Korean ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) preserved in syrup, known as ginseng Jung Kwa (GJK), is a popular traditional snack in Korea. We investigated the effects of heat processing time on total phenolic content and antioxidant capacity of GJK. Water extract was prepared from GJK with different heat processing times, 3 hours (GJK-3), 6 hours (GJK-6), or 12 hours (GJK-12), with sonication for 2 hours. The GJK extract contained total phenolic content in the following order: GJK-12 (2.28%)>GJK-6 (1.57%)>GJK-3 (1.29%). Both the peroxy and hydroxyl radical-scavenging activity and cellular antioxidant capacity of GJK extract was significantly enhanced with increasing heat processing time. The hydroxyl radical-scavenging activity of GJK-12 extract was greater than that of the GJK-3 and GJK-6 extracts, consistent with metal chelating capacity and reducing capacity. In a cellular model, the GJK extract effectively reduced 2,2'-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride, $Cu^{2+}$-, and $H_2O_2$-induced oxidative stress, with GJK-12 and GJK-6 extracts demonstrating greater cellular antioxidant capacity than the GJK-3 extract. These results suggest that heat processing time can contribute to the antioxidant capacity of GJK and that GJK extract may have the potential to be used as an effective dietary antioxidant to prevent oxidative stress-related diseases.
최근 금속자원 재활용과 환경보호에 대한 기술적 필요성에 의해 구리(Cu)를 주성분으로 하는 동합금으로부터 니켈, 주석 등의 유가금속 분리/회수에 대한 관심이 높아지고 있다. 본 연구에서는 동합금에 포함된 유가금속들을 분리/회수하는 기초연구중 하나로서, 킬레이트 수지를 이용하여 동합금 제련시 발생하는 부산물에 포함되어 있는 대표적인 유가금속인 니켈(Ni)을 분리/추출할 수 있는 농축 공정의 가능성에 대해 검토하였다. 킬레이트 수지는 원자량이 높은 $Cu^{2+}$ 이온을 $Ni^{2+}$ 이온보다 선택적으로 흡수하였으며, 이러한 과정을 수차례 반복함으로써 실제 동합금 부산물 샘플의 $Ni^{2+}$ 및 $Cu^{2+}$ 이온을 농축할 수 있었으며, XRF 분석을 통하여 각각 70 % 및 99 %의 농도로 분리할 수 있음을 확인하였다.
(+)(18crown6)-tetracarboxylic acid ($18C6H_4$)를 퀴놀린계 항생제인 gemifloxacin을 모세관 전기영동법으로 키랄 분리하였다. Body fluid에서 퀴놀린계 항생제인 gemifloxacin의 직접적인 분석은 빠른 분석 시간, 다성분 분석등의 여러 가지 장점을 가진다. 그러나 Body fluid내의 높은 농도의 나트륨 이온은 $18C6H_4$와 강한 전하 상호작용으로 인하여 gemifoxacin과 $18C6H_4$의 상호작용을 방해한다. 키랄 선택제와 나트륨 이온 사이의 상호 작용을 줄이기 위해 완충 용액에 킬레이트 리간드 EDTA를 첨가하였다. 시료 용액에 150mM의 나트륨 이온이 존재 할 때에도 분리 효율의 향상과 이동 시간의 감소를 관찰 할 수 이었다.
Although antioxidant activities of Korean traditional fermented foods were reported by many researchers, study on antioxidant activity of microorganism originated from Korean traditional fermented foods was little. Therefore, we improved condition for antioxidant production by a bacterium isolated from home-made Chungkookjang. We selected a bacterial strain, which showed the highest antioxidative activity, from Chungkookjang and then named GJ. The selected GJ strain was identified as Bacillus methylotrophicus by alignment data of 16S rRNA gene nucleotide sequences. Improved medium compositions for DPPH radical scavenging activity were 0.25% sucrose, 1% peptone, 0.01% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ and initial pH 6.5, respectively. Optimal culture conditions were $30^{\circ}C$, 200 rpm and 4% inoculum volume, respectively. In improved conditions, DPPH radical scavenging activity of GJ reached to 91% in a short time. The strain GJ also possessed ACE inhibition and other antioxidative activities; ACE inhibition activity (49.4%), ABTS radical scavenging activity (99.8%), metal chelating activity (67.9%), SOD-like activity (36.5%) and reducing power ($A_{700}$ = 5.982) were observed, respectively. Therefore, our results suggest that B. methylotrophicus GJ strain may be potential candidate for functional foods, cosmetic products for anti-aging and medicine for diseases caused by oxidative stress.
Hydrothermal deposition of hydroxyapatite coatings on two types of $ZrO_2$ substrates (3 mol% $Y_2O_3$-doped and 13 mol% $CeO_2$-doped tetragonal $ZrO_2s$) was studied using aqueous solutions of $Ca(NO_3)_2\;4H_2O$ and $(NH_4)_2HPO_4$ containing EDTA (ethylene diamine tetra acetic acid) disodium salt as a chelating agent for $Ca^{2+}$ ions. For the precipitation of the coatings, the $EDTA-Ca^{2+}$ chelates were decomposed by oxidation with $H_2O_2$ at $90^{\circ}C$. The deposition behavior, morphology, and orientation of the coatings were investigated while varying the solution pH using scanning electron microscopy and X-ray diffractometry. For the two sub-strates, sparse deposition of the coating was obtained at pH 5.5, whereas a uniform deposition was obtained at pH 7.1, 9.8, and 11.4 with a denser microstructure for the higher pH. The coating consisted of thin needle-like or plate-like crystals ($1-2{\mu}m$ length or diameter) at pH 7.1, but fine rod-like crystals ($1-2{\mu}m$ length, $0.1{\mu}m$ diameter) at pH 9.8 and 11.4. The coatings were $1-3{\mu}m$ thick and showed a preferred orientation of the hydroxyapatite crystals with their c axis (i.e., the elongated direction) perpendicular to the substrate surface especially for pH 9.8 and 11.4.
For the production and purification of a single chain human insulin precursor, four types of fusion peptides $\beta$-galactosidase (LacZ), maltose binding protein (MBP), glutathione-S-transferase (GST), and (His)(sub)6-tagged sequence (HTS) were investigated. Recombinant E. coli harboring hybrid genes was cultivated at 37$\^{C}$ for 1h, and gene induction occurred when 0.2mM of isopropyl-D-thiogalactoside (IPTG) was added to the culture broth, except for E. coli BL21 (DE3) pLysS harboring a pET-BA cultivation with 1.0mM IPTG, followed by a longer than 4h batch fermentation respectively. DEAE-Sphacel and Sephadex G-200 gel filtration chromatography, amylose affinity chromatography, glutathione-sepharose 4B affinity chromatography, and a nickel chelating affinity chromatography system as a kind of immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC) were all employed for the purification of a single chain human insulin precursor. The recovery yields of the HTS-fused, GST-fused, MBP-fused, and LacZ-fused single chain human insulin precursors resulted in 47%, 20%, 20%, and 18% as the total protein amounts respectively. These results show that a higher recovery yield of the finally purified recombinant peptides was achieved when affinity column chromatography was employed and when the fused peptide had a smaller molecular weight. In addition the pET expression system gave the highest productivity of a fused insulin precursor due to a two-step regulation of the gene expression, and the HTS-fused system provided the highest recovery of a fused insulin precursor based on a simple and specific separation using the IMAC technique.
비수용매인 아세토니트릴 중에서 Cu(Ⅱ)와 1,5,9,13-tetrathiacyclohexadecane[16-ane-$S_4$]의 착물에 대한 전기화학적 거동으로서 직류폴라로그램과 미분펄스폴라로그램으로부터 환원전류의 유형과 가역성을 조사하고, 이들 화합물의 분석적 응용으로서 수용액에 있는 Cu(Ⅱ) 이온을 염석추출법으로 정량하였다. 또한 아세토니트릴 용매 중에서 착물의 안정도 상수를 구하고, 분석적 응용으로 수용액 중의 Cu(Ⅱ)를 염석추출법으로 정량하기 위하여 추출조건, 곧 킬레이트와 염석제의 효과, pH 범위를 구하고 또한 Cu(Ⅱ) 이온을 정량하는데 있어서의 검량성과 공존이온 효과를 조사하였다. 실험결과로부터 환원 과정은 비가역적이었으며 환원전류는 확산지배적임을 알았다. 또한 아세토닐트릴 용매 중에서 착물의 log $K_f$의 값은 3.51이었으며 Cu(Ⅱ) 이온을 정량하는데 있어 공존하는 이온의 영향을 별로 받지 않아 선택성이 좋았으며 본 실험방법에 의한 정량한계는 60ppb 이었다.
A croquette added with heat-treated kimchi at 20% showing higher sensory preferences was analyzed for its physicochemical properties and antioxidant activity using a croquette without kimchi as a control. Compared with the control, kimchi-added croquette had 3.3-fold higher organic acids content (p<0.001), resulting in a significant reduction of pH (p<0.001) and higher metal chelating activity (p<0.001). Upon addition of kimchi, total reducing capacity increased from 109.4 to $139.4{\mu}g/g$ gallic acid equivalents (p<0.01), and DPPH radical scavenging activity also increased 2-fold, which corresponded to 54% of the electron-donating ability of 0.35 mM gallic acid. In addition, contents of free amino acids and ${\gamma}-aminobutyric$ acid (GABA) appreciably increased by 1.6-fold (p<0.01) and 10-fold (p<0.001), respectively. This could be attributed to the ingredients of kimchi and/or enzymatic transformation of precursors by microorganisms during kimchi fermentation. Kimchi-added croquette was determined to be a good source of dietary fiber relative to its calorie content. Texture profile analysis showed no significant differences in hardness, springiness, cohesiveness, gumminess, and chewiness between the two croquettes with or without kimchi. Taken together, this study shows that utilization of heat-treated kimchi as a filling for croquette could be a good strategy to improve both the nutritional quality and antioxidant activity of croquette.
Objective: This study was to determine the effect of different concentration of calcium III medium on the preimplantational development of zygotes and early 2 cell embryos. Methods: Female mice of ICR strain ($5{\sim}8$ weeks old) were superovulated and mated with fertile males. Zygotes or early 2-cell embryos were collected by flushing the oviducts $31{\sim}32$ hours after hCG injection. The embryos were cultured in various concentrations of $Ca^{2+}$ in medium or with EDTA, EGTA and $Ni^{2+}$. Result and Conclusion: Treatment of high concentraion of $Ca^{2+}$ (3.42 mM $(2X){\sim}17.l$ mM (10X)) in medium didn't develop well compared to the control. Low concentrations of $Ca^{2+}$ (0.214mM $(1/8X){\sim}0.855$ mM (1/2X) were deterimental to development beyond 2-cell stage. EDTA, $Ca^{2+}$ chelating agent was treated with ranged concentrations of EDTA (0.014 $mM{\sim}0.107$ mM) to medium contaning 1.71 mM $Ca^{2+}$ showed beneficial effect to development to blastocyst compared to the control. EGTA, extracellular $Ca^{2+}$ chelator, was treated with ranged concentrations of EGTA ($0.014{\sim}0.107$ mM) to the medium contaning 1.71 mM $Ca^{2+}$. There is no significant difference with the control. $Ni^{2+}$ (50 ${\mu}M$), T-type $Ca^{2+}$-channel blocker was treated to medium contaning low concentration of $Ca^{2+}$. It overcame 2-cell block significantly. Rate of degenerated embryos decreased and developmental rate to morula and blastocyst increased more than low $Ca^{2+}$ concentration alone. Further studies are needed for the overcoming effect of 2-cell block by $Ni^{2+}$.
Follicular oocytes were released from the graafian follicles of ovaries from 3-4 weeks old mice. The spontaenous maturation of these follicular oocyes was inhibited by the treatment of dbcAMP and progesterone and these oocytes were cultured for 2-8hr in the Modified Hank's balanced salt solution(MHBS). Ethylenediaminetetraaceticacid(EDTA) and calmoudulin antagonist, trifluoperazine (TFP) were treated to the culture medium in order to investigate whether these chemical agents inhibit calcium uptake into the oocyte and oocyte maturation. $^{45}Ca^{2+}$, 10-${\mu}$Ci/ml was added to the culture medium during the culture period. $^{45}Ca^{2+}$uptake into the oocytes was examined whether and when various kind of oocyte maturation inhibiting agents inhibit or stimulate the influx of calcium into oocytes. Dibutyryl cAMP and progesterone decrease $^{45}Ca^{2+}$uptake into the oocytes and synergistic inhibiting effect of dbcAMP and progesterone was prominent at much lower dosages. Calcium uptake into oocytes seems to be higher during first 2 hour culture period rather than next 4hr culture. After 8hr culture, calcium uptake level of the oocytes which GVBD already took place gradually approached to the level of those which were maintained at GV by the treatment of dbcAMP and progesterone. However, $^{45}Ca^{2+}$uptake into the GV maintained oocytes did not change at all even after 8hr culture period. In addition, calcium chelating agent, EDTA inhibited calcium uptake into oocytes as well as nuclear maturation of oocytes. Lower dosage used in the present study did not inhibit calcium uptake as well as oocyte maturation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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