• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제17권1호
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• pp.87-91
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• 1990

Development of a solid-phase chemiluminescence immunoassay for the detection of progesterone in serum extract was described. The chemiluminescence immunoassay was establised utilizing anti-progesterone monoclonal antibody that coated on polystyrene tubes and progesterone-ABEI conjugate as tracer. The light yield generated from antibody bound conjugate was counted on clinilumat luminometer by oxidation with microperoxidase and peroxide. The chemiluminescence immunoassay was high specific and accurate and detects as little as 3.9ng/ml of progesterone. The intra-assay CV ranged from 6% to 11.5% and inter-assay CV ranged from 13.6% to 18.7%. This assay system was good correlated with conventional kit radioimmunoassay system (r=0.98).

• 한국가축번식학회지
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• 제15권2호
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• pp.149-155
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• 1991

본 실험은 H-Y 항원 유전자 크로닝을 위한 기초연구로서 H-Y 항원의 특성을 규명하기 위하여 친화성 크로마토그래피에 의하여 H-Y 항원을 분리·정제하였다. 정소 추출액을 항체가 결합된 column에 결합시킨 뒤 10% acetic acid로 용출시켰다. 용출된 분획을 모아 농축한 후 HPLC와 SDS-PAGE를 실시하여 H-Y 항원의 분자량은 약 6,7000달톤 임을 알 수 있었으며 isoelectric focusing에 의하여 등전점(pI)은 5.0인 것으로 측정되었다. H-Y 항원에 대한 단일클론항체와 표지항원으로는 H-Y 항원-ABEI(aminobutylethyl isoluminol)를 사용하여 H-Y 항원 정량을 위한 화학발광면역분석법을 개발하였다. 항원항체 반응후 빛의 측정은 NaOH 존재하에서 microperoxidase/H2O2를 이용한 산화반응으로 실시하여 10초간 측정한 빛의 양을 적분하였다. H-Y 항원의 농도와 빛의 양과는 역비례하였으며 감도는 11.8ng/tube 정도이었다.

• 한국가축번식학회지
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• 제11권1호
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• pp.16-21
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• 1987

We describe a simple, solid-phase chemiluminescence immunoassay for the meausrement of serum T4. An immunoglobulin G fraction of antibody to thyroxine was passively absorbed onto the walls of polystyrene tubes. The labeled antigen was thyroxine-aminobutylethylisoluminol. After the bindings reaction (37$^{\circ}C$ for 1 hour), the solution is removed by aspiration and the antibody-bound fraction was washed once with buffer. Sodium hydroxide (5mol/1,200${mu}ell$) was added and the mixture incubated for 30 minutes at 6$0^{\circ}C$. Luminescence was initiated by oxidation of the label with micropeeroxidase-hydrogen peroxide and the signal of light emission was intergrated for 10 sec. The light yield was inversely proportional to the concentration of T4 in the standard or sample. An evaluation of the method gave the following values sensitivity of calibration curve 7.5$\pm$2.8 nmol/l (mean$\pm$SD). The intra-assay precision (CV%) was 8.9, 7.3 and 5.4. The inter-assay precision (CV%) was 10.2, 8.1 and 7.1. When seum samples were assayed for T4, the results obtained by solid-phase CIA and the conventional RIA agreed well(n=3.5, r=0.954).

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제17권1호
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• pp.71-80
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• 1990

항정자항체를 검사할 수 있는 면역분석법개발을 위하여 immunoaffinity chromatography로 분리 정제한 정자표현항원을 microtiter plate에 고정화 시킨것과 효소와 화학발광체로 표지된 2차항체를 사용하여 ELISA법과 CIA법을 개발하고 이 방법의 이용 가능성을 검토하기 위하여 기존 방법인 Kibrick test법으로 임상소견이 다른 남성혈청을 분석 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 인간정자 표면항원을 분리하기 위한 immunoaffinity column을 제작키 위하여 인간정자를 토끼에 주사하여 정자에 대한 항혈청을 생산하였으며 이를 Protein A-Sepharose column으로 분리 정제하여 CNBr activated Sepharose-4B에 coupling시켜 immunoaffinity column을 제작하였다. 이 column에 균질화된 정자를 반응시키고 SDS를 넣은 Tris-HCI buffer로 용출시켰을때 60KD정도의 분자량을 갖는 분획을 얻었다. 2. 분리 정제된 human IgG를 microtier plate에 농도를 달리하여 고정화 시키고 ELISA용 Goat anti-human IgG-HRP conjugate와 CIA용 Rabbit anti-human IgG-ABEI-H conjugate와 반응시켜 그 활성도를 측정하였던 바 농도에 따라 반응의 정도가 감소하였다. 3. ELISA법으로 양성혈청의 희석곡선을 작성하였을때 경사가 완만한 것과 급한 것의 두 종류의 경향을 띈 곡선으로 대별되었으며 완만한 경사를 나타내는 것에서 1:160 희석치에서 O.D가가 0.1이하를 음성, 0.1이상 0.2이하를 약양성(weak positive) 그리고 0.2이상을 양성으로 판별하였다. 4. ELISA, CIA 그리고 Kibrick test로 동일시료를 분석 비교하였던바 ELISA와 CIA는 거의 동일한 상관관계를 보였으나 Kibrick test와는 50% 수준만 일치함을 보였다.

• 한국가축번식학회지
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• 제20권2호
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• pp.215-221
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• 1996

This study was carried out to develop an immunoassay for the diagnosis of the pregnancy and ovarian function of domestic animals. Using 2E92C10 monoclonal antibody(McAb) generated against estrone-3-glucuronide(E1-3-G) and appeared a high cross-reactivity with estrone-3-sulfate(E1-3-S), chemiluminesence immunoassay (CIA) to detect E1-3-S was developed. 2E92C10 McAb cross-reacted with E1-3-S (30%) was purified from ascites fluid using protein G sepharose gel column. The purity of purified antibody fraction was monitored by SDS-PAGE and was better compared to that of crude ascite fluid. The soild and liquid phase CIA for E1-3-S were established utilizing 2E92C10 antibody and E1-3-G-ABEI conjugate used as a tracer. As the results, the titer of 2E92C10 antibody was 5g/ml in soild phase and 1:2000 in liquid phase. The sensitivity on soild and solid phase CIA were about 200 pg/ml. These results indicate that CIA for measurement of E1-3-S was successfully developed by using ant-E1-3-G McAb cross-reacted with E1-3-S and could be usefully used to research this area.

• 분석과학
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• 제19권3호
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• pp.218-225
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• 2006

A molecularly imprinted polymer (MIP) was synthesized by radiation-induced polymerization (RIP), where the ferulic acid was used as a template molecule, 4-vinylpyridine as a monomer and ethylene glycoldimethacrylate (EGDMA) as a cross-linking monomer. The MIP was packed in a glass column using a slurry method for use in medium pressure liquid chromatography (MPLC). The MPLC column was tested for separation and purification of ferulic acid from the rice oil. When repeated three times, the MPLC separation/purification yielded the ferulic acid with the purity higher than ~99%. The chemiluminescence of the luminal (5-amino-2,3-dihydro-1,4-phtalazinedione) measured on a potato disc slide (5.0 mm thick) was enhanced in the presence of ferulic acid, while, without the ferulic acid, the chemiluminescence of luminol on the potato slice disc was not observed, which suggests the ferulic acid obtained from the rice oil can be useful for immunoassay.

• 대한임상검사과학회지
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• 제42권1호
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• pp.32-37
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• 2010

The author was performed to investigation of current status of prevalence for anti-hepatitis C virus (HCV) among the health-checkup adults in Jeonbuk province. A toal of 1,553 (male 1,046, female 507) serum samples were diagnosed by 3rd generation enzyme immunoassay (EIA) for anti-HCV. Total prevalence of anti-HCV was 0.9%, and prevalence of male and female were 0.8% and 1.2%, respectively. The prevalence of female was higher than male. According to ages group, prevalence of anti-HCV was highest in 60 age group, but it was not found in 20 age group. 14 samples with anti-HCV positive were diagnosed by EIA for hepatitis B virus surface antigen (HBs Ag), by chemiluminescence immunoassay (CLIA) for serum albumin, alanine transaminase (ALT) and asparagine transaminase (AST). Positive for HBs Ag was not found. The mean of serum albumin levels was 4.5 g/dL, and mean of ALT and AST were 34.3 IU and 31.9 IU, respectively. Through this study, I know that the prevalence of anti-HCV among adults in Jeonbuk, and suggest that the positive of anti-HCV persons who have lower serum albumin, normal to mild elevations in serum enzymes are chronic hepatitis.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제14권7호
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• pp.3419-3424
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• 2013

B형간염표면 항원 및 항체(HBsAg와 anti-HBs)에 대한 검사 방법으로 화학발광면역검사법(CIA)을 포함한 면역검사법을 주로 사용하고 있으나 최근 간편한 면역크로마토그래피법(ICA)의 사용이 늘고 있는 추세이다. 본 연구에서는 CIA법을 이용한 정량검사법과 비교하여 신속검사인 ICA법의 민감도를 평가하고자 하였다. 대학병원에 간염검사를 의뢰한 검체 중 CIA법에서 양성 및 음성으로 나온 120 검체를 선정하여 ICA법으로 분석하였다. ICA법과 CIA법의 일치율은 항원 97%와 항체 90%로 나타났다. 항원검사의 ICA법 민감도, 특이도, 양성예측도, 음성예측도는 각각 97%, 100%, 100% 및 96.8%로 나타났으며, 항체검사는 각각 90%, 93.3%, 93.1% 및 90.3%로 나타났다. ICA법을 임상에서 사용 시 결과판독에 주의가 필요하며, 낮은 역가의 경우 검출되지 않는 제한점이 있으므로 예민도가 높은 다른 검사법을 이용하여 이중검사를 시행해야 할 것으로 사료된다.

• 한국임상수의학회지
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• 제31권4호
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• pp.267-271
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• 2014

개 복제는 성숙된 중기의 난자를 수술적으로 회수하여 바로 사용해야 하기 때문에 다른 번식 보조술에 비하여 체내 난자 성숙의 정확한 예측이 특히 더 중요하다. 따라서 본 연구는 개에서 체내 성숙 난자 회수 시 방사면역분석기법(RIA)과 비교하여 화학발광효소면역분석기법(CLEIA)의 신뢰성을 평가하고, 참고값을 설정하기 위해 실시되었다. 배란일(Day 0) 결정을 위하여 발정전기와 발정기의 혈청 프로게스테론 농도가 RIA와 CLEIA 방법으로 분석되었다. Day 3에 수술적인 방법으로 체내 난자를 회수하였고, bisbenzimidazole로 핵을 염색한 뒤 성숙을 현미경으로 평가하였다. 평균 호르몬 농도는 CLEIA 값 ($7.64{\pm}0.06ng/ml$)이 RIA 값 ($6.46{\pm}0.04ng/ml$, P < 0.0001)보다 유의적으로 높았다. Day 0일 때 CLEIA 값 ($10.01{\pm}0.34ng/ml$)은 RIA 값 ($7.91{\pm}0.14ng/ml$)과 다르지 않았으나, Day -1과 Day 1일 때는 CLIEA ($6.41{\pm}0.15$ and $14.25{\pm}0.44ng/ml$)가 RIA($4.95{\pm}0.10$ and $11.29{\pm}0.34ng/ml$)보다 유의적으로 더 높은 값을 나타내었다. 그러나 두 가지 방법 모두 Day -1에서 Day 2까지 프로게스테론 농도가 유의적으로 점차 증가하였다. 그러므로 CLEIA 방법으로 난자 성숙을 결정하기 위해서는 더 넓은 범위와 높은 참고 값이 고려되어야만 한다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제9권1_2호
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• pp.43-53
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• 1982

여성의 난소기능은 뇨중 Oestrone-3-glucuronide를 간편한 solid-phase 의 화학발광성 면역학적 측정법 (Chemiluminescence Imrnunoassay(CIA) 에 의하여 그 기능이 탐지될 수 있다. Oestrone-3-g1ucuronyl-6-bovine serum albumine에 대한 antiserum의 IgG fraction은 polystyrene 실험관벽에 흡착시켰으며, 항원으로서는 est r one-3- gl ucuronyI-6-aminoethyl-ethyl-isoluminol 을 항원 (antigen) 에 labeI 시킨 것이다. 시험 대상물인 뇨는 매일아침뇨(early morning urine) 을 희석 (1:1000 V/V)한 후 100mcl 를 취하여 이를 각기 이중분석액으로 택하였다. 시험관 내에서 결합반응 (1 hour at $4^{\circ}C)이 일어난 후에는 시험관내의 액체를 전부 흡입 폐기시켰으며, 항체반응이 일어난 후 ( antibody-bound fraction )에는 완충액 (400mcl)으로 한번 세척시켰다. 그후 염화수산화물(2N , 200mcl)을 가지고 $22^{\circ}C$에 60 분간 방치 혼합케 한 후 효소(microperoxidase) 와 과산화수소를 가하면서 산화작용에서 발생되는 발광양을 10초동안 측정하여 그 결과를 분석하였다. 위에 기술한 분석방법을 평가하면 다음과 같은 결론을 얻었다. Calibration curve sensitivity$3.12{\pm}0.75$ PG/tube ($mean{\pm}SD$)였고, lntra-assay precision(CV%) 9.52 (20 replicates;$38.4{\pm}3.66$nmol/1) 와 8.81 (15 replicates; $102.4{\pm}8.82$nmol/1)였다. Inter-assay precision(CV%) 은 11.9 (mean of 4 pools-7.03, 23.16, 52.11 과 117.53 nmol/1)로 2개월 동안에 걸쳐 시행되었고, 평균 비이어스(mean bias)는 -0.78 로 28에서 448 nmol 범위로서 매일아침 "뇨"의 차이분(different aliquots)은 좋은 결과를 얻었다. 건강한 여성으로부터 채취된 뇨중 Oestrone-3-glucuronide 의 농도(nmol/1)를 보면 월경주기의 여포기와 배난기 및 황체기에 있어서 각기 $40.2{\pm}9.9$ , $102.3{\pm}39.4$와 $84.3{\pm}13.3$nmol/1였다. 이와같은 결과는 동일한 검사뇨를 방사면역학적 방법(RIA)으로 측정 (6 menstrual cycle)한 결과와 유사한 측정치를 얻으므로서 간편하고 진보된 좋은 방법중의 하나라고 사료되는바이다.