상어연골에서 발생하는 갈변과 냄새를 제거하기 위한 오존수 세척효과와 crude chondroitin sulfate의 추출특성을 조사하기 위하여 알칼리 및 열수추출 효과를 조사하였다. SC 분말을 용존 오존농도 0.3 ppm의 오존수로 세척한 결과 일반성분의 함량에는 영향을 미치지 않으면서 $L^*$값은 증가하고 $a^*$, $b^*$값은 감소되어 탈색효과가 뚜렷하였다. 또한 ammonia 유사취가 크게 감소되었으며 종합적 기호도가 크게 향상되었다. NaOH에 의한 CS의 최적 추출농도는 1 N이었으며 최적 추출시간은 $100^{\circ}C$에서 120분이었고 이때의 수율은 10.02%이었다. $100^{\circ}C$의 열수로 7회 반복추출 할 경우 1 N NaOH 추출수율과 대등하였다.
노화과정에 산소라디칼이 관여할 가능성을 난소를 절제한 횐 쥐를 동물모델로 하여 알아보았다. 난소를 절제한 쥐와 난소를 절제하지 않은 정상 쥐에서의 생리활성 및 항산화 효과를 알아보기 위하여 CS를 사용하였다. 난소를 절제한 횐 쥐에 각각 CS를 각 100 mg/kg과 200 mg/kg을 투여하고, 이것과 비교하기 위해 난소를 절제한 대조군과 난소를 절제하지 않은 정상군으로 하여 항산화 효과에 관한 실험방법으로 진행하였다. 노화 유도된 쥐의 각 조직에서 지질 과산화가 증가되었고 유리기 반응이 더 심하게 일어난 간 조직에서 노화 진행이 그만큼 촉진되었음을 알 수 있었다. 산소라디칼 반응이 항진된 원인을 규명코자 간 조직에서 항산화 효소의 활성을 조사한 결과, SOD와 GSH의 활성이 감소되었으며, 노화나 지질과산화가 심하게 진행되었던 간 조직에서 이들 항산화 효소의 활성감소가 심한 경향을 나타내었다. AST의 활성은 OVX 군이 Sham 군에 비해 2.1배 높게 나타났으며, ALT 활성은 크게 변화하지 않았다. 과산화지질한량은 OVX 군이 Sham 군에 비해 1.4배 높게 나타났으며, CS를 투여한 군에서는 31%-38%의 저해율을 보였다. 항산화 효소들은 Sham 군에 비해 OVX 군에서 낮게 나타났으며, 물질 투여 군에서는 정도의 차이는 있지만 대체로 증가하는 경향을 보였다. 이러한 결과에서 보듯이, 난소절제로 생성된 유리기는 물질 투여로 인한 항산화 효소의 증가를 가져오고 이는 결국 유리기로 손상된 막의 지질과산화 정도를 완화시켜 세포를 보호하는 효과를 가져왔다고 할 수 있다. 따라서 CS는 여러 가지 측면에서 난소절제로 인해 유도된 지질과산화 및 활성산소에 의한 공격으로부터 세포를 보호하고 회복시켜주는 효과가 있다고 사료되어진다.
GAGs의 추출 방법 중 효소의 사용으로 추출 효율의 상승과 원료수급의 문제점을 해결할 수 있었다. 그러나 효소 사용에 따른 생산단가의 상승과 단백질 함량의 증가에 따른 화장품 규격을 만족시킬 수 없음으로, 1/60 M sodium phosphate buffer로 105$^{\circ}C$로 열수 추출하는 것이 화장품 규격을 만족시키는 방법으로 나타났다. 이렇게 추출한 GAGs의 SO$_4$ 함량은 31.2%이고 회분의 함량이 22.2%로 GAGs 추출 향상을 위해 사용되어지는 sodium phosphate의 사용으로 회분 함량이 높아졌음을 알 수 있고 무기질 분석에서 Na의 함량이 3.0 mg%로 총 무기질의 47.6%를 차지하고 있었다. 시료를 HPLC로 분석하였을 때 chondroitin sulfate A, C와 동일한 분석시간을 나타내어 chondroitin sulfate의 함유 가능성을 나타내고, glucosamine과 galactose가 78.0% 존재하는 것을 당조성 분석을 통해 확인하였다. 일반 성분, HPLC분석, 당 조성분석과 아미노산 분석결과로 glucosamine과 galacturonic acid가 주가 되어 threonine으로 연결된 구조를 하는 GAGs라는 것을 알 수 있다. 화장품 원료 기준에 맞추기 위해서는 sulfate 함량이 35.0~45.0%, 단백질 함량은 14.0~22.0%로 유지해야하므로 제단백결과 5.0%, 10.0%, 20.0% TCA (w/v) 처리, 10.0%, 20.0%, 40.0% HCI (v/v) 처리, UF(ultra filtration)를 포함한 10.0% TCA (w/v), 20.0% SSA (w/v), 25.0% HCI (v/v) 처리 결과 5.0% TCA (w/v) 및 10.0% HCI (v/v)이 화장품 기준에 적합하며 경제적이며 효율적이라는 것을 알 수 있었다.
Kim, Dong-Hyun;Kim, Byung-Taek;Park, Sun-Yong;Kim, Na-Young;Han, Myung-Joo;Shin, Kuk-Hyun;Kim, Wan-Suk;Kim, Yeong-Sik
Archives of Pharmacal Research
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제21권5호
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pp.576-580
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1998
When glycosaminoglycan (GAG)-degrating enzymes were measured in normal human stool suspensions, all 5 tested different stools degraded titrable heparin and acharan sulfate. GAG-degrading bacteria were screened from the isolates of human stools. Among them, HJ-15 had the most potent activities of heparinases (GAGs-degrading enzymes). However, HJ-15 produced the enzyme even if in the media without heparin. Acharan sulfate lyase was induced by acharan sulfate and heparin. Heparinase production was also induced by these GAGs. These enzymes, acharan sulfate lyase and heparinase, were produced in exponential and stationary phase of HJ-15 growth, respectively. Optimal pHs of the acharan sulfate lyase and heparinase activities were 7.2 and 7.5 respectively. the biochemical properties of HJ-15 was similar to those of B. stercoris. However, difference from B. stercoris was utilization of raffinose. this HJ-15 also degraded chondroitin sulfates A and C.
Osteoarthritis (OA) is the leading medical condition for which patients use alternative treatments including the natural remedies. The aim of this review is to describe the dietary supplements and herbal remedies most commonly used in patients with osteoarthritis with an emphasis on the efficacy and safety of these natural remedies. Glucosamine and chondroitin sulfate, two of the molecular building blocks found in articular cartilage, are the most commonly used remedies in OA treatment. Most clinical researches suggest that glucosamine and chondroitin show efficacy in reducing or improving symptoms and their ability to arrest progression of the disease or regenerate damaged cartilage. Patented formulations of both remedies are recommended by several therapeutic guidelines for use as first line background OA treatment. Reliable evidence that the combination is more effective than either agent alone is however still lacking. Several other herbs or remedies are promoted for treating osteoarthritis such as S-adenosylmethionine, methylsulfonylmethane, Harpagophytum procumbens (devil's claw), Curcuma longa (turmeric), Zingiber officinale (ginger), and capsaicin but there is no reliable evidence on long-term efficacy or safety. The clinical usefulness of these remedies is therefore rather limited currently.
The antimutagenic and anticancer activities of glycoprotein(GP) and chondroitin sulfate(CS) from sea cucumbers were studied using Ames mutagenicity test and human cancer cells culture test. The GP's inhibitory effect toward aflatoxin B1(AFB1) and 3, 2'-dimethyl-4-amino-biphenyl(DMAB) increased with the higher added concentrations up to 5% level(w/w) regardless fractionation methods. The GP from sea cucumbers through DEAE-cellulose column chromatography showed an inhibitory effect ranged from 84 to 98%, and the maximum antimutagenicities resulted in red sea cucumber with 98% (AFB1) and 95% (DMAB). But 5% level of CS from various sea cucumbers had an inhibitory effect toward those both indirect mutagens ranged from 79% to 85%. However, in case of direct mutagens(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG and 4-nitroquinoline-1-oxide, 4-NQO), the GP's inhibitory effect was 55∼78% and the CS had a low inhibitory effect(58∼70%) at the added level of 5%. The GP from sea cucumbers exhibited the strong inhibitory effects with 89∼95% and 82∼92% on the growth of HT-29 human crcinoma cells and AZ-521 human gastric cancer cells (at 5% level).
우렁쉥이 껍질에서 분리한 황산다당을 부분정제하여 몇 가지 화학조성과 전기영동을 하였다. 추출된 황산다당의 화학적 조성은 sulfate, uronic acid, protein, chondroitin sulfate, amino sugar, hexosamine 등으로 이루어져 있었다. 전기영동결과 autoclave 처리에 의해 추출된 조다당류는 폭넓은 단일 band를 나타내었으나, neutrase 처리구는 세 개의 band로 구분되었다. Autocalve 처리구의 분자량은 약 40,000 정도로 추정되며, neutrase 처리구의 경우 고분자 band는 100,000 이상, 두 개의 저분자 band 중 하나는 약 22,000 정도, 또 하나의 band는 약 5,000 정도인 것으로 추정되었다. 이온교환수지 및 겔 여과하여 얻은 전당획분의 화학적 조성은 부분정제 전과 거의 유사하였다. Sephadex G-25로 gel 여과한 시료의 조성당은 arabinose, xylose 및 glucose는 흔적량 정도이었으나 galactose는 $71.4\%$로 대부분을 차지하였고, N-acetylgalactosamine 함량이 $14.5\%$ 정도이었고, D-glucuronic acid가 $6.3\%$ 정도 검출되었다. Sephadex G-100과 G-100-25로 정제한 당의 전기영 동 패턴은 거의 유사하게 단일 band의 양상이나 G-25 처리구가 다소 좁은 band를 나타내었다. 부분정제한 황산다당과 표준품인 chondroitin sulfates의 FT-IR spectrometer 분석 결과, 거의 유사한 결과를 나타내었다. 황산기나 에스테르 등 몇몇 중요한 원자단의 신축 진동수가 IR spectrum의 지문영역 ($500\sim700cm^{-1}$$)에서 나타났다. 황산기 중의 S=O 신축진동이 $1,240cm^{-1}$에서, C-O-S신축진동의 경우 수평향배는 $820cm^{-1}$에서 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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