Objectives: This study focused on PTEN and Livin expression and associations with malignancy in human renal clear cell carcinomas (RCCC). Methods: PTEN and Livin expression was assessed in 100 RCCC tissue samples, 50 paracarcinoma cases, and 20 normal renal tissue samples using the immunohistochemical Streptavidin proxidase (SP) method. The relationships between binding and corresponding biological characteristics, such as histological grade, lymph node metastases, and clinical stages were analyzed. Results: Positive PTEN expression in RCCC was significantly lower than in renal tissue adjacent to carcinoma tissue and normal renal tissue (P<0.01). Livin expression in the renal tissue adjacent to the carcinoma and normal renal tissues exhibited only low levels, whereas overall Livin expression in RCCC was statistically significant (P<0.01). In RCCC, PTEN expression rate gradually decreased with an increase in clinical stage, whereas that of Livin increased to statistically significant levels (P<0.01), PTEN and Livin levels being negatively correlated (r=-0.395, P<0.01). Conclusions: PTEN and Livin are important in RCCC development. The two factors combined are expected to provide indices for estimating RCCC malignancy and progression levels, as well as references for RCCC diagnosis and treatment.
Purpose: We investigated the expression of epithelial $Ca^{2+}$ channel transient receptor potential vanilloid (TRPV) 5 and 6 in non-small-cell lung cancer (NSCLC) and assessed their prognostic role in patients after surgical resection. Materials and Methods: From January 2008 to January 2009, 145 patients who had undergone surgical resection of NSCLCs were enrolled in the study. Patient clinical characteristics were retrospectively reviewed. Fresh tumor samples as well as peritumor tissues were analyzed for TRPV5/6 expression using immune-histochemistry (IHC) and quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). Patients were grouped based on their TRPV5 and TRPV6 levels in the tumor tissues, followed up after surgery, and statistically analyzed to examine the prognostic roles of TRPV5 and TRPV6 on patients' survival after surgical resection of NSCLCs. Results: Using IHC, among the 145 patients who had undergone surgical resection of NSCLCs, strong protein expression (grade${\geq}2$) of TRPV5 and TRPV6 was observed in a lower percentage of primary tumor tissues than in non-tumor tissues of same patients. Similar findigns were obtained with the RT-PCR test for mRNA levels. Decreased overall mRNA levels of TRPV5 and TRPV6 were associated with a worse overall survival rate (p=0.004 and p=0.003 respectively) and shorter recurrence-free survival (p<0.001 and p<0.001 respectively). The combining effect of TRPV5 and TRPV6 on survival was further investigated using multivariate analysis. The results showed that a combination of low expression of TRPV5 and TRPV6 could be an independent predictor of poor recurrence-free survival (p=0.002). Conclusions: Decreased expression of TRPV5/6 in tumor tissues was observed in NSCLC patients and was associated with shorter median survival time after surgical resection. Combined expression of TRPV5 and TRPV6 in tumor tissues demonstrated promising prognostic value in NSCLC patients.
Over-expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) has been identified as a common feature associated with clinical outcome in many types of cancer, including squamous cell carcinoma of the oesophagus (SCCO). However, the clinical importance of EGFR over-expression in SCCO remains unsettled as conflicting results exist. Therefore we carried out the present meta-analysis of published studies for clarification. A total of 13 studies including 1, 150 patients were enrolled. EGFR over-expression was positive in 722 of these cases. With EGFR over-expression, patients had higher depth of invasion, vascular invasion, and poor prognosis. However, expression had no relation with degree of differentiation, histological grade, lymph node metastasis, clinical stage or lymphatic invasion. EGFR over-expression is probably a valuable predictor for the T stage, vascular invasion and OS, and it could be used as a poor prognosis indicator for the esophageal SCC patients. Targeting therapy to EFGR should be considered to the combined treatment in SCCO.
The purpose of this study was to develop contemporary Qipao design that emphasized creative feminine beauty with a unique sense beyond the concept of traditional Qipao design. This would be achieved using the expressive technique of human liberation from the oppression of the unconscious world a supported by surrealism. Using existing literature and previous research, surrealist expression technique used in fashion were investigated and analyzed. The results are as follows. First, the possibility of new and original design beyond existing surrealistic Qipao design was demonstrated through various realistic surrealism expression techniques, such as dépaysement, objet, and trompe-l'œil techniques. This occurred by exploring various unconscious world out of fixed ideas and through expression techniques of surrealistic fashion such as imagery of body parts, metaphorical expression of objects, and position deformation and illusion. Second, Qipao design that combined objet and attempted ordinary escape by combining isolated body parts (such as hands, eyes, and lips) within the composition combine with surrealistic expression enabled various and fun surrealistic fashion designs to emerge. Third, the metaphor of surreal lips and eyes (mainly used in works of this study) presented a unique and extraordinary combination of images in accessories and partial design that used the dépaysement technique. Thus, it was possible to expand surrealistic expression by including LED wire.
Phytoestrogens, especially Yak-kong or soybean-derived isoflavones have been traditionally used as a supplement of estrogen for preventing postmenopausal osteoporosis in oriental folk medicine. In a previous study, we demonstrated that as Yak-kong and soybean increased MG-63 human osteoblastic cell proliferation, the expression of estrogen receptor $\alpha\;and\;beta\;(ER\;\alpha:\;ER\;\beta$) both were increased. However, the increased level of ER $\alpha$ is much higher than that of ER$\beta$. To determine whether the altered level of ER $\alpha$ expression affects Yak-kong or soybean induced MG-63 cell proliferation, we established cell lines stably expressing either ER $\alpha$ or antisense ER $\alpha$ RNAs. Increased expression of ER a in MG- 63 cells (ER $\alpha$-MG63) enhanced Yak-kong or soybean induced proliferation which paralleled with the enhanced expression of IGF-I. Inhibition of ER $\alpha$ expression by antisense $ER\;\alpha\;RNAs\;(As-ER\;\alpha-MG63$) caused these cells to insensitize Yak- kong or soybean induced proliferation and IGF-I expression. Furthermore, the comparable effects between Yak-kong and the combined treatment of genistein and daidzein at $0.5\;{\times}\;10^{-8}M$, which is a concentration of these two isoflavones similar to Yak-kong at 0.001 mg/ml, on cell proliferation and IGF-I expression in $ER\;\alpha-MG63\;or\;As-ER\;\alpha-MG63$ cells demonstrate that ER $\alpha$ plays an important, active role in MG-63 cell proliferation induced by phytoestrogens, especially Yak-kong or soybean derived isoflavones.
Single-chain antibodies against epidermal growth factor receptor variant III (EGFRvIII) are potentially promising agents for developing antibody-based cancer treatment strategies. We described in our previous study the successful expression of an anti-EGFRvIII scFv antibody in Escherichia coli. However, we could also observe the formation of insoluble aggregates in the periplasmic space, limiting the production yield of the active product. In the present study, we investigated the mechanisms by which growth conditions could affect the expression of the soluble anti-EGFRvIII scFv antibody in small-scale E. coli NiCo21(DE3) cultures, attempting to maximize production. The secreted scFv molecules were purified using Ni-NTA magnetic beads and protein characterization was performed using SDS-PAGE and western blot analyses. We used the ImageJ software for protein quantification and determined the antigen-binding activity of the scFv antibody against the EGFRvIII protein. Our results showed that the highest percentage of soluble scFv expression could be achieved under culture conditions that combined low IPTG concentration (0.1 mM), low growth temperature (18℃), and large culture dish surface area. We found moderate-yield soluble scFv production in the culture medium after lactose-mediated induction, which was also beneficial for downstream protein processing. These findings were confirmed by conducting western blot analysis, indicating that the soluble, approximately 30-kDa scFv molecule was localized in the periplasm and the extracellular space. Moreover, the antigen-binding assay confirmed the scFv affinity against the EGFRvIII antigen. In conclusion, our study reveals that low-speed protein expression is preferable to obtain more soluble anti-EGFRvIII scFv protein in an E. coli expression system.
This paper deals with the tradition and identity of physical expression(${\bar{a}}{\dot{n}}gika$ abhinaya) system in Indian traditional theatre and dance. The ${\bar{a}}{\dot{n}}gika$ abhinaya of Indian dance and theatre has been stylized through long terms and thereby defines their identity and peculiarity by its highly stylized expression techniques while following dramatic way($n{\bar{a}}tya$-dharmi). The ${\bar{a}}{\dot{n}}gika$ abhinaya is said to had been derived from the ritualistic practice of ancient Vedic period(B.C. 15th-B.C. 5th c.), which is most clearly exemplified in hand gesture(hasta mudra). In $N{\bar{a}}tya$${\acute{S}}astra$, ${\bar{a}}{\dot{n}}gika$ abhinaya is explained in detail. It is classified broadly into facial expression(mukhaja abhinaya), gesture expression(śārīra abhinaya), movement expression($cest{\bar{a}}krita$ abhinaya). Further, $N{\bar{a}}tya$${\acute{S}}astra$ divides their various usages by parts which include head, glance, eyes, nose, eyelid, cheek, lower lip, chin, mouth, hand, chest, waist, belly, hip. thigh, claf, foot. Besides, it explains diverse ways of foot movement($c{\bar{a}}ri$), standing poses(sthana), gait(gati) and their combined movements(mandala). Many forms of Indian traditional theatre and dance basically follows the rule of ${\bar{a}}{\dot{n}}gika$ abhinaya proposed in $N{\bar{a}}tya$${\acute{S}}astra$, which identifies their unique characteristics.
Choroquine (CQ) and valproic acid (VPA) have been extensively studied for biological effects. Here, we focused on efficacy of combined CQ and VPA on osteosarcoma cell lines. Viability of osteosarcoma cell lines (U20S and HOS) was analyzed by MTT assay. Apoptotic assays and colony formation assays were also applied. ROS generation and Western Blotting were performed to determine the mechanism of CQ and VPA combination in the process of apoptosis. The viability of different osteosarcoma cell lines significantly decreased after CQ and VPA combination treatment compared with either drug used alone, and apoptosis was increased significantly. ROS generation was triggered leading to expression of apoptosis related genes being increased and of antiapoptotic related genes being decreased. From our data shown here, CQ and VPA combination treatment in vitro enhanced cytotoxicy to osteosarcoma cells.
Senescence marker protein 30 (SMP30), a hepatocellular carcinoma (HCC) associated antigen, was earlier shown by our research group to be highly expressed in HCC paracancerous tissues, but have low levels in HCC tissues. In order to detect anti-SMP30 antibody in serum of HCC patients, we established pET30a-SMP30 and pColdIII-SMP30 expression systems in Escherichia coli. However, the expression product was mainly in the form of inclusion bodies. In this research, we used several combinations of chaperones, four molecular chaperone plasmids with pET30a-SMP30 and five molecular chaperone plasmids with pColdIII-SMP30 to increase the amount of soluble protein. Results showed that co-expression of HIS-SMP30 with pTf16, combined with the addition of osmosis-regulator, and a two-step expression resulted in the highest enhancement of solubility. A total of 175 cases of HCC serum were studied by ELISA to detect anti-SMP30 antibody with recombinant SMP30 protein. Some 22 were positive and x2 two-sided tests all showed P>0.05, although it remained unclear whether there was a relationship between positive cases and clinical diagnostic data.
This study demonstrated that upregulation of gene expression of endoplasmic reticulum (ER) stress chaperones (Bip, ERp29, calnexin, and PDI), ER stress sensors (PERK, ATF6, and Ire1), and cAMP phosphodiesterase 7A1 (cAMP PDE7A1) was induced by ER stresses in FRTL5 cells. While removing A23187 from the culture medium restored upregulation of cAMP PDE7A1 gene expression, removal of thapsigargin did not recover its expression. In addition, cAMP PDE7A1 gene expression was strongly inhibited by treatment with A23187 combined with thyroid stimulating hormone (TSH). The results are the first to show that ER stress induces cAMP PDE7A1 gene expression.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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