• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제29권8호
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• pp.1510-1518
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• 2008

Results of intrinsic and extrinsic fluorescence studies on choline oxidase revealed that the enzyme at high alkaline pH values has more accessible hydrophobic patches relative to acidic pH. Fluorescence quenching studies with acrylamide confirm these changes. The quenching constants were also determined at different pH(s) by using the Stern-Volmer equation. CD studies showed that at higher pH a transition from $\alpha$-helix to $\beta$- structure was appeared while at lower pH the content of $\alpha$-helix structure was increased. Furthermore, analysis of the spectral data using chemometric method gave evidence for existence of intermediate components at very high pH(s). Results of thermal denaturation evaluated that the enzyme has the most instability at higher pH(s). Altogether low and high pH values caused significant alteration on secondary and tertiary structures of choline oxidase via inducing of an intermediate.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제41권5호
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• pp.428-438
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• 2008

본 연구는 한국인 상용 식품의 콜린 함량을 분석하기 위하여 2001년도 국민건강영양조사의 다소비 식품과 다빈도 식품 185종에 대하여 choline oxidase 효소법을 사용하여 식품의 총 콜린함량을 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 식품 100 g당 총 콜린 함량이 높은 식품은 메추리알 476.04mg, 마른 오징어가 452.42 mg, 소고기간 427.16 mg, 돼지고기간 424.92 mg, 참치통조림 414.44 mg, 멸치 381.30mg, 북어 378.88 mg, 달걀 309.88 mg, 닭고기간 259.38mg, 대두 238.62 mg로 건조어류, 동물의 간, 난류와 두류가 고콜린 식품으로 분류될 수 있겠고, 그 뒤를 이어 마늘빵이 193.18 mg, 쌀보리가 182.73 mg으로 곡류도 상당한 콜린 급원식품인 것으로 나타났다. 채소류와 과일류에서 낮은 콜린 함량을 보였으며, 또한 유자차, 녹차에서도 1 mg 이하의 낮은 콜린 함량을 보였다. 고춧가루, 맥주, 소주, 콩기름, 옥수수 기름 등에서는 콜린이 검출되지 않았다. 채소류, 과일류, 조미료류와 식물성 유지류가 저 콜린식품임을 알 수 있었다. 이상의 결과에서 볼 때 건조어류, 어류 가공품과 간, 난류, 두류, 곡류가 고콜린군 식품이며, 식물성 식품에서는 두류와 곡류 및 그 제품이, 동물성 식품에서는 어패류, 난류, 육류가 콜린의 주요 급원식품임을 알 수 있었다. 앞으로 Zeisel의 결과에 비해 크게 상이한 결과를 보인 쌀이나 밀가 루 등 일부 식품에 대한 보다 정확한 분석절차에 대한 연구가 뒤따라야 하리라고 본다.

• 약학회지
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• 제56권4호
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• pp.222-229
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• 2012

In order to determine acetylcholine and choline in the biological samples, the specific enzymes of acetylcholinesterase (AChE) and choline oxidase (ChO), which utilize acetylcholine and choline as substrates, were employed to convert substrates to $H_2O_2$. The produced $H_2O_2$ was coupled to 4-aminoantipyrine/phenol with peroxidase (PO) yielding quinoneimine dye which was measured at 508 nm. In the present enzymatic spectrophotometric analysis the product at the equilibrium state was measured considering accuracy, precision, time and cost of the analysis. The developed analytical method yielded good linearity (calibration curve; $A_{508}$=9534[acetylcholine]+0.009, correlation coefficient ($R^2$); 0.999) with detection limit of $1.11{\times}10^{-7}M$, reasonable precision (relative standard deviation; 0.10~1.62% at $2.5{\times}10^{-6}M{\sim}1.25{\times}10^{-4}M$) and accuracy (relative error; -0.24~0.97% at $4.13{\times}10^{-6}M{\sim}1.01{\times}10^{-4}M$) for acetylcholine chloride standard solution. The concentrations of acetylcholine and choline in human serum were found as $3.20{\times}10^{-5}M$ and $1.14{\times}10^{-4}M$, respectively. The brain tissues of Sprague-Dawley strain rat contained 9.82${\mu}g/g$ of acetylcholine and 6.53 ${\mu}g/g$ of choline in the cerebrum, while 7.37 ${\mu}g/g$ of acetylcholine and 5.34 ${\mu}g/g$ of choline in the cerebellum.

• 한국식물생명공학회:학술대회논문집
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• 한국식물생명공학회 2005년도 추계학술대회 및 한일 식물생명공학 심포지엄
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• pp.187-187
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• 2005

• Journal of Nutrition and Health
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• 제37권2호
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• pp.95-99
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• 2004

솔잎 EtOAc획분을 하루 25, 50, 100mg/kg BW로써 SD계 랫트에 45일동안 투여하여 뇌조직획분의 콜레스테롤 및 lipofuscin(LF)의 침착, acetylcholine(ACh) 및 ACh의 합성효소 choline acetyltransferase(ChAT), 신경전달에 관여하는 효소 acetylcholinesterase(AChE)의 활성, 카테콜아민계 신경전달물질의 파괴효소 monoamine oxidase-B(MAO-B)의 활성에 미치는 영향을 평가하였다. 뇌조직의 mitochondria 및 microsome획분중의 콜레스테롤이 EtOAc-50 및 EtOAc-100투여그룹에서만 유의적인 11.8-12.1% 및 9.6-13.0%의 침착 억제효과가 인정되었지만, LF는 모든 EtOAc획분의 투여그룹에서 유의적인 침착 억제효과를 인정할 수 없었다. 뇌조직중의 신경전달물질 ACh의 함량 및 ACh의 합성효소 ChAT의 활성은 EtOAc획분의 용량의존적으로 증가현상이 나타났지만, EtOAc-100투여그룹에서만 다같이 약 10%의 유의적인 증가효과가 인정되었다. 또한 뇌조직 중의 신경전달에 관계하는 AChE의 활성도 EtOAc획분의 용량의존적으로 증가현상이 나타났지만, EtOAc-50 및 EtOAc-100투여 그룹에서만 8.2-11.9%의 유의적인 증가효과가 인정되었다. Catecholamine계 신경전달물질의 파괴효소인 MAOB의 활성은 EtOAc획분의 용량의존적으로 억제하였지만, EtOAc-100투여그룹에서만 약 10%의 유의성이 인정되었다. 따라서 솔잎의 EtOAc획분의 투여는 콜레스테롤의 침착을 억제하며 기억$.$학습관련 신경전달물질 및 관련효소의 활성에 매우 유효하게 작용할 수 있을 것으로 기대된다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제42권1호
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• pp.19-24
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• 2015

식물은 여러 환경스트레스에 적응하기 위해 스트레스 내성 유전자의 발현 혹은 proline, trehalose, glycine betaine (GB) 등과 같이 삼투압을 조절하는 compatible solute를 생성하면서 진화해 왔다. GB는 고염, 저온 등 환경스트레스 조건에서 식물의 엽록체에서 축적되는 물질 중 하나이다. 토양 박테리아 Arthrobacter globiformis에서 분리한 choline oxidase (codA) 유전자는 choline을 GB로 전환하는 기능을 한다. 본 연구에서는 산화스트레스 유도성 SWPA2 프로모터의 발현조절 하에 codA 유전자를 엽록체에 과발현시킨 형질전환 고구마 식물체(SC식물체)를 제작하여 다양한 환경스트레스 조건에서의 특성을 분석하였다. SC 식물체는 methyl viologen (MV)에 의한 산화스트레스와 건조 처리 조건에서 내성 증가를 보였다. $5{\mu}M$ MV 처리시 형질전환 식물체는 GB의 함량이 증가하였고 낮은 수준의 이온 전도도를 보였다. 건조 스트레스 조건에서 형질전환 식물체는 codA 유전자의 발현이 증가하였으며, 대조구 보다 높은 상대수분함량을 유지하였다. 따라서 본 연구결과의 SC식물체는 고염, 건조토양 등 조건 불리지역에 재배하면 바이오매스를 증가시킬 수 있을 것으로 예상된다.

• 한국식품과학회지
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• 제21권5호
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• pp.726-734
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• 1989

우유 지방구막의 고밀도 표피에 결합된 지질의 조성을 분석하기 위하여 지방구막의 고밀도 표피부분을 여러 농도의 비이온성 세제 Triton X-100으로 처리하였고 세제에 용해되지 않는 물질, 즉 지방과 결합된 성분을 분석하였다. 유지방구막의 단백질, 인지질, 콜레스테롤과 ganglioside의 양은 Triton X-100의 농도가 증가함에 따라 감소하였다. 불용성 표피물질로서 butyrophilin(band 12), xanthine oxidase (band 3)와 band 16이 SDS-polyacrylamide gel을 이용한 전기영동에서 나타났다. Phosphatidyl ethanolamine, phosphatidyl choline, phosphatidyl serine, phosphatidyl inositol 및 spingomyeline 함량은 처리되지 않은 원래의 막의 것과 큰 차이가 있어 표피물질의 주요 인지질로 규명되었다. 전체 지질에서 지방산은 myristate, palmitate, stearate(주요 포화지방산), oleate, linoleate(주요 불포화지방산)이었다. 단백질에 결합된 콜레스테롤은 다른 성분에서보다 단백질에 더 견고하게 부착되어 있었다. Ganglioside의 함량은 Triton X-100의 농도가 증가함에 따라 비례 감소하였다.

• 생명과학회지
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• 제10권6호
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• pp.564-569
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• 2000

This study was designed to investigate the effect of silkworm (Bombyx mori L.) powder on lipofuscin, acetylcholine (ACh) and its related enzyme activities in brain of rats. Sprague-Dawley (SD) male rats ($160{\pm}10g$) were fed basic diet (control group), and experimental diets (SWP-200 and SWP-400 groups) added 200 and 400 mg/kg BW/day for 6 weeks. In case of liver membranes, lipofuscin (LF) levels resulted in a slight decreases (4.6% and 11.5%, respectively) in SWP-200 and SWP-400 groups compared with control group. But in case of barin as the most sensitive organ, LF levels were remarkably inhibited about 16.7% and 20.0% in SWP-200 and SWP-400 groups compared with control group. There were no significant differences in acetylcholine (ACh) syntheses as a very important neurotransmitter, and choline acetyltransferase (ChAT) activities as a synthesis enzyme of ACh, and acetylcholinesterase (AChE) activities as a hydrolysis enzyme, which were concerned in transmission of neuron through synapses in brain of SWP-200 and SWP-400 groups compared with control group. Monoamine oxidase-B (MAO-B) activities were significantly inhibited (about 10.2%) in brain of SWP-400 groups compared with control group. These results suggest that inhibiting effects of LF accumulation and MAO-B activity of silkworm powder (SWP) may play a pivotal role in attenuating a various age-related changes for improvement of brain function.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제37권3호
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• pp.176-181
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• 2004

솔잎 BuOH획분을 하루 25, 50, 100 mg/kg BW로써 SD계 랫트에 45일 동안 투여하여 뇌조직획분의 콜레스테롤 및 LF의 침착, ACh 및 ACh의 합성효소, ChAT, 신경전달에 관여하는 효소 AChE의 활성, 카테콜라민계 신경 전달물질의 파괴효소 MAO-B의 활성에 미치는 영향을 평가하였다. 뇌조직의 mitochnodria 및 microsome 획분 중의 콜레스테롤이 BuOH-50 및 BuOH-100 투여그룹에서 14∼17% 및 23∼34%의 통계적인 억제효과가 인정되었고, 뇌조직에 대한 LF도 BuOH-50 및 BuOH-100 투여그룹에서 10∼14%의 유의적인 침착 억제효과가 인정되었다. 뇌조직중의 신경전달물질 ACh의 함량 및 ACh의 합성효소 ChAT의 활성은 BuOH획분의 거의 용량의존적으로 증가현상이 나타났지만, BuOH-50 및 BuOH-100 투여그룹에서 각각 11∼17% 및 11∼23%의 통계적인 증가효과가 인정되었을 뿐만 아니라 AChE의 활성도 BuOH-50 및 BuOH-100 투여그룹에서 14∼17%의 통계적인 증가효과가 인정되었다. 뇌조직중의 MAO-B의 활성은 BuOH 획분의 거의 용량의존적으로 억제하였지만, 그 유의성은 인정할 수 없었다. 따라서 솔잎 BuOH 획분의 투여는 뇌조직의 유동성을 축진하고 콜레스테롤의 침착을 억제하며 ACh와 그 관련효소의 활성을 촉진하여 기억ㆍ학습의 증진에 매우 효과적으로 작용할 것으로 기대된다.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제42권2호
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• pp.120-125
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• 2000

This study was designed to investigate the effects of silk fibroin (Mw 500) powder (SFP) on lipofuscin, acetylcholine (ACh) and its related enzyme activities in brain of rats. Sprague-Dawley (SD) male rats (160$\pm$10 g) were fed basic diet (control group), and experimental diets (SFP-2.5 and SFp-5.0 groups) added 2.5 and 5.0 g/kg BW/day for 6 weeks. In case of liver membranes, lipofuscin (LF) levels resulted in a considerable decreases (11.5% and 13.8%, respectively) in SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. But in case of brain as the most sensitive organ, LF levels were remarkably inhibited about 18.3% and 21.7% in SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. Acetylcholine (ACh) levels were considerable decrease (3.0% and 9.2%, respectively) in brain membranes of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. choine acetyltranferase (ChAT) activities as a synthesis enzyme of ACh, and acetylcholinesterase (AChE) activities as a hydrolysis enzyme resulted in a slight increases (2.4% and 3.0%, 4.6% and 6.3%, respectively), but significance difference between ChAT and AChE activities by SFP administration could be not obtained. Monoamine oxidase-B (MAO-B) activities were significantly inhibited (9.5% and 12.6%, respectively) in brain of SEP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. These results suggest that inhibiting effects of LF accumulation and MAO-B activity of silk fibroin(SFP) may play a pivotal role in protecting learning memory impairments by attenuating a various age-related changes for improvement of brain function.