Eukaryotic cells consist of a complex network of thousands of proteins present in different organelles where organelle-specific cellular processes occur. Identification of the subcellular localization of a protein is important for understanding its potential biochemical functions. In the post-genomic era, localization of unknown proteins is achieved using multiple tools including a fluorescent-tagged protein approach. Several fluorescent-tagged protein organelle markers have been introduced into dicot plants, but its use is still limited in monocot plants. Here, we generated a set of multicolored organelle markers (fluorescent-tagged proteins) based on well-established targeting sequences. We used a series of pGWBs binary vectors to ameliorate localization and co-localization experiments using monocot plants. We constructed different fluorescent-tagged markers to visualize rice cell organelles, i.e., nucleus, plastids, mitochondria, peroxisomes, golgi body, endoplasmic reticulum, plasma membrane, and tonoplast, with four different fluorescent proteins (FPs) (G3GFP, mRFP, YFP, and CFP). Visualization of FP-tagged markers in their respective compartments has been reported for dicot and monocot plants. The comparative localization of the nucleus marker with a nucleus localizing sequence, and the similar, characteristic morphology of mCherry-tagged Arabidopsis organelle markers and our generated organelle markers in onion cells, provide further evidence for the correct subcellular localization of the Oryza sativa (rice) organelle marker. The set of eight different rice organelle markers with four different FPs provides a valuable resource for determining the subcellular localization of newly identified proteins, conducting co-localization assays, and generating stable transgenic localization in monocot plants.
Five edible mountain vegetables(Saussurea sp. Aster tataricus, A. scaber. Synurus deltoides, Ligularia fischeri) were investigated on the basis of amplified DNA polymorphisms resulted from PCR (polymerase chain reaction) analysis. The sampled plants consisted of 38 individuals in 5 taxa. Only 10 primers out of 62 primers (60 random [10-mer] primers, two 15-mer [M13 core sequence, and (GGAT) sequence]) tested gave rise to polymorphisms in all of the tested plants, producing 176 DAN fragments amplified. Intraspecific polymorphisms found in each taxa showed intraspecies constancy (31.1-61.1%) in the banding patterns of individual plants: Saussurea sp. 31.1%, 15 bands, Aster tataricus, 40.9%, 18 bands, A. scaber. 38.5%, 15 bands. Synurus deltoides, 34.7%, 17 bands, and Ligularia fischeri, 61.1%, 22 brands, respectively. All five species were well classified from each other at the 0.93 level of similarity index value. Intraspecific and interspecific variations were appeared at the levels ranging from 0.62 to 0.99. Based on these results, our PCR analyses support the previous data derived from external morphology of the 5 edible mountain vegetables, but very low levels o intraspecific variations were detected in all of these taxa.
Various plastids in leaf and bracteal tissues of Cannabis sativa L. were examined by electron microscopy. Young chloroplasts without starch grain in mesophyll cells were ellipsoidal, and osmiophilic globules within them were common in stroma. During the plastid differentiation, the mature chloroplasts in mesophyll were changed in shape depending on the numbers and sizes of starch grain in stroma. Electron-dense granular substances were occurred along the outer membrane of chloroplasts in mesophyll. Typical plastids with reticulate body were present in the glandular trichomes. Electron-grey material appeared along the surface of a plastid. A light area in reticulate body is considered to represent junction point of thylakoids.
This study provides a detailed morphological description of larvae obtained from Urocampus nanus and Syngnathus schlegeli male brood fish over 20 days of culture in the laboratory. In both species, mating takes place when several males each spread their brood pouch like a wing to attract a female's attention. When the female begins to swim upward, the males follow her and receive her eggs in their brood pouches. Newborn larvae of U. nanus and S. schlegeli had already completed formation of dorsal and caudal fin rays, but not of pectoral fin rays. Pectoral fin rays were completely formed 15 days after release in S. schlegeli and 20 days after release in U. nanus. The ratio of caudal fin length to standard length increased until 8 days and decreased thereafter in S. schlegeli, while in U. nanus this ratio declined continuously after hatching. The larvae of the two species were very similar in external morphology, but well distinguished by the number of dorsal fin rays (15-16 in U. nanus vs. 39-43 in S. schlegeli), the presence of a membrane under the tail (absent in U. nanus vs. present in S. schlegeli), and the presence of melanophores in the dorsal fin (present in U. nanus vs. absent in S. schlegeli). Based on this study, U. nanus appears to be evolutionally more similar to pipefish than to seahorse.
Chronic or acute alcohol abuse often leads to liver injury associated with alcoholic hepatitis, liver fibrosis, cirrhosis, and liver cancer. In addition to the liver, alcohol abuse also induces a variety of other tissue injuries including pancreatitis, cardiomyopathy, neurotoxicity and muscle loss. Chronic skeletal muscle myopathy, independent of peripheral neuropathy, is well recognised in alcoholic patients. Several mechanisms may be involved in the pathogenesis of alcoholic myopathy. Ethanol is a potent inhibitor of muscle protein synthesis. Gastrocnemius and plantaris muscles are Type II fiber-predominant and usually considered representative of the musculature as a whole. Whereas, soleus muscle is Type I fiber predominant. Shihosogan-san is a traditional Korean medicine that is widely employed to treat indigestion and liver diseases. Muscle diseases are often related to liver diseases and conditions. We therefore tested the hypothesis that treatment with Shihosogan-san could ameliorate the ethanol-induced changes in muscle protein synthesis. Young male Sprague-Dawley rats were orally given 25% ethanol (5ml/kg, body weight) daily with Ethanol for 28 days. Normal group was similarly administrated with saline. In Shihosogan-san treated group, rats were orally administrated Shihosogan-san extract, and rats of EtOH group were given with the vehicle only. After 4 week, the morphology of gastrocnemius and plantaris muscles were assessed by hematoxylin and eosin staining. For comparative purposes, liver function was also investigated. The muscles from rats of EtOH group displayed a significant reduction in average cross section area compared to Normal group. Shihosogan-san treated group had increased fiber compared to the EtOH group. Moreover, Shihosogan-san treated group compared with EtOH group showed significantly decreased pro-apoptotic BAX expression and increased anti-apoptotic Bcl-2 expression. In conclusion, Shihosogan-san extract showed ameliorating effects on chronic alcohol toxicity in skeletal muscle.
Sikdar, Sourav;Saha, Santu Kumar;Khuda-Bukhsh, Anisur Rahman
Journal of Pharmacopuncture
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v.17
no.1
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pp.59-69
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2014
Objectives: In homeopathy, it is claimed that more homeopathically-diluted potencies render more protective/curative effects against any disease condition. Potentized forms of Condurango are used successfully to treat digestive problems, as well as esophageal and stomach cancers. However, the comparative efficacies of Condurango 6C and 30C, one diluted below and one above Avogadro's limit (lacking original drug molecule), respectively, have not been critically analyzed for their cell-killing (apoptosis) efficacy against lung cancer cells in vitro, and signalling cascades have not been studied. Hence, the present study was undertaken. Methods: 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assays were conducted on H460-non-small-cell lung cancer (NSCLC) cells by using a succussed ethyl alcohol vehicle (placebo) as a control. Studies on cellular morphology, cell cycle regulation, generation of reactive oxygen species (ROS), changes in mitochondrial membrane potential (MMP), and DNA-damage were made, and expressions of related signaling markers were studied. The observations were done in a "blinded" manner. Results: Both Condurango 6C and 30C induced apoptosis via cell cycle arrest at subG0/G1 and altered expressions of certain apoptotic markers significantly in H460 cells. The drugs induced oxidative stress through ROS elevation and MMP depolarization at 18-24 hours. These events presumably activated a caspase-3-mediated signalling cascade, as evidenced by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR), western blot and immunofluorescence studies at a late phase (48 hours) in which cells were pushed towards apoptosis. Conclusion: Condurango 30C had greater apoptotic effect than Condurango 6C as claimed in the homeopathic doctrine.
Genetic resource conservation of indigenous species is important to conserve terrestrial, aquatic and avian species throughout the world. The native Korean Oge (KO) chickens are important and protected indigenous avian species in Korea. This KO breed is very popular in Korea because of its external appearances of blackish color. The characterization of morphology and growth performances of KO were performed since 1980s, however the information is still not sufficient for breed selection. In this study, we compared various growth performances including body growth, tibia length, shank length, chest width, chest grith and length of tail feather between male and female chickens of KO and widely known White Leghorn (WL) breeds at 1 week, 2 weeks, 5 weeks, 10 weeks, and 24 weeks. We observed differences on various growth performances at different aged groups between KO and WL chickens. This study may help for the selection of chicken breeds based on age, body growth and meat production.
Ultrahistology of spermatogenic cells on spermatogenesis were analyzed from triploid males of the mud loach, Misgurnus mizolepis. All the testis of triploid males were smaller in thickness and shorter in length than those of diploid males, but the testes developmental stages in triploid males were very similar to those of diploid males. And cytological characteristics were also almost identical to each other. Also Sertoli cells with high activity were recognized at intralobuli of the testis in triploid males during the period of spermiogenesis. And then a few matured spermatozoa were observed in testis of triploid, and interstitial cells also appeared high active in interlobuli. But nucleus sizes of spermatogenic cells of triploid male according to developmental stages were larger than those of diploid overall. Especially, spermatozoa of triploid showed abnormal morphology such as two or more tail flagella, significantly larger head sizes, nucleus size, and diameter of axial filaments etc. than those from diploid.
Properties of coatings produced by warm spray were investigated in order to utilize this technique as a repair method for Al tire molds. $Al-(0-10%)Al_2O_3$ composite powder was sprayed on Al substrate by warm spraying, and the microstructure and mechanical properties of the composite coating layer were investigated. For comparative study, the properties of the coating produced by plasma spray, which is a relatively high-temperature spraying process, were also investigated. The composite coating layers produced by the two spray techniques exhibited significantly different morphology, perhaps due to their different process temperatures and velocities of particles. Whereas the $Al_2O_3$ particles in the warm sprayed coating layer maintained their initial shape before the spray, flattened and irregular shape $Al_2O_3$ particles were distributed in the plasma sprayed coating layer. The coating layer produced by warm spray showed significantly higher adhesive strength compared to that produced by plasma spray. Hardness was also higher in the warm sprayed coating layer compared to the plasma sprayed one. Moreover, with increasing the fraction of $Al_2O_3$, hardness gradually increased in both spray coating processes. In conclusion, an $Al-Al_2O_3$ composite coating layer with good mechanical properties was successfully produced by warm spray.
Microscopic structures of epidermis and palynology and isozyme analysis were examined to find out the intergeneric and interspecific relationships and consequently to confirm the position of Hanabusaya aiatica as an endemic genus among 4 genera and 9 species belonging to the Hanabusaya asiatica, Korean endemic, and its allied groups. In the examination of microscopic structures of epidermis, cell patterns of perianth and ultrastructure of seed coat were found to be useful characters for the identification of the 4 genera and 9 species. Palynological characters such as microscopic structure and overall morphology of pollen grains were, however, not enough to distinguish them because of the great variabilities in these traits. Isozyme analysis showed that H. asiatica was very closly related to Campanula punctata and C. takesimana, though there were variations among populations and collected areas in some classified groups, depending on classified groups. Based on these results, the position of H. asiatica as an endemic genus was well confirmed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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