These results suggest that SOD attenuates the toxic effect of the cisplatin in the gastric parietal cells of the rat.
The topology of the enzyme has been investigated by biochemical studies including chemical labeling and cross linking. Thirteen subunits(polypeptides) of the cytochrome-c-oxidase have localistic characteristics of existing in the matrix side or cytoplasmic side in the mitochondria. In order to observe the distribution of the enzyme subunit on the mitochondria membrane, immunogold-labeling methods were employed. Antibody was obtained from the serum of immunized rabbit with enzyme subunit antigen which was obtained from cytochrome-c-oxidase of the beef heart muscle mitochondria. Beef heart muscle tissue as a tissue antigen was stained with immunized rabbit IgG and protein A gold complex. Electron microscopy has identified the existance of cytochrome-c-oxidase subunit $Mt_I,\;Mt_{II}\;and\;Mt_{III}$ on the membrane of cristae and outer chamber of mitochondria and the subunit $C_{IV}$ on the membrane of cristae and matrix of mitochondria. Particularly, the subunit $C_{IV}$ was also observed to exist in the sarcoplasm of muscle tissue.
Mitochondria was observed much around the nuclear membrane of liver tissue where the energy metabolism process is active. Testis tissue had a large number of undifferentiated cells, and cristae in Inner membrane of Mitochondria was not observed clearly. Morphological damage occurred first in Inner membrane rather than the outer membrane. The kidney tissue was clearly observed in the form of cristae. Radiation-induced damage occurred at the edges of both ends, and the membrane was observed bursting with the thickness of the outer membrane. Small intestine cells were observed in many mitochondria in the tissues around the villus, where bowel movements were active. Morphological damage occurred with the outer and inner membranes getting tangled. Mitochondria sensitivity to radiation was sensitized in testis and small intestine tissues, and kidney, ovary and liver tissues were found to be resistant.
과피가 녹색이고 배의 길이가 $250{\mu}$인 미성숙 과정을 거쳐 발아시까지 배 및 배유세포의 미세구조 변화를 관찰한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 배의 길이가 $250{\mu}$인 미성숙 종자의 배세포는 세포질이 비교적 충실하나 mitochondria의 Cristae 및 plastid는 미분화상태이고 가끔 dictyosome이 관찰되었다. 액포안에는 전자밀도가 높은 globoid 를 함유하는 것도 있었다. 소포체는 대부분 한면소포체이고 외형질에는 spherosome을 많이 함유하고 있었다. 배유세포는 spherosome과 이들로 둘러싸인 전자밀도가 높고 균질성인 protein body로 충만되었고 이들로 인하여 세포기관은 관찰되지 않았다. 2. 과피가 홍색인 종자의 배세포는 cristae가 발달한 mitochondria가 관찰되었으며, 전자밀도가 높은 globoid가 증가하였고 액포는 확장되었다. 배유세포에는 spherosome이 증가하고 있었으며 protein body는 확장되어. 그 내부에는 전자밀도가 높은 globoidal crystal이 분산되어 있었다. 3. 종피가 열개한 종자의 배축의 전형성층과 유아세포에서는 Golgi vacuole과 vesicle이 발달되었으며 mitochondria의 cristae는 매우 분화되었다. spherosome은 매우 많이 나타났고 유근세포, 배축의 주변세포 및 자엽세포의 액포는 매우 분화되었다. 배유세포는 spherosome으로 충만되어 있고 그 내질에는 전자밀도가 높고 작은 입자를 지니고 있었다. Protein body는 단일막으로 둘러싸여 있음이 확인되었다. 세포질내에는 구형체와 spherosome 주변의 세포질에 acid phosphatase의 활성을 나타냈다. 4. 파종시 자엽의 외면부 세포는 spherosome이 급격히 증가하였고 protein body도 관찰되었다. 세포기관들은 분화되어 있었고 전분을 함유하는 색소체가 출현하였다. 5. 파종시킨 후 발아할 때까지 자엽의 외측 $2{\sim}3$열세포, 배축의 주변세포, 유근부 세포에서는 spherosome이 증가하였고 전분립을 함유하는 plastid 도 증가하였다. 배를 구성하는 세포의 내형질의 액포부근에는 mitochondria와 microbody 가 혼재하고 있음이 관찰되었다. 발아시기가 가까워 질수록 배와 연접하는 배유세포에는 액포가 매우 분화되고 spherosome은 감소되는 반면 액포내에는 무정형의 전자밀도가 높은 물질이 증가하였다. 그밖의 배유세포에는 spherosome이 감소됨에 따라 mitochondria는 증가되고 전자밀도가 높은 소구체가 형성되어 증가되었다. Protein body의 외질은 감소되고 전자밀도가 낮은 부위는 확장되며 이는 서로 융합하여 외연부는 없어지고 기질속에 소입자들이 형성되었다. 6. 발아기의 배유세포안에는 spherosome이 감소되고, protein body는 서로 융합되어 한 세포내에 $2{\sim}3$개로 충만되어 있었다.
Vincristine, a kind of anticancerous drugs, interferes with development of microtubles and synthesis of nucleic acid and proteins in cells, and destructs cytoplasmic membrane so that mitosis of cancer cells is inhibited. Unfortunately these anticancerous effects by vioneristime are not limited to specific cancer cells, so several side effects are produced. This study was performed to explore the effects of vincristine on the fine structure of cytoplasmic organelles and cartilagenous matrix in proximal epiphyseal plate of the tibia in rat. The results were as follows: 1. Cisternae of rough endoplasmic reticulum (RER) were fragmented and sacculated, and membrane-bound ribocomes of RER were detached at 3 and 6 hours after vincristine treatment. Severely dilated, fagmented and sacculated cisternae of RER were found at 12 hours after vincristine treatment, and at 24 hours after vincristine treatment a few cisternae were framented and sacculated. At 72 hours after vincristine treatment cisternae of RER were parallely well arraged. 2. Golgi complex was atrophied at 3, 6, and 12 hours after vincristine treatment, while at 72 hours after vincristine treatment the cisternae of Golgi complex were made of 5-6 layers. 3. Mitochondria with disorganized mitochondrial cristae and outer membrane-losed mitochondria were found at 3 hours after vincristine treatment. At 6 and 12 hours after vincristine treatment mitochondria had possessed disorganized cristae, and a few mitochondria with disorganized cristae were. observed at 24 hours after vincristine treatment. While at 72 hours after vincristine treatment mitochondria were shown distinct cristae and double membranes. 4. Phagosome were begun to observe at 3 hourse after vincristine treatment, and at 24 hourse after vincristine treatment many phagosomes were found, while at 72 hours after vincristine treatment a few phagosomes were observed. 5. In the cartilagenous matrix large-sized matrix granules were decreased and collagen fibrils were dispersed at 3, 6, and 12 hours after vincristine treatment, while at 72 hours after vincristine treatment many large-sized matrix granules and numerous matrix it is suggested that although vincristine may induce the degenerative changes of the chondrocyte, resulting in changes of components of the cartilagenous matirx, these toxic effects may be regressed with time.
dbcAMP에 의한 卵子의 核 崩壞 抑制作用을 電子顯微鏡的으로 究明하기 위하여 생쥐 濾胞卵子의 微細構造를 관찰하였던 바 다음과 같은 結論을 얻었다. 1. 實驗群에서의 核膜의 彎曲은 對照群의 것에 비하여 얼마간 줄고 있으며 2種의 核膜이 정상적으로 유지되고 있으나, 核膜을 따라 무수히 많은 核膜孔이 나타나고 있다. 이는 核 崩壞 抑制와 연관성이 있는 것으로 추정할 수 있다. 2. mitochondria는 對照群에서는 細胞質 전체에 산재해 있고, cristae의 構造가 뚜렷하지 못한 未分化 혹은 移行型의 것들이 많은 반면, 實驗群에서는 mitochondria가 대체로 核 周邊部에 모여 있으며 cristae가 얼마간 발달한 상태를 나타내고 있다. 3. Iysosome은 實驗群에서 그 構造도 보다 단순하고 또 그 數도 對照群에 비하여 얼마간 減少하고 있다. 4. Golgi complex는 對照群에서는 전현적인 顆粒, 層板狀 構造를 하고있으나, 實驗群에서의 것은 그다지 뚜렷하지가 않다. 5. multivesicular body는 兩群이 모두 다수 나타나고 있으며, tonofilament도 무수히 존재하고, 細胞質 전반에 걸쳐 free ribosome이 존재하고 있다. 6. 細胞膜의 microvilli의 形態는 實驗群에서는 無定形으로 변하고 있으며, perivitellin space도 상당히 넓어지고 있다. 7. 以上의 觀察結果로 미루어 보아 dbcAMP를 處理하여 24시간 배양한 卵子와, 卵巢에서 직접 採取한 卵子의 電子顯微鏡的 構造에는 근본적인 변화는 볼 수 없으며, 實驗群의 卵子에서 核膜孔의 數가 뚜렷이 증가하고 있는 것은 dbcAMP가 核膜의 透過性에 어떠한 영향을 미치므로써 卵子의 成熟을 억제하고 있는 것이 아닌가 보인다.
The purpose of this study was to investigate the effect of chlorambucil on the mouse Leydig cell by electron microscopy. Chlorambucil suspended in the 0.5N sodium bicarbonate(pH 8.0) was injected I.P.(intraperitoneal) at a dosage of level 20mg/kg for 1 weeks, 3 weeks and 5 weeks, respectively. The results obtained from this experiment are as follows: 1. One week after the administration of chlorambucil, there was an increase in heterochromatin, swelling and cristae disruption in some mitochondria, mild vacuolation between cells and the occurrence of membrane bound inclusions in some nuclei. 2. After 3 weeks, smooth endoplasmic reticulum dilations, cytoplasmic vacuolation, mitochondrial swelling, inner mitochondrial cristae disruption, membranous whorls, and intranuclear inclusions were observed in the treated cells. 3. After 5 weeks of treatment, most mitochondria were swollen and their membranes were severely disrupted. Further, smooth endoplasmic reticulum dilations and vacuolation of the cytoplasm were apparent in the treated Leydig cells. In addition numerous membranous whorls and intranuclear inclusion bodies were present. The nuclei displayed invaginatons of the nuclear membrane and large clumps of heterochromatin. From these results it is concluded the longer the duration of chlorambucil administration, the greater the degeneration of the nucleus and cytoplasmic organelles.
The effect of melatonin on morphological changes after ischemia-reperfusion injury was investigated in rat skeletal muscle. Dimethyl-sulfoxide(DMSO) was also tested for comparison. Muscle injury was evaluated in 4 groups as a single laparotomy group(control), ischemia-reperfusion group, DMSO group, melatonin group. Left hind limb ischemia was induced for 4 hours by vascular clamping of the common femoral artery and followed by 24 hours of reperfusion. The midportion of gastrocnemius muscle was taken for histological evaluation. In light microscopic study, ischemia-reperfusion group showed severe neutrophil infiltration, interstitial edema, and partial loss or degeneration of muscle fibers. The muscle tissue of melatonin group showed relatively normal architecture with mild inflammatory cell infiltration. In electron microscopic study, dilated cisternae of sarcoplasmic reticulum, dilated mitochondria with electron loose matrix and dilated cristae, disordered or loss of myofilament, indistinct A-band and I-band, intracytoplasmic vacuoles, and markedly decreased glycogen granules were observed in ischemia-reperfusion group. But relatively well maintained A-band, I-band, Z-line, M-line, and mildly dilated mitochondria with well preserved cristae were observed in melatonin group. The DMSO group showed intermediately attenuated ultrastructural changes. The results show that melatonin improves morphologically ischemia-reperfusion injury more effectively than DMSO. In conclusion, melatonin seems to be a promising agent that can salvage the skeletal muscle from severe ischemia-reperfusion injury.
To investigate ultrastructural changes on the adrenal cortex of the developmental rats, tissues were collected at 20 days of gestation, at birth, 7 days, 15 days and 30 days after birth and studied by transmission electron microscopy (TEM) the mitochondrial cristae of zona reticularis in the adrenal cortex of rats were a vesicular type and the vesicles were formed prior to 20 days of gestation. Also, the numbers of vesicles were $56.2{\pm}25.3$ in 20 days of gestation, $174.0{\pm}74.7$ at birth, $127.8{\pm}74.7$ in 7 days, $87.1{\pm}40.8$ in 15 days and $86.7{\pm}53.8$ in 30 days after birth, In this study, it was identified that the vesicles of mitochondrial cristae were formed by budding. The dense bodies were also observed in the nuclei of cortex cells from 20 days of gestation to 30 days after birth.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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