Chemoenzymatic method was used in this study to evaluate the quality of cultured red seabrim. Level of ATP related compounds, ATPase and Adenylate energy charge (AEC) well reflected changes in condition of fish. ATP level in the muscle of exercised cultured red seabream was decreased significantly during cultured period. In contrast, the level of ADP in the muscle was increased during the period. Level of ATP related compounds in the muscle of cultured red seabream without exercise didn't show significant difference compared to the exercised group. AEC value in muscle of cultured red seabream without exercise was 0.89$\pm$0.02, while AEC value of the exercised group was 0.88$\pm$0.04. ATP and AEC levels among different size of fish did not show any significant difference. AEC value in all sample was higher than 0.8, indicating that the condition of cultured fish was healthy. Activity of Mg2$^{+}$ (+Ca2$^{+}$), Mg2$^{+}$ (-Ca2$^{+}$) and Ca2$^{+}$-ATPase during culture period did not change significantly, regardless of exercise. Therefore, the AEC appears to have some validity as fish health indicator.
Dual-responsive amphiphilic block copolymers were synthesized by combining enzymatic ring-opening polymerization (eROP) of ${\varepsilon}$-caprolactone (CL) and ATRP of N,N-dimethylamino-2-ethyl methacrylate (DMAEMA). The obtained block copolymers were characterized by gel permeation chromatography (GPC), $^1H$ NMR and FTIR-IR. The critical micelle concentration (CMC) of copolymer was determined by fluorescence spectra, it can be found that with hydrophilic block (PDMAEMA) increasing, CMC value of the polymer sample increased accordingly, and the CMC value was 0.012 mg/mL, 0.025 mg/mL and 0.037 mg/mL for $PCL_{50}$-b-$PDMAEMA_{68}$, $PCL_{50}$-b-$PDMAEMA_{89}$, $PCL_{50}$-b-$PDMAEMA_{112}$, $PCL_{50}$-b-$PDMAEMA_{89}$ was chosen as drug carrier to study in vitro release profile of anti-cancer drug (taxol). The temperature and pH dependence of the values of hydrodynamic diameter (Dh) of micelles, and self-assembly of the resulting block copolymers in water were evaluated by dynamic light scattering (DLS). The result showed that with the temperature increasing and pH decreasing, the Dh decreased. Drug-loaded nanoparticles were fabricated using paclitaxel as model. Transmission electron microscopy (TEM) and atomic force microscopy (AFM) had been explored to study the morphology of the hollow micelles and the nanoparticles, revealing well-dispersed spheres with the average diameters both around 80 nm. In vitro release kinetics of paclitaxel from the nanoparticles was also investigated in different conditions (pH and temperature, etc.), revealing that the drug release was triggered by temperature changes upon the lower critical solution temperature (LCST) at pH 7.4, and at $37^{\circ}C$ by an increase of pH.
H-shaped amphiphilic pentablock copolymers $(PSt)_2-b-PCL-b-PEO-b-PCL-b-(PSt)_2$ was synthesized via chemoenzymatic method by combining enzyme-catalyzed ring-opening polymerization (eROP) of ${\varepsilon}$-caprolactone (${\varepsilon}$-CL) and atom transfer radical polymerization (ATRP) of styrene. By this process, we obtained copolymers with controlled molecular weight and low polydispersity. The structure and composition of the obtained copolymers were characterized by nuclear magnetic resonance (NMR), gel permeation chromatography (GPC) and infrared spectroscopy analysis (IR). The crystallization behavior of the copolymers was analyzed by differential scanning calorimetry (DSC) and X-ray diffraction (XRD). The crystallization behavior of the H-shaped block copolymers demonstrated a PCL dominate crystallization. The self-assembly behavior of the copolymers was investigated in aqueous media. The hydrodynamic diameters of the copolymer micelles in aqueous solution were measured by dynamic light scattering (DLS). The morphology of the copolymer micelles was observed by atomic force microscopy (AFM) and transmission electron microscopy (TEM). The hydrodynamic diameters of spherical micelles declined gradually with the increase of the hydrophobic chain lengths of the copolymers. The critical micelle concentration (CMC) values were determined from fluorescence emission, and it was found that the CMCs decreased with an increase of PSt hydrophobic block lengths.
This study evaluates red seabream quality using physicochemical and chemoenzymatic indices. Breaking strength was correlated with moisture content and lipid content of red seabram by a precedent experiment. Moisture content (X$_1$), lipid content (X$_2$) and breaking strength (Y) were optimized with multiple regression as, Y= -2.53539+0.05544X$_1$-0.00161X$_2$. To test the equation, red seabream (n=13) were randomly purchased and measured moisture content, lipid content and breaking strength. The calculated breaking strength using the equation was similar to breaking strength measured using Rheo meter. Adenylate energy charge (AEC), a general biochemical index of stress, values of all sample were higher than 0.8 expect two fish. Fish's condition was a good. The equation developed in this study predicts breaking strength with moisture and lipid content measured. Moreover the equation may be used in grading cultured red seabream with calculated breaking strength. Grade according to breaking strength, when it came to over 1.4 kg, was measured as high grade; when it came to below 1.2 kg, was measured as low grade. Grade according to AEC, when it came to over 0.8, was measured as high grade.
Park, Ji-Yeoun;Kim, Dong-Hyun;Kim, Su-Jin;Kim, Jin-Hee;Bae, Ki-Hwan;Lee, Choong-Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.7
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pp.1083-1089
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2007
Because of their selectivity and catalytic efficiency, BVMOs are highly valuable biocatalysts for the chemoenzymatic synthesis of a broad range of useful compounds. In this study, we investigated the microbial Baeyer-Villiger oxidation and sulfoxidation of thioanisole and bicyclo[3.2.0]hept-2-en-6-one using whole Escherichia coli cells that recombined with each of the Baeyer-Villiger monooxygenases originated from Pseudomonas aeruginosa PAOl and two from Streptomyces coelicolor A3(2). The three BVMOs were identified in the microbial genome database by a recently described protein sequence motif; e.g., BVMO motif(FXGXXXHXXXW). The reaction products were identified as (R)-/(S)-sulfoxide and 2-oxabicyclo/3-oxabicyclo[3.3.0]oct-6-en-2-one by GC-MS analysis. Consequently, this study demonstrated that the three enzymes can indeed catalyze the Baeyer-Villiger reaction as a biocatalyst, and effective annotation tools can be efficiently exploited as a source of novel BVMOs.
In this study, we describe a one-step chemoenzymatic reaction for the production of natural blue pigments, in which the geniposide from Gardenia extracts is transformed by glycosidases to genipin. Genipin is then allowed to react with amino acids, thereby generating a natural blue pigment. The ${\beta}-glycosidases$, most notably Isolase (a variant of ${\beta}-glucanase$), recombinant ${\beta}-glycosidases$, Cellulase T, and amylases, were shown to hydrolyze geniposide to produce the desired pigments, whereas the ${\alpha}-glycosidases$ did not. Among the 20 tested amino acids, glycine and tyrosine were associated with the highest dye production yields. The optimal molar ratio of geniposide to glycine, two reactants relevant to pigment production, was unity The natural blue pigments produced in this study were used to dye cotton, silk, and wool. The color yields of the pigments were determined to be significantly higher than those of other natural dyes. Furthermore, the color fastness properties of these dyes were fairly good, even in the absence of mordant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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