Interspecific hybrids between the ASpergillus spp., A. awamori, A. usamii and A. oryzae, were obtained by nuclear transfer technique. Nuclei isolated from an auxotrophic mutant strain were transferred into the protoplasts of a recipient strain of different species. The frequency of interspecific hybrid formation by nuclear transfer was $2*10^{-5}$$-7*10^{-4}$ In contrast, no interspecific hybrid was isolated by protoplast fusion. Among the hybrids tested, 10 strains showed increased activity of some or all components of cellulases, xylanases and amylase up to more than two times. Isozyme pattern of the hybrids were analyzed by polyacrylamide gel electrophoresis and isoelectric focusing followed by activity staining, which showed that some of the hybrids have isozyme patterns unidentical to either of the two parents. By measuring the DNA contents and the sizes ofthe conidia, the karyotypes of the hybrids were estimated to be aneuploid near to haploid, diploid or triploid. It was concluded that the unclear transfer technique is much more efficient in the formation of interspecific hybrids than protoplast fusion and is very useful for the improvement of Aspergillus strains.
2010년 2월에 경기도 용인시 남사면의 소엽풍란 재배농가에서 소엽풍란의 잎과 줄기가 갈색으로 변하면서 말라죽는 피해증상이 발생하였다. 이병 식물체 표면에는 잿빛을 띤 곰팡이가 형성되어 있었으며, 주변 환경이 습할수록 병반 상에 분생포자가 더 많이 만들어지는 경향을 보였다. 균학적 특징으로 분생포자는 난형 및 타원형이고, 무색이며, 단세포로서 크기는 $5.3-16.5{\times}3.8-11.0{\mu}m$이었으며, 갈색의 분생포자경과 검정색 균핵을 형성하였다. 이러한 형태적 특성을 근거로 하여 소엽풍란의 병원균을 Botrytis cinerea로 동정하였으며, 병원성을 검정한 결과 잿빛곰팡이병의 발생을 확인할 수 있었다. 이와 같이 소엽풍란에서 발생한 병을 Botrytis cinerea에 의한 잿빛곰팡이병으로 확인하였고, 본 병을 소엽풍란 잿빛곰팡이병으로 명명하며 우리나라에서 처음으로 보고한다.
2002년 4월 창원시 대산면 농가 육묘장에서 칼란코에 잿빛곰팡이병이 발생하였다. 병징은 꽃, 꽃자루, 줄기부분이 수침상으로 물러지고 썩으면서 병반부위에 회색의 곰팡이가 많이 생기고, 심하게 감염된 부위는 결국 말라 죽었다. 분생포자는 무색, 단포자이며 난형 또는 타원형으로 크기는 8~17 ${\times}$ 5~12${\mu}m$였고, 분생자경 위에 분생포자가 아주 많이 형성되었다. 분생자경은 갈색으로 격막이 있고, 폭은 13~34${\mu}m$였다. 균사생장과 균핵형성의 적온은 $20^{\circ}C$였다. 위 특성으로 병반에서 분리한 병원균은 Botrytis cinerea에 의한 칼란코에 잿빛곰팡이병균으로 동정되었다.
2003년 4월 경남농업기술원 유리온실과 농가 육묘장에서 Botrytis cinerea에 의한 백일홍 잿빛곰팡이병이 발생하였다. 병징은 잎과 줄기에 발생하여 병든 부분이 수침상으로 물러지고 썩으면서 병반부위에 회색의 곰팡이가 많이 생기고, 심할 경우 감염된 부위는 결국 말라 죽는다. 분생포자는 무색, 단포자이며 난형 또는 타원형으로 크기는 5${\sim}$16${\times}$4${\sim}$8 ${\mu}m$였고, 분생자경 위에 분생포자가 아주 많이 형성되었다. 분생포자경은 갈색으로 격막이 있고, 폭은 12${\sim}$28 ${\mu}m$였다. 균핵의 모양은 납작하거나 부정형이고 색깔은 검은색이었다. 균사생육과 균핵형성 적온은 $20^{\circ}C$였다. 병반에서 분리한 병원균은 Botrytis cinerea Persoon: Fries에 의한 백일홍 잿빛곰팡이병으로 동정되었다.
2003년 3월 경남 남해군 창선면 비닐하우스 및 노지재배 완두포장에서 Botrytis cinerea에 의한 완두 잿빛곰팡이병이 발생하였다. 병징은 잎, 줄기 및 꼬투리에 발생하여 병든 부분이 수침상으로 물러지고 썩으면서 병반부위에 잿빛곰팡이가 많이 생기고, 심할 경우 감염된 부위는 결국 말라죽는다. 분생포자는 무색, 단포이며 난형 또는 타원형으로 크기는 $8{\sim}17{\times}5{\sim}13\;{\mu}m$였고, 분생자경 위에 분생포자가 아주 많이 형성되었다. 분생자경은 갈색으로 격막이 있고, 폭은 $14{\sim}30\;{\mu}m$였다. 균사생육과 균핵형성 적온은 $20^{\circ}C$였다. 병반에서 분리한 병원균은 Botrytis cinerea에 의한 완두 잿빛곰팡이병으로 동정되었다.
곤충자원의 대량사육을 위한 병 발생 예방과 해충의 효과적인 방제를 위하여 흰점박이꽃무지 이병충으로부터 곤충병원 사상균을 분리하였다. 전자현미경 관찰 결과 분리균주 KMA-1은 Metharizium속의 전형적인 쇠사슬형의 분생자를 paliside-like masse에 형성하였다. 따라서, 정확한 동정을 위하여 28S rRNA와 ITS염기 서열을 바탕으로 제작한 특이 프라이머쌍을 사용하여 PCR 반응을 수행하였다. 각각의 프라이머쌍을 사용한 PCR반응으로부터 특이 밴드가 검출되었으며 이 증폭 산물들의 염기 서열을 결정, 비교하였다. 분리 균주 KMA-1의 PCR산물인 28S rRNA와 ITS DNA염기서열을 GenBank데이터베이스에 등록된 염기서열 정보와의 상동성을 검색한 결과, 모두 Metarhizium anisopliae와 가장 높은 서열 상동성을 보였다. 이상의 결과로서 본 실험에서 분리 명명된 KMA-1는 M. anisopliae로 동정되었다.
2003년 4월 경남 함양군 서상면 고냉지 비닐하우스에서 Botrytis cinerea에 의한 스타티스 잿빛곰팡이병이 발생하였다. 병징은 꽃, 잎, 줄기에 발생하여 병든 부분이 수침상으로 물러지고 썩으면서 병반부위에 회색의 곰팡이가 많이 생기고, 심할 경우 감염된 부위는 결국 말라죽는다. 분생포자는 무색, 단포자이며 난형 또는 타원형으로 크기는 8∼20${\times}$6∼14 $\mu\textrm{m}$였고, 분생자경 위에 분생포자가 아주 많이 형성되었다. 분생자경은 갈색으로 격막이 있고, 폭은 14∼34 $\mu\textrm{m}$였다. 균사생육과 균핵형성 적온은 2$0^{\circ}C$였다. 병반에서 분리한 병원균은 Botrytis cinerea Persoon: Fries에 의한 스타티스 잿빛곰팡이병으로 동정되었다.
2008년부터 2009년까지 경상남도농업기술원 논포장에서 Botrytis cinerea에 의한 자운영 잿빛곰팡이병이 발생하였다. 병징은 잎과 잎자루, 줄기 부분이 수침상으로 물러지고 부패되어 병반부위에 잿빛색의 분생포자가 많이 형성하였다. 균총은 감자한천 배지에서 회갈색이며 균사생육과 균핵형성 적온은 $20^{\circ}C$였다. 분생포자는 무색이고 단포자이며 난형 또는 타원형으로 크기는 $7{\sim}16{\times}10{\mu}m$이었고, 분생포자경의 폭은 $14{\sim}28{\mu}m$였다. 병든 부위에서 병정과 분리한 병원균의 균학적 특징을 조사한 결과, Botrytis cinerea Persoon: Fries에 의한 자운영 잿빛곰팡이 병으로 동정되었다.
Chestnut blight disease caused by Cryphonectria parasitica is widely distributed throughout chestnut tree plantations in Korea. We surveyed 65 sites located at 9 provinces in South Korea, and isolated 248 virulent and 3 hypovirulent strains of chestnut blight fungus. Hypovirulent strains had dsRNA virus in the cytoplasm, which is one of the typical characteristics of hypovirulent strains. In addition, they showed more characteristics of hypovirulent strains, i.e., suppressed conidiation, reduced pigmentation in colony color, and reduced phenol oxidase activity as well as reduced pathogenicity. Hypovirulent strains, KCPH-22, KCPH-135 and KCPH-136, had a genomic dsRNA band with the molecular weight of 12.7 kb, which is the L-dsRNA of CHV1. They also had a 2.7 kb defective dsRNA band. Single conidia isolated from hypovirulent strains were cultured and various phenotypes and absence of dsRNA bands were obtained from single conidial cultures, which means that hypovirulence transmission is unstable in asexual reproduction and variations in viral heredity by asexual reproduction. Biocontrol trial using hypovirulent strains was also carried out in the chestnut tree plantations, and canker expansion in the treated trees was stopped and healed by callus formation at the margin of the canker. These results show the potentials in successful biocontrol of chestnut blight if the vegetatively compatible hypovirulent strains could be directly used around the canker formed by compatible virulent strains.
Anthracnose, caused by the ascomycete fungus Colletotrichum scovillei, is a destructive disease in pepper. The fungus germinates and develops an infection structure called an appressorium on the plant surface. Several signaling cascades, including cAMP-mediated signaling and mitogen-activated protein kinase (MAPK) cascades, are involved in fungal development and pathogenicity in plant pathogenic fungi, but this has not been well studied in the fruit-infecting fungus C. scovillei. Ste50 is an adaptor protein interacting with multiple upstream components to activate the MAPK cascades. Here, we characterized the CsSTE50 gene of C. scovillei, a homolog of Magnaporthe oryzae MST50 that functions in MAPK cascades, by gene knockout. The knockout mutant ΔCsste50 had pleiotropic phenotypes in development and pathogenicity. Compared with the wild-type, the mutants grew faster and produced more conidia on regular agar but were more sensitive to osmotic stress. On artificial and plant surfaces, the conidia of the mutant showed significantly reduced germination and failed to form appressoria. The mutant was completely non-pathogenic on pepper fruits with or without wounds, indicating that pre-penetration and invasive growth were both defective in the mutant. Our results show that the adaptor protein CsSTE50 plays a role in vegetative growth, conidiation, germination, appressorium formation, and pathogenicity in C. scovillei.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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