자생밀도의 증가를 위해 도입되는 생물적 방제인자를 선정하는 데 있어서 생식형불일치는 주요한 요인이다. 배추좀나방(Plutella xylostella(L.))에 대한 효과적 생물적방제 인자로서 프루텔고치벌(Cotesia plutellae (Kurdjumov))은 집단 사이에 생식형불일치로 크게 두 생식형집단으로 분류되었다. 본 연구는 국내 서식하는 특정 프루텔고치벌 집단에 대해서 형태적 및 미토콘드리아 염기서열 지표분석을 실시하였으며, 이 결과 국내 집단이 기존에 보고된 두 생식형집단에 비해 형태적 형질과 분자지표에서 뚜렷한 차이를 보였다. 이러한 결과는 국내 프루텔고치벌 집단이 새로운 생식형집단일 수 있다는 것을 제시하였다. 또한 본 연구 결과는 외래 프루텔고치벌의 도입을 위해서는 국내 자생종과의 생식형불일치 가능성을 중요하게 고려해야 한다고 보고한다.
내부기생봉의 일종인 프루텔고치별(Cotesia plutellae)이 배추좀나방(Plutellae xylostella)을 대상으로 생물적 방제제로 이용되고 있다. 이 기생봉은 생식기관에 폴리드나바이러스를 공생시키고, 이 바이러스의 존재는 기생봉의 성공적 기생에 필수적이다. 본 연구는 암컷 프루텔고치벌 성장에 따라 플리드나바이러스의 복제시기를 결정하였으며, 또한 교미나 기주 요인에 따른 암컷의 생식 능력을 분석하였다. 기생봉은 $25^{\circ}C$ 발육조건에서 용화 2일째 겹눈과 날개와 같은 성충조직을 발달시키기 시작했으며, 5일째에는 촉각을 포함한 모든 성충조직이 발달되어 우화 직전 단계의 모습을 보였다. 프루텔고치벌 폴리드나바이러스에 대한 다클론성항체에 의한 면역블로팅 분석은 용화 4일째에서 바이러스 복제를 확인할 수 있었다. 바이러스 입자들은 용화 5일째 산란관 내부에서 투과전자현미경으로 관찰되었다. 우화후 난소소관의 길이는 변하지 않았지만, 독샘과 난소받침의 크기는 증가했다. 교미한 암컷은 $25^{\circ}C$에서 약 8일관 생존하였으며, 초기 4일동안 집중된($60\%$ 이상) 산란을 보였다. 미교미 암컷은 교미한 암컷에 비해 낮은 산란을 보였으며, 이 미수정난은 모두 수컷으로 발육하였다. 프루텔고치벌은 배추좀나방과 미국흰불나방(Hyphantria cunea)모두를 기생시킬 수 있었다. 그러나 배추좀나방에서 더 빠르고, 높은 기생율을 보였다.
Polydnaviruses are a group of double-stranded DNA viruses and are symbiotically associated with some ichneumonoid wasps. As proviruses, the replication of polydnaviruses occurs in the female reproductive organ at the pupal stage. This study analyzed the effects of two developmental hormones, juvenile hormone (JH) and ecdysteroid, on the viral replication of Cotesia plutellae bracovirus (CpBV). All 23 CpBV segments identified contained a conserved excision/rejoining site ('AGCTTT') from their proviral segments. Using quantitative real-time PCR based on this excision/rejoining site marker, initiation of CpBV replication was determined to have occurred on day 4 on the pupal stage. Pyriproxyfen, a JH agonist, significantly inhibited adult emergence of C. plutellae, whereas RH5992, an ecdysteroid agonist, had no inhibitory effect. Although RH5992 had no effect dose on adult development, it significantly accelerated viral replication. The results of immunoblotting assays against viral coat proteins support the effects of the hormone agonists on viral replication.
프루텔고치벌(Cotesia plutellae)은 단독형 내부기생봉으로 배추좀나방(Plutella xylostella)을 기주로 생활한다. 이 기생봉이 배추좀나방을 탐색하고 기주의 발육상태 및 다른 생리 상태를 인식하는데 촉각은 매우 중요한 감각기관으로 작용할 것으로 주목 받아왔다. 본 연구는 이 기생봉의 촉각 구조를 주사전자현미경으로 관찰하고, 관찰된 감각기 종류와 밀도를 바탕으로 기생생리를 이해하고자 수행되었다. 촉각 전체 길이에서 암수간 차이가 없으며 모두 16개 편절마디를 가지고 있다. 감각기 구조는 크게 긴털형감각기, 센털형감각기 그리고 판상감각기로 나누어 밀도조사를 실시하였고, 대부분 감각기는 편절에 집중적으로 분포했다. 이 가운데 긴털형감각기가 암수 모두 약 87%를 차지하였다. 편절에서 긴틸형감각기와 판상감각기는 말단 부위에서 밀도가 감소하는 반면, 센털형감각기는 말단 부위로 갈수록 증가하여, 암컷의 경우 9번째 편절 마디 이후로 급격하게 밀도 증가를 보였다. 촉각 부위별 제거에 따른 기생에 미치는 효과를 분석한 결과 편절 후반부를 제거하면 기생능력을 완전히 상실하고, 말단 4개 편절 마디를 제거해도 불과 30% 이하의 낮은 기생율을 기록했다. 이상의 결과는 프루텔고치벌의 기생에 촉각의 중요성을 보여주었으며, 특히 센털형감각기가 기주 탐색에 밀접히 관여될 가능성을 제시하였다.
As a provirus, polydnavirus has a segmented DNA genome on chromosome(s) of host wasp. It contains several genes in each segment that presumably play critical roles in regulating physiological processes of target insect parasitized by the wasp. A cysteine-rich protein 1 (CRP1) is present in the polydnavirus Cotesia plutellae bracovirus (CpBV) genome, but its expression and physiological function in Plutella xylostella parasitized by the viral host C. plutellae is not known. This CpBV-CRP1 encoding 189 amino acids with a putative signal peptide (20 residues) was persistently expressed in parasitized P. xylostella with gradual decrease at the late parasitization period. Expression of CpBV-CRP1 was tissue-specific in the fat body/epidermis and hemocyte, but not in the gut. Its physiological function was analyzed by inducing transient expression of a CpBV segment containing CpBV-CRP1 and its promoter, which caused significant reduction in hemocyte -spreading and delayed larval development. When the treated larvae were co-injected with double-stranded RNA of CpBV-CRP1, the expression of CpBV-CRP1 disappeared, whereas other genes encoded in the CpBV segment was expressed. These co-injected larvae significantly recovered the hemocyte-spreading capacity and larval development rate. This study reports that CpBV-CRP1 is expressed in P. xylostella parasitized by C. plutellae and its physiological function is to alter the host immune and developmental processes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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