Mahmodi, Farshid;Kadir, J.B.;Puteh, A.;Pourdad, S.S.;Nasehi, A.;Soleimani, N.
The Plant Pathology Journal
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제30권1호
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pp.10-24
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2014
Genetic diversity and differentiation of 50 Colletotrichum spp. isolates from legume crops studied through multigene loci, RAPD and ISSR analysis. DNA sequence comparisons by six genes (ITS, ACT, Tub2, CHS-1, GAPDH, and HIS3) verified species identity of C. truncatum, C. dematium and C. gloeosporiodes and identity C. capsici as a synonym of C. truncatum. Based on the matrix distance analysis of multigene sequences, the Colletotrichum species showed diverse degrees of intera and interspecific divergence (0.0 to 1.4%) and (15.5-19.9), respectively. A multilocus molecular phylogenetic analysis clustered Colletotrichum spp. isolates into 3 well-defined clades, representing three distinct species; C. truncatum, C. dematium and C. gloeosporioides. The ISSR and RAPD and cluster analysis exhibited a high degree of variability among different isolates and permitted the grouping of isolates of Colletotrichum spp. into three distinct clusters. Distinct populations of Colletotrichum spp. isolates were genetically in accordance with host specificity and inconsistent with geographical origins. The large population of C. truncatum showed greater amounts of genetic diversity than smaller populations of C. dematium and C. gloeosporioides species. Results of ISSR and RAPD markers were congruent, but the effective maker ratio and the number of private alleles were greater in ISSR markers.
The production of dihydroxynaphthalene (DHN) melanin is known to be essential factor for pathogenicity in Colletotrichum lagenarium. However, the genetic diversity of melanin genes was not much known among Colletotrichum spp. To investigate the variability of melanin gene in Colletotrichum spp. that cause anthracnose on diverse crops including tomato, we cloned and sequenced partial sd, one of DHN melanin genes encoding for scytalone dehydratase, from eight strains of C. coccodes, C. acutatum, C. truncatum C. caricae, and C. musae. The size of PCR-amplified sd ranged 437 bp to 545 bp. The nucleotide sequence identity of sd among the Colletotrichum strains tested varied from 49% to 99%. All of the PCR-amplified sd from eight strains contain an intron and have two exons coding for 122 amino acids. Overall, the size and nucleotide sequence of sd varied among the five Colletotrichum spp. Sequence identity of the predicted scytalone dehydratase protein of 122 amino acids ranged 50 to 99%. Phylogentic analysis based on the sd nucleotide sequences revealed that the five Colletotrichum spp. could be genetically divided.
Colletotrichum spp.는 광범위한 기주범위를 갖는 다범성균으로 각종작물에 피해를주는 중요한식물병원진균이다. 최근 국내에서 널리 재배되고 있는 단감, 사과, 복숭아, 포도 등에 탄저병 이 발생하여 많은 경제적 손실을 초래하고 있다. 탄저병원균의 경우 기존에는 주로 형태적 특징이나 배지 상에서의 특성, 기주에 대한 병원성의 차이에 의존하여 분류를 해 왔다. 그러나 최근에는 병원균의 분류에 있어 문제점을 해결하기 위하여 분자생물학적 방법을 이용하고 있다. 이에 본 실험에서는 Random Amplified Polymorphism DNAs (RAPD)와 Ploymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) 기법을 이용하여 단감나무에 탄저병을 일으키는 균들 간에 유연관계를 밝혔다. 유연관계 분석결과 크게는2개의 그룹으로 나뉘었고 작게는5개의 그룹으로 나뉘는 것을 알 수 있었다.
Paclitaxel (taxol) has long been used as a potent anticancer agent for the treatment of many cancers. Ever since the fungal species Taxomyces andreanae was first shown to produce taxol in 1993, many endophytic fungal species have been recognized as taxol accumulators. In this study, we analyzed the taxol-producing capacity of different Colletotrichum spp. to determine the distribution of a taxol biosynthetic gene within this genus. Distribution of the taxadiene synthase (TS) gene, which cyclizes geranylgeranyl diphosphate to produce taxadiene, was analyzed in 12 Colletotrichum spp., of which 8 were found to contain the unique skeletal core structure of paclitaxel. However, distribution of the gene was not limited to closely related species. The production of taxol by Colletotrichum dematium, which causes pepper anthracnose, depended on the method in which the fungus was stored, with the highest production being in samples stored under mineral oil. Based on its distribution among Colletotrichum spp., the TS gene was either integrated into or deleted from the bacterial genome in a species-specific manner. In addition to their taxol-producing capacity, the simple genome structure and easy gene manipulation of these endophytic fungal species make them valuable resources for identifying genes in the taxol biosynthetic pathway.
Colletotrichum spp.는 광범위한 기주 범위를 갖는 다범성 균으로 각종 작물에 피해를 야기시키는 중요한 식물병원 진균이다. 최근 국내에서 널리 재배되고 있는 단감, 사과, 복숭아, 포도 등에 탄저병이 발생하여 많은 경제적 손실을 초래하고 있다. 탄저병 병원균의 경우 기존에는 주로 형태적 특성이나 배지상에서의 특성, 기주에 대한 병원성의 차이에 의존하여 분류를 해 왔다. 그러나 최근에는 병원균의 분류에 있어 문제점을 해결하기 위하여 분자생물학적 방법을 이용하고 있다. 최근에는 RAPD(ramdomly amplified polymorphic DNAs)와 RFLP(restriction fragment length polymorphism)의 장점만을 살린 AFLP(amplified fragment length polymorphism)기법이 유연관계 분석에 있어서 각광을 받고 있고 rDNA부위를 증폭하여 제한효소를 이용하여 다양성을 보는 방법이 많이 이용되고 있다. 이에 본 실험에서는 AFLP 기법 이용하여 단감나무에 탄저병을 일으키는 균들간에 유연관계를 밝혔다. AFLP결과에서 variation이 심하여 각각의 특징적인 band를 검출할 수 있었다. 특히 단감나무에 병해를 일으키는 탄저병 병원균 2개의 종이 복합적으로 관여하는 사실을 알 수 있었다.
구기자 탄저병 방제를 위한 살균제를 선발하기 위하여 13개의 탄저병 균주는 구기자의 청양재래 품종에 대해서 숙과와 미숙과 모두에서 상처 접종 시 병원성이 강하게 나타났다. 또한 15종 살균제의 균사생육 억제 효과를 실내 검정하여 탄저병균에 대한 균사 생장 억제 효과가 우수한 dithianon WG, tebuconazole SC, tebuconazole WG, trifloxystrobin+tebuconazole SC, azoxystrobin SC 및 polyoxin D zinc salt+carbendazim WP 등 6종의 살균제를 선발하였다. 선발한 살균제들의 포장에서 병 방제 효과를 조사한 결과 dithianon WG, tebuconazole WG, trifloxystrobin+tebuconazole SC, tebuconazole SC 및 azoxystrobin SC 등 5종의 살균제가 높은 방제효과를 나타냈다.
Sweet persimmon (Diospyros kaki Thunb.) is widely cultivated in the southern part of Korea and its cultivation is increasing. However, anthracnose disease caused by Colletotricuhum species is one of the major hinderances to the cultivation and production of sweet persimmon. Therefore, in the current study, PCR was used to specifically detect Colletotrichum spp., based on the sequences of the ITS II regions in the rDNA. Using the sequence data, CO-1 was designated to detect Colletotrichum together the with ITS 4 primer. The result showed that a single segment of ca. 500 bp was observed only in Colletotrichum, but not in any other fungal and bacterial isolates. The annealing temperatures and template DNA quantites were also investigated to identify optimal conditions for detection. Using these species-specific primers, a unique band was obtained at annealing temperatures ranging from $55^{\circ}C\;and\;61^{\circ}C$ and template DNA levels from 10 pg- $10{\mu}g$.
Anthracnose of pepper casued by Colletotrichum spphas been a great problems for pepper production in Korea and China. Especially Colletotrichum gloeosporioides was found predominantly over cultivation areas during infection periods and caused severe rots on bath unripe and ripe fruits that resulted in major yield losses. In this study, comparison of Colletrichum spp.isolated from Korea and China in morphology and pathgenicity, and RAPD-PCR analysis were conducted. Based on morphological characteristics, the pathogen isolates, K1 and C1, K2 and C2, and K3 and C3 were identified as Colletotrichum gloeosporioides (G) type, C. gloeosporioides (R) type and C. coccodes, respectively. in pathogenicity test, K1 and C1, and K2 and C2 were found to attack mainly fruits and to be the most virulent among isolates. K3 and C3 were strongly virulent to leaves and seedling. Pathogenicity between Korean and Chinese isolates. K3 and C3 were strongly virulent to leaves and seedling. Pathogenicity between Korean and Chinese isolates did not show any difference. Results of the RAPD-PCR analyses indicate the varying levels of molecular diversity within and between Colletotrichum spp.of Korea and China. The similarities between K1 and C1, K2 and C2, and K3 and C3 were 85.71%, 71.43% and 50.0% respectively.
2007년 경상남도농업기술원 과수 포장에 재배중인 블루베리 과실에서 이상증상이 발생하였다. 병징은 성숙한 과실이 수침상으로 물러지고 부패되어지면서 낙과되어거나 미이라 상태로 남아 있으며 과실표면에 분홍색 포자퇴를 많이 형성하였다. 균총은 감자한천배지에서 회색이며 배지표면에 분홍색의 포자퇴를 많이 형성하였다. 분생포자의 모양은 단세포, 무색, 끝이 약간 무딘 원통형이며 크기는 $10{\sim}20{\times}3{\sim}5\;{\mu}m$이었다. 부착기는 갈색이고 곤봉형, 계란형이며 크기는 $6{\sim}18{\times}4{\sim}12\;{\mu}m$이었다. 균사생육 적온은 $25{\sim}30^{\circ}C$였다. 분리된 병원균으로 병원성을 검정한 결과, 자연 감염된 병징과 동일하였다. 이상의 결과를 가지고 본 병해를 Colletotrichum gloeosporioides에 의한 블루베리 탄저병으로 명명할 것을 제안한다.
Kim, Wan-Gyu;Lee, Byung-Dae;Cho, Weon-Dae;Shin, Dong-Bum
The Plant Pathology Journal
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제17권4호
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pp.236-241
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2001
Serve outbreaks of anthracnose were observed on perilla plants grown in greenhouses and open fields in several locations in Korea during the disease survey from 1997 to 2000. A total of 53 isolates of Colletotrichum spp. and Glomerella sp. was obtained from diseased perilla plants and identified based on their morphological and cultural characteristics. Forty isolates were identified as Colletotrichum gloeosporioides, three isolates as C. coccodes, five isolates as C. dematium, and the other five isolates as Glomerella cingulata, the teleomorph of C. gloeosporioides. All isolates of C. gloeosporioides tested by artificial inoculation were strongly virulent on perilla plants, but isolates of the other species were weakly or not virulent. Anthracnose symptoms induced on the perilla plants by artificial inoculation with the isolates of C. gloeosporioides were similar to those observed in the fields. This study revealed that C. gloeosporioides is the main causal fungus of perilla anthracnose.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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