백악질 세포의 분리 및 배양방법을 확립하고, 이를 이용하여 백악질 세포의 형질특성을 알아보고자 하였다. 교정목적으로 발거된 소구치를 이용하여, 치은섬유아세포, 치주인대 세포 및 백악질 유래세포를 분리, 배양하였다. 백악질 유래 세포 배양시에는 백악질을 절제한 후 Collagenase P를 이용하여 백악질 유래 세포 외의 다른 세포의 개제를 배제하였고, 기질을 분해하여 세포의 분리 및 배양이 용이하도록 하였다. 분리 및 배양시기의 세포의 형태를 광화현미정을 이용하여 관찰하였다. 조골세포의 특성을 가지는 SaOs-2 세포를 대조군으로 이용하여 분리 및 배양된 세포군들을 동일한 조건으로 배양하였다. 3일 및 7일째에 세포증식도를 측정하였고 7일째에 ALPase 효소 활성도를 측정하였다. 각 세포의 형질 특성을 알아보기 위해 RT-PCR을 실시하여 조골세포 분화 표식자와 연관된 osteopontin(OPN), Alkaline phosphatase(ALP), type I collagen(COL-I), Bone sialoprotein(BSP), BMP-2 및 osteocalcin(OC)의 발현을 비교 관찰하였다. 백악질 유래 세포의 분리 및 배양을 시도한 5명의 치아 중에서 3명의 치아에서 세포군을 배양해 낼 수 있었다. 배양한 백악질 유래 세포는 섬유아세포와 유사한 형태와 증식을 보였다. ALPase 효소 활성도 검사 결과 백악질 유래 세포는 SaOs-2 세포보다 낮은 활성도를 나타내었으며, 배양된 세포의 RT-PCR 결과 백악질 유래 세포군에서는 ALPase의 발현이 나타나지 않았고, 다른 조골세포 표식자의 발현도 낮게 나타났다. 이는 백악질 유래 세포가 조골세포 및 다른 대조군의 세포와는 다른 형질 특성을 가지고 있다는 것을 시사한다. 이상의 관찰결과로 사람의 백악질 유래 세포롤 백악질의 절제 및 효소처리 방법으로 효과적인 분리 및 배양이 가능하며, 이는 향후 백악질 세포의 형질 특성 및 백악질 형성의 분자적 기전을 파악하는 중요한 연구자료로 활용 될 수 있을 것으로 사료된다.
The present study was to evaluate the healing patterns of guided tissue regeneration( GTR) using resorbable $Vicryl^{(R)}$(polyglactin 910) mesh and nonresorbable expanded polytetrafluoroethylene(ePTFE) membrane with or without bone grafting using autogeneous bone and demineralized freeze-dried bone allograft(DFDBA) in the grade II furcation defects. Mucoperiosteal flaps were reflected buccally in the mandibular 2nd, 3rd and 4th premolar areas and furcation defects were created surgically by removing $5{\times}6mm$ alveolar bone in 4 dogs. Root surfaces were thoroughly debrided of periodontal ligament and cementum, and notches were placed on root surface at the most apical bone level. In the right and left mandibular quadrant, each tooth was received $Vicryl^{(R)}$ mesh(ACE Surgical Supply Co., USA) only, $Vicryl^{(R)}$ mesh with DFDBA, $Vicryl^{(R)}$ mesh with autogeneous bone grafts, ePTFE membrane($Core-tex^{(R)}$ membrane, W.L. Gore & Associates Inc., USA) only, ePTFE membrane with DFDBA or ePTFE membrane with autogeneous bone grafts. For the fluorescent microscopic examination, fluorescent agents were injected at 2, 4 and 8 weeks after surgery. Four weeks after surgery, 2 dogs were sacrificed and ePTFE membranes were removed from remaining 2 dogs, which were sacrificed at 12 weeks after surgery. Undecalcified tissues were embedded in methylmethacrylate and $10{\mu}m$ thick sections were cut in a buccolingual direction. These sections were stained with hematoxylin-eosin stain and Masson's trichrome stain, and evaluated by descriptive histology and linear measurements. The results were as follows : 1) $Vicryl^{(R)}$ mesh group showed less connective tissue attachment than ePTFE membrane group. 2) The combination of GTR using $Vicryl^{(R)}$ mesh and osseous grafts resulted in new attachment and new bone formation more than GTR using $Vicryl^{(R)}$ mesh only. 3) GTR using ePTFE membrane, with or without osseous grafts, enhanced periodontal regeneration. 4) Root resorption and dentoalveolar ankylosis were observed in the areas treated with the combination of GTR and DFDBA. It was suggested that the effect of adjunctive bone grafting in GTR procedure depends on the materials and the physical properties of barrier membranes. $Vicryl^{(R)}$ mesh performed a barrier function and the use of adjunctive bone grafting may enhance the periodontal regeneration.
상아질, 백악질, 치수를 포함하는 파절로 정의되는 치근파절은 영구치에서 발생하는 외상 중 0.5-7%를 차지하며, 대부분 11-20세군의 상악 전치부에 호발한다. 영구치 치근파절의 처치는 기본적으로 변위된 치관부 파절편을 정복시키고 고정하는 것이다. 60-80%는 치수생활력이 유지되나 치수괴사나 염증성 치근흡수의 징후가 나타난다면 근관치료를 시행하게 되며 대부분에서 치근부 파절편의 치수생활력은 유지되기 때문에 근관치료는 치관부 파절편에 한하여 수행한다. 그러나 치관부 파절편에서 적절한 apical stop을 얻는 것은 어렵다. 의도적 재식술이란 통제된 환경에서 의도적으로 치아를 발거한 후 구강 외에서 치근단 치료를 시행하고 재식립하는 방법으로 완벽한 근관치료와 수복을 목표로 한다. 통상적인 근관치료가 실패한 경우, 기존의 수복물이 존재하거나 석회화된 근관으로 인해 재근관치료가 어려운 경우, 공간적으로 접근이 불가능하여 치근단 수술을 시행하지 못하는 증례에서 의도적 재식술이 계획될 수 있다. 본 증례에서는 이전의 외상으로 인해 석회화된 근관을 보이는 상악 중절치에서 발생한 수평 치근파절을 치료하기 위해 의도적 재식술을 이용하였고 임상적, 기능적으로 만족할만한 결과를 얻었기에 이를 보고하는 바이다.
전신적 또는 국소적 요소에 의하여 유치 치근이 병적으로 흡수될 수 있으며 치아 우식증이나 외상 등으로 염증성 치근 흡수가 발생할 수 있다. 유치의 병적 치근 흡수면은 생리적인 치근 흡수와 비교할 때 흡수면의 세포와 흡수와의 형태 등의 흡수 양상이 다르다. 이 연구는 생리적 치근 흡수, 외상, 염증성 치근 흡수면의 형태 및 인접한 세포를 주사전자현미경과 광학현미경으로 관찰하였다. 생리적 치근 흡수면의 흡수소와는 원형과 타원형이고 비교적 작고 균일하였다. 외상으로 인한 치근 흡수면과 염증성 치근 흡수면의 흡수소와는 생리적 치근 흡수면의 흡수소와에 비해 다각형이며 크고 불규칙하였다. 생리적 치근 흡수면과 외상으로 인한 치근 흡수면, 염증성 치근 흡수면에서 다핵거대세포와 단핵세포가 관찰되었으며 염증성 치근 흡수면에서는 간엽세포 및 염증세포가 많이 분포되어 있었다. 생리적 치근 흡수면과 외상으로 인한 치근 흡수면에서는 흡수 표면에 백악질양 조직이 침착되었으나, 염증성 치근 흡수면에서는 관찰되지 않았다.
This study was performed to evaluate the effect of mixed culture of rat's calvaria cells and periodontal ligament cells on calcification. These cells have been known to do important role on the periodontal tissue regeneration, especially alveolar bone and cementum. Experimental groups were made which based on the different rate of rat's calvaria cells and periodontal ligament cells, and then these cells were cultured with Dulbecco's Modified Eagle's Medium contained with 10% fetal bovine serum, $50{\mu}g/ml$ ascorbic acid, and 10mM/ ml $Na-{\beta}-glycerophosphate$. Each group was characterized by examining the cell proliferation rate, amount of total protein synthesis, alkaline phosphatase activity, and the number of calcified nodules in vitro. In cell proliferation rate , the cells of control groups were cultured Dulbecco's Modified Eagle's Medium contained with 10 % fetal bovine serum. The results were as follows : 1. The cell proliferation rate in control groups decreased stastically significantly along with the decrease of the rate of bone cells at 7 day and 20 day(P < 0.01). 2. The cell proliferation rate in experimental groups decreased stastically significantly along with decrease of the rate of bone cells at 3 day and 14 day(P < 0.01). 3. The amount of total protein synthesis was significantly decreased along with decrease of the rate of bone cells at 3 day and 6 day(p < 0.01). 4. Alkaline phosphatase activity showed reverse time dependent pattern and was significantly decreased along with decrease of the rate of bone cells during the experimental periods (P < 0.01). 5. Calcified nodules were observed in group 1 (Rat calvaria cells alone) for the first time, and the number of calcified nodule decreased stastically significantly along with the decrease of the rate of bone cells at 12 day(P < 0.01). From the above results, When bone cells and periodontal ligament cells were mixed cultured, the cell proliferation rate was mostly dependent on the actual rate of bone cells and same pattern was showed in amount of total protein synthesis, alkalinephosphatase activity, and the number of calcified nodules. And the calcified nodule forming capacity of bone cells was inhibited by periodontal ligament cells
Purpose: Furcation involvement in the molars is difficult to treat, and has been recognized as a risk factor for tooth loss. Although periodontal regenerative therapies, including guided tissue regeneration and various types of bone grafts, have been applied to furcation defects, the effects of these treatments are limited, especially in large class III furcation defects. The purpose of this pilot study was to investigate the effect of reciprocal autologous root transplantation on periodontal wound healing and regeneration in class III furcation defects in dogs. Methods: Furcation defects (7 mm wide and 6 mm high) were surgically created after root separation of the unilateral third and fourth premolars in 4 dogs. Eight furcation defects were randomized to receive either reciprocal autologous root transplantation (test) or no further treatment (control). In the test group, the mesial and distal roots were transplanted into the distal and mesial extraction sockets, respectively. The animals were sacrificed 10 weeks after surgery for histologic evaluation. Results: The healing pattern in the control group was characterized by extensive collapse of the flap and limited periodontal regeneration. New bone formation in the test group ($3.56{\pm}0.57mm$) was significantly greater than in the control group ($0.62{\pm}0.21mm$). Dense collagen fibers inserting into the residual cementum on the transplanted root surfaces were observed in the test group. Slight ankylosis was observed in 2 of the 4 specimens in the test group on the mesiodistal sides where the root-planed surfaces faced the existing bone. Root resorption (RR) was detected in both the control and test groups. Conclusions: Within the limits of this study, it can be concluded that reciprocal autologous root transplantation was effective for bone regeneration in class III furcation defects in dogs. However, further studies are required to standardize the approach in order to prevent unwanted RR prior to clinical application.
소아청소년기에는 신체적, 정신적인 불안정성으로 인해 두개악안면부의 많은 외상이 발생하며, 종종 치아 및 주위 조직의 손상과 치수의 실활로 이어진다. 치근단이 완성된 후라면 통상의 근관치료를 시행하지만, 미성숙 치근단인 경우 치근단형성술을 통한 치근단 폐쇄가 요구된다. 기존의 수산화칼슘은 생체친화성이 우수하고, 정균적인 성질로 인해 치근단형성술에 널리 사용되어 왔으나, 많은 내원횟수에 따른 환자의 협조도가 필요하고, 강도가 낮으며, 치근단이 넓은 경우 성공률이 낮아지는 단점이 있다. 이에 반하여 IRM이나 SuperEBA등을 이용한 즉일 치근단형성술의 경우, 환자의 내원은 줄일수 있으나 치근단 적용시 생체적합성에 대한 의문이 제기되어 왔다. Mineral Trioxde Aggregate(MTA)는 우수한 생체적합성과 변연폐쇄성을 그 특징으로 하며, 적절한 강도와 더불어 현재까지 근관치료 분야에서 유일하게 손상된 치근에서 백악질의 지속적 재성장을 촉진하는 물질로 알려져 있다. 본 증례에서는 넓은 치근단을 가진 수개의 실활된 미성숙 상악 영구중절치를 MTA를 이용한 즉일 치근단형성술을 시행하여 방사선투과성 및 병적인 임상증상의 감소등비교적 양호한 결과를 얻을 수 있었다.
치아의 치관-치근 파절은 치아파절이 치관과 치근에 걸쳐 발생되어 법랑질, 상아질 및 백악질까지 이환된 경우로 정의되며, 치수이환여부에 따라 복잡파절과 비복잡파절로 분류될 수 있다. 치관-치근 파절의 빈도는 유치열에서 2%, 영구치열에서 5%로 나타나며, 보통 상악 전치부에 호발한다. 이러한 치관-치근 파절된 치아의 수복을 위해서는 생물학적 폭경이 유지되어야 한다. 이를 위하여 사용되는 방법은 골삭제 후 치은절제술, 교정적 견인, 외과적 정출 후 수복하는 방법과, 인위적으로 발치하여 근관치료와 수복 후 재식하는 방법 등이 있다. 이중 외과적 정출술은 치아를 발거하여 파절부를 치은 연상으로 이동시켜 재식하는 방법으로서, 이는 치관부 파절편이 임상치근의 1/2 미만인 경우에 적응증이 될 수 있으며, 발견하지 못한 다른 파절편을 직접 시진할 수 있고 때로는 파절선을 순측에 위치시켜 치료시 시야확보 및 접근이 용이하다는 등의 장점이 있다. 본 증례에서는 외상으로 치관-치근 파절된 미완성 치근단의 상악 중절치를 가진 환아에서 외과적 정출술 후 근관치료와 광중합복합레진을 이용한 치관수복을 시행하였으며, 정기적 검진시 양호한 결과가 관찰됨을 확인할 수 있었다.
The aim of this study was to evaluate the marginal adaptation of direct class II sandwich restoration with packable composites(P-60), resin modified glass ionomer cement(Fuji-II LC), flowable compomer(Dyract Flow), flowable composites(Filtek Flow) in comparison with total bond restorations. In addition, for sandwich restorations, influence of different sandwich techniques was also evaluated. Large butt-joint box typed class II cavites with cervical margins 1mm below the cemento-enamel junction were cut into 70 extracted human molars. The cavities(7 groups, n=10) were filled using a closed/open sandwich restoration or total bond restoration technique with materials according to the manufacturer's recommandation using the single-component bonding agent for each system. Teeth were thermocycled 500 times between 5$^{\circ}C$ and 55$^{\circ}C$ with 30-second dwell time. The teeth were then coated with nail polish 1mm short of the restoration, placed in a 2% methylene blue for 24 hours, and sectioned with diamond wheel. Sections were examined with a stereoscope to determine the extent of microleakage. Dentine /Cementum margins were analyzed for microleakage on scale of 0(no leakage) to 4(entire axial wall) and interface between materials, on scale of 0(no leakage) to 3(axial wall). Results were evaluated with Kruskal Wallis Test, corrected for ties, to determine whether there were statistically significant differences among the seven groups. Pairs of groups were analyzed using the Student-Newman-Keuls Method and Dunn s Method. The results were as follows : 1. All groups showed some micoleakage in cervical portion. But there were no microleakage in interface between materials. 2. Closed sandwich restorations with Fuji-II LC and Filtek Flow had significantly lower leakage rating than total restorations with only P-60. However, open sandwich restorations with Dyract Flow showed significantly higher (P<0.05) 3. Closed sandwich restorations had significantly lower leakage rating than total restorations. However open sandwich restoration s showed significantly higher (P<0.05). 4. Sandwich restorations with Fuji-II LC were iou$.$or leakage than only P-60. Filtek Flow, Dyract Flow. But there were no statistically differences among the materials. From the results above, it could be concluded, closed sandwich restorations was effective in reducing microleakage of class II restorations. The best results showing the least microleakage were for the closed sandwich technique with Fuji-II LC and Filtek Flow.
The periodontium is a topographically complex organ consisting of epithelial tissue, soft and mineralized tissues. Structures comprising the periodontium include the gingiva, periodontal ligament (PDL) , cementum and the alveolar bone. The molecular mechanism of differentiation in PDL fibroblast cells remain unclear. Amino acid transporters play an important role in supplying nutrition to normal and cancer cells and for cell proliferation. Amino acid transport system L is a major nutrient transport system responsible for the Na+-independent transport of neutral amino acids including several essential amino acids. The system L is divided into two major subgroups, the L-type amino acid transporter 1 (LAT1) and the L-type amino acid transporter 2 (LAT2). In this study, the expression pattern of amino acid transport system L was, therefore, investigated in the differentiation of PDL fibroblast cells. To determine the expression level of amino acid transport system L participating in intracellular transport of amino acids in the differentiation of PDL fibroblast cells, it was examined by RT-PCR, observation of cell morphology, Alizaline red-S staining and uptake analysis after inducing experimental differentiation in PDL fibroblast cells isolated from mouse molar teeth. The results are as follows. 1. The LAT1 mRNA was expressed in the early stage of PDL fibroblast cell differentiation. This expression level was gradually reduced by differentiation- inducing time and it was not observed after the late stage. 2. The expression level of LAT2 mRNA was increased in time-dependent manner during differentiation induction of PDL fibroblast cells. 3. There was no changes in. the expression level of 4F2hc mRNA, the cofactor of LAT1 and LAT2, during differentiation of PDL fibroblast cells. 4. The expression level of ALP mRNA was gradually increased and the expression level of Col I mRNA was decreased during differentiation of PDL fibroblast cells. 5. The L-leucine transport was reduced by time from the early stage to the late stage in PDL fibroblast cell differentiation. As the results, it is considered that among neutral ammo acid transport system L in differentiation of PDL fibroblast cells, the LATl has a key role in cell proliferation in the early stage of cell differentiation and the LAT2 has an important role in the late stage of cell differentiation for providing cells with neutral amino acids including several essential amino acids.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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