Protein productivity by the cellulolytic fungi, Trichoderma viride(MTCC 800), Chaetomium globosum and Aspergillus terreus was compared in co-culture and mixed culture fermentations of cashewnut bran. Co-cultures were more effective in substrate saccharification, which ranged between $85{\sim}88%$ compared to the $62{\sim}67%$ saccharification shown by the monocultures. Maximum saccharification was induced by T. viride and C. globosum co-culture resulting in the highest 34% release of reducing sugars. The maximum 16.4% biomass protein and the highest protein productivity(0.58%) were shown by T. viride and A. terreus co-culture. A. terreus performed better in co-culture in the presence of T. viride rather than with C. globosum. Among the cellulolytic enzymes, FPase(Filter Paper Cellulase) activity was significantly higher in all the co-cultures and in the mixed culture than in their respective monocultures. Mixed culture fermentation involving all the three fungi was not effective in increasing the per cent saccharification or the biomass protein content over the co-cultures.
This work aimed to evaluate the influence of culture conditions on laccase production in the co-culture of wood-rotting fungus with Trichoderma sp. The effects of infection extent, infection time, and culture filtrate of Trichoderma sp. on the laccase production by wood-rotting fungus in co-culture were examined. T. rubrum LKY-7 and T. longibrachiatum were selected as fungi which are effective in co-culture for laccase production. A significant increase in laccase activity was observed when T. rubrum LKY-7 was co-cultured with T. longibrachiatum in glucose-peptone liquid medium, yielding an increase of more than 5 times in laccase activity, as compared with control. Laccase production by T. rubrum LKY-7 during co-culturing was significantly influenced by the infection extent and the infection time of T. longibrachiatum. Maximal laccase activity was obtained when T. rubrum LKY-7 culture was infected by T. longibrachiatum after 3 days of cultivation at an inoculum size ratio of 0.5 to 1. The addition of culture filtrate or autoclaved mycelium of T. longibrachiatum to T. rubrum LKY-7 culture did not significantly enhance laccase production by T. rubrum LKY-7 as compared with control (mono cultures of T. rubrum LKY-7).
This study investigated the effect of a co-culture of Scenedesmus dimorphus and nitrifiers using artificial wastewater on the removal of ammonium, nitrate and phosphate in the advanced treatment. To test the synergistic effect of the co-culture, we compared the co-culture treatment with the cultures using S. dimorphus-only and nitrifiers-only treatment as controls. After 6 days of incubation, nitrate was removed only in the co-culture treatment and total amount of N removal was 1.3 times and 1.6 times higher in the co-culture treatment compared to those in the S. dimorphus- and nitrifiers-only treatments, respectively. In case of total amount of P, co-culture treatment removed 1.2 times and 12 times more P than the S. dimorphus -and nitrifiers-only conditions, respectively. This indicates that the co-culture improved removal rates for ammonium, nitrate, and phosphate. This further implies that there was no need for denitrification of nitrate and luxury uptake of P processes because nitrate and phosphate can be removed from the uptake by S. dimorphus. In addition, co-culture condition maintained high DO above 7 mg/L without artificial aeration, which is enough for nitrification, implying that co-culture has a potential to decrease or remove aeration cost in the wastewater treatment plants.
The present study was done to investigate the effect of co-culturing muscle satellite cells (MSCs) and intramuscular preadipocytes (IPs) on the differentiation of adipocytes and muscle cells isolated from Korean native cattle. MSCs and IPs were single-cultured in 10% fetal bovine serum/Dulbecco's modified Eagles medium (FBS/DMEM) for 48 h followed by culturing in 5% FBS/DMEM as the growth media. Then, the growth media was replaced by differentiation media composed of 2% FBS/DMEM without any additives for the single- or co-culture of muscle cells and intramuscular adipocytes to induce the differentiation of both cell types. Cell differentiation was measured by morphological investigation and cytosolic enzyme analysis of glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH) for the adipocytes and creatine kinase (CK) for the muscle cells. In the morphological test, the presence of muscle cells did not stimulate adipocyte differentiation showing more differentiation of the adipocytes in the single-culture compared to the co-culture condition. However, the differentiation of muscle cells was promoted by adipocytes in the co-culture. The results of the enzymatic analysis were highly associated with the morphological results with a statistically higher GPDH activity (p < 0.05) appearing in the single-culture than in the co-culture, whereas the opposite was true for the CK activity of the muscle cells (p < 0.05). By manipulating in vivo the milieu using a co-culture, we could detect the difference in the rate of cell differentiation and suggest that a co-culture system is a more reliable and precise technique compared to a single-culture. Further studies on various co-culture trials including supplementation of differentiating substances, gene expression analysis, etc. should be done to obtain practical and fundamental data.
본 연구는 여성의 손으로부터 분리한 두 유산균의 co-culture에 의한 향장활성에 대한 것이다. Lactobacillus rhamnosus (L. rhamnosus)와 Lactobacillus paracasei (L. paracasei)를 함께 배양하는 것은 최초이며, co-culture를 이용한 유산균은 tyrosinase 저해율이 L. paracasei와 L. rhamnosus에 비해 20.68%로 가장 높은 수치를 보였다. 또한, co-culture 유산균은 melanin 생성 저해율에서도 63.5%의 가장 높은 활성을 보였으며, 주름개선활성에 영향을 미치는 MMP-1의 생성량이 3726.3 pg/mL로 확인되었다. 반면 단일 유산균 배양시 얻어지는 MMP-1 생성량은 각각 L. rhamnosus가 13613.5 pg/mL, L. paracasei는 13012.0 pg/mL이 확인되었다. Collagen 생성량을 확인한 결과 co-culture 유산균이 380.7 ng/mL로 323.4 ng/mL의 양이 확인된 L. paracasei와 304.1 ng/mL의 양이 확인된 L. rhamnosus보다 많은 양이 생성됨을 확인하였다. 상기의 결과는 유산균의 co-culture가 향장활성 증진을 시킬 수 있다는 것을 나타내고, 이는 향장 활성에 영향을 미치는 항산화 활성을 측정한 결과 단일 유산균 배양을 통한 결과보다 co-culture 유산균의 항산화 활성이 더 높은 것으로 확인할 수 있었다.
Objectives : I investigated whether snake venom can synergistically strengthen the cytotoxic effects of NK-92 cells, and enhance the inhibition of the growth of lung cancer cells including NCI-H358 through the induction of death receptor dependent extrinsic apoptosis. Methods : Snake venom toxin inhibited cell growth of NCI-H358 Cells and exerted non influence on NK-92 cell viability. Moreover, when they were co-cultured with NK cells and concomitantly treated with $4{\mu}g/m{\ell}$ of snake venom toxin, more influence was exerted on the inhibition of growth of NCI-H358 cells than BV or NK cell co-culture alone. Results : The expression of Fas, TNFR2 and DR3 and in NCI-H358 lung cancer cells was significantly increased by co-culture of NK-92 cells and treatment of $4{\mu}g/m{\ell}$ of snake venom toxin, compared to co-culture of NK-92 cells alone. Coincidentally, Bax, caspase-3 and caspase-8 - expressions of pro-apoptotic proteins in the extrinsic apoptosis pathway, demonstrated significant increase. However, in anti-apoptotic NF-${\kappa}B$ activities, activity of the signal molecule was significantly decreased by co-culture of NK-92 cells and treatment of $4{\mu}g/m{\ell}$ of snake venom toxin, compared to co-culture of NK-92 cells or snake venom toxin treated by NCIH358 alone. Meanwhile, in terms of NO generation, there is a significant increase, in co-culture of NK-92 cells with NCI-H358 cells as well as the co-culture of NK-92 cells and concomitant treatment of $4{\mu}g/m{\ell}$ of snake venom toxin. However, no synergistic increase of NO generation was shown in co-culture of NK-92 cells and treatment of $4{\mu}g/m{\ell}$ of snake venom toxin, compared to co-culture of NK-92 cells with NCI-H358 cells. Conclusion : Consequently, this data provides that snake venom toxin could be useful candidate compounds to suppress lung cancer growth along with the cytotoxic effect of NK-92 cells through extrinsic apoptosis.
These experiments were carried out to investigate the effect of a co-culture with granulosa cells on in vitro maturation, fertilization and development of bovine follicular oocytes. The bovine ovaries were obtained at a slaughter house and the follicular oocytes were recovered by aspirating the follicular fluid from the visible follicles of diameter 2-6mm. Bovine oocytes were matured in vitro for 24-26 hr and then fertilized in vitro using epididymal spermatozoa capacitated by preincubation for 2-3hr in BO solution containing BSA(5mg/ml) and caffein(25mM). Eight hours after insemination, the oocytes were cultured in a co-culture system with granulosa cells. The rates of maturation of the follicular oocytes cultured in a co-culture system with granulosa cells were 83.1%, the rate of fertilization of the follicular oocytes culture in a co-culture in a co-culture system with granulosa cells were 76.9%, respectively. No significant difference are observed between control and treatment in maturation and fertilization rates. The rates of embryos developed to 2-, 4-, 8-, 16-cell and monula stages after co-cultured with granulosa cells were 65.8, 57.9, 39.5, 34.2 and 34.2%, respectively. The value for 16-and morula stages were significantly higher (P<0.05) than those of the embryos cultured in the basic medium.
Injury to brain transforms resting astrocytes to their reactive form, the hallmark of which is an increase in glial fibrillary acidic protein (GFAP), the major intermediate filament protein of their cell type. The overall glial response after brain injury is referred to as reactive gliosis. Glial-neuronal interaction is important for neuronal migration, neurite outgrowth and axonal guidance during ontogenic development. Although much attention has been given to glial regulation of neuronal development and regeneration, evidences also suggest a neuronal influence on glial cell differentiation, maturation and function. The aim of the present study was to analyze the effects of glial-hippocampal neuronal co-culture on GFAP expression in the co-cultured astrocytes. The following antibodies were used for double immunostaining chemistry; mouse monoclonal antibodies for confirm neuronal cells, rabbit anti GFAP antibodies for confirm astrocytes. Primary cultured astrocytes showed the typical flat polygonal morphology in culture and expressed strong GFAP and vimentin. Co-cultured hippocampal neurons on astrocytes had phase bright cell body and well branched neurites. About half of co-cultured astrocytes expressed negative or weak GFAP and vimentin. After 2 hour glutamate (0.5 mM) exposure of glial-neuronal co-culture, neuronal cells lost their neurites and most of astrocytes expressed strong CFAE and vimentin. In Western blot analysis, total GFAP and vimentin contents in co-cultured astrocytes were lower than those of primary cultured astrocytes. After glutamate exposure of glial-neuronal co-culture, GFAP and vimentin contents in astrocytes were increased to the level of primary cultured astrocytes. These results suggest that neuronal cell decrease GFAP expression in co-cultured astrocytes and hippocampal neuronal-glial co-culture can be used as a reactive gliosis model in vitro for studying GFAP expression of astrocytes.
This study attempted to improve the growth of the freshwater microalgae, Parachlorella kessleri, through the sequential optimization of culture conditions. This attempt aimed to enhance the microalgae's ability to fixate atmospheric CO2. Culture temperature and light intensity appropriate for microalgal growth were scanned using a high-throughput photobioreactor system. The supplied air flow rate varied from 0.05 to 0.3 vvm, and its effect on the growth rate of P. kessleri was determined. Next, sodium phosphate buffer was added to the culture medium (BG11) to enhance CO2 fixation by increasing the availability of CO2(HCO3-) in the culture medium. The results indicated that optimal culture temperature and light intensity were 20℃-25℃ and 300 μE/m2/s, respectively. Growth rates of P. kessleri under various air flow rates highly depended on the increase of the culture's flow rate and pH which determines CO2 availability. Adding sodium phosphate buffer to BG11 to maintain a constant neutral pH (7.0) improved microalgal growth compared to control conditions (BG11 without sodium phosphate). These results indicate that the CO2 fixation rate in the air could be enhanced via the sequential optimization of microalgal culture conditions.
Five constituents were isolated from the stem of Acanthopanax senticosus. Their structures were elucidated as (-)-sesamin (1), iso-fraxidin (2), 5-hydroxymethylfurfural (3), syringin (4) and acanthoside D (5) by spectral analysis. Among these compounds, 5-hydroxymethylfurfural (3) was isolated for the first time from this plant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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