Park, Eun-Ju;Tak, Hye-Jin;Park, Eun-Ha;Baik, Jeong-Mi;Zhengguo, Piao;Lee, Sang-Hwy
Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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v.31
no.2
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pp.103-115
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2009
In vertebrates, the face is mainly formed with neural crest derived neural crest cells by the inherent programs and the interactive environmental factors. Extracellular signaling-regulated kinase (Erk) is one of such programs to regulate the various cellular functions. And retinoic acid (RA) also plays an important role as a regulator in differentiation process at various stages of vertebrate embryogenesis. We wanted to know that the segregation as well as the patterning of maxillary and mandibular structure is greatly influenced by the maxillomandibular cleft (MMC) and the failure of this development may result in the maxillomandibular fusion (syngnathia) or other patterning related disorder. It has been well documented that the epithelium at this cleft region has significant expression of Fibroblast growth factor (Fgf) 8, and it is essential for the patterning of the first arch derived structures. By the morphological, skeletal, cell proliferation and apoptotic, and hybridization analysis, we checked the effects of Erk inhibition and/or RA activation onto MMC and could observe that Erk and RA signaling is individually and synergically involved in the facial patterning in terms of FGF signaling pathway via Barx-l. So RA and Erk signaling work together for the MMC patterning and the segregation of maxilla-mandible by controlling the Fgf-related signaling pathways. And the abnormality in MMC brought by aberrant Fgf signaling may result in the disturbances of maxillary-mandibular segregation.
Park, Sung-Soo;Shin, Dong-Ho;Kim, Tae-Wha;Lee, Dong-Hoo;Lee, Jung-Hee;Lee, Jung-Dal
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.40
no.2
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pp.185-191
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1993
Background: Intercellular adhesion molecule-1(ICAM-1) is a 90 kD surface glycoprotein, associated with ${\alpha}_L{\beta}_2$ and ${\alpha}_M{\beta}_2$ subunit of integrins, that serve as cell-cell and cell-substratum adhesion molecules and help regulate cellular morphology, differentiation, and proliferation. The adhesion molecules likely play important roles in maintaining the normal structure and function of the lung. ICAM-1 system among many cell adhesion molecules is importantly issuing in the pathogenesis of idiopathic pulmonary fibrosis. Methods : By using $IgG_1$ monoclonal antibody for ICAM-1, we investigated immunohistochemically the expression of ICAM-1 in the formalin-fixed, paraffin-embedded tissue sections of the 3 normal cases and 6 pieces of tissues taken 3 cases with idiopathic pulmonary fibrosis. Results : In the 3 normal cases, the expressions of ICAM-1 were not discernible. Up-regulation of the ICAM-1 expression was showed in the interstitial fibroblast cells of alveolar septa in 5 pieces and proliferated alveolar pneumocytes in 1 piece among 6 pieces of tissues taken 3 cases with idiopathic pulmonary fibrosis. Conclusion : It was concluded from these findings that up-regulation of the ICAM-1 expression may be related to pathogenesis of idiopathic pulmonary fibrosis.
Park, Jeong-Hae;Park, Jung-Ae;Kang, Seok-Woo;Goo, Tae-Won;Chung, Kyung-Tae
Journal of Life Science
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v.21
no.12
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pp.1778-1783
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2011
Hematopoietic cytokines regulate production of blood cells by stimulating proliferation and differentiation of bone marrow cells. Among these hematopoietic cytokines, called hematopoitic growth factors, glranulocyte-colony stimulating Factor (G-CSF), which regulates growth of neutrophils, is one of important therapeutic factors because cancer patients suffer with neutropenia which is severe reduction of neutrophils after chemotherapy. Two groups of recombinant G-CSF have approved and used for therapeutic purposes and many researches are still on-going to produce recombinant G-CSF by different techniques. We engineered human G-CSF with Bombyx specific endoplasmic reticulum (ER) signal sequence, therefore, secretion of human G-CSF protein was improved in Bombyx mori-origined cell line, Bm5. The Bombyx ER signal sequence and human G-CSF matured protein region chimera was further remodeled at the N-terminus of matured G-CSF protein to understand roles of N-terminus on outer cellular secretion and/or production. Three different mutants were generated deleting three amino acids in non alpha-helical region in N-terminus in order to scan important amino acids for G-CSF secretion. One of 3 different N-terminal deletion mutants showed dramatically reduction of secreted amount of G-CSF indicating its important role on secretion. The data suggest that remodeling in non alpha-helical region of N-terminus is also important for recombinant G-CSF production.
Ding, Dayong;Li, Changfeng;Zhao, Tiancheng;Li, Dandan;Yang, Lei;Zhang, Bin
Molecules and Cells
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v.41
no.5
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pp.423-435
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2018
This investigation was aimed at working out the combined role of lncRNA H19, miR-29b and Wnt signaling in the development of colorectal cancer (CRC). In the aggregate, 185 CRC tissues and corresponding para-carcinoma tissues were gathered. The human CRC cell lines (i.e. HT29, HCT116, SW480 and SW620) and normal colorectal mucosa cell line (NCM460) were also purchased. Si-H19, si-NC, miR-29b-3p mimics, miR-29b-3p inhibitor, si-PGRN and negative control (NC) were, respectively, transfected into the CRC cells. Luciferase reporter plasmids were prepared to evaluate the transduction activity of $Wnt/{\beta}-catenin$ signaling pathway, and dual-luciferase reporter gene assay was arranged to confirm the targeted relationship between H19 and miR-29b-3p, as well as between miR-29b-3p and PGRN. Finally, the proliferative and invasive capacities of CRC cells were appraised through transwell, MTT and scratch assays. As a result, overexpressed H19 and down-expressed miR-29b-3p displayed close associations with the CRC patients' poor prognosis (P < 0.05). Besides, transfection with si-H19, miR-29b-3p mimic or si-PGRN were correlated with elevated E-cadherin expression, decreased snail and vimentin expressions, as well as less-motivated cell proliferation and cell metastasis (P < 0.05). Moreover, H19 was verified to directly target miR-29b-3p based on the luciferase reporter gene assay (P < 0.05), and miR-29b-3p also bound to PGRN in a direct manner (P < 0.05). Finally, addition of LiCl ($Wnt/{\beta}-catenin$ pathway activator) or XAV93920 ($Wnt/{\beta}-catenin$ pathway inhibitor) would cause remarkably altered E-cadherin, c-Myc, vimentin and snail expressions, as well as significantly changed transcriptional activity of ${\beta}-catenin/Tcf$ reporter plasmid (P < 0.05). In conclusion, the lncRNA H19/miR-29b-3p/PGRN/Wnt axis counted a great deal for seeking appropriate diagnostic biomarkers and treatment targets for CRC.
PLGA microspheres have been known as an injectable system for tissue engineering. The purpose of this study was to investigate the condition of emulsion formation and cell adhesion on the microsphere surface. BSA-loaded PLGA microsphere was fabricated by oil-in-water (O/W) and water-in-oil-in-water (W/O/W) solvent evaporation method. Sodium alginate was dissolved in water phase to control initial burst release and to improve lag time by PLGA bulk degradation. In addition, the morphology of cells attached on the micro spheres was studied using a scanning electron microscopy (SEM). Cellular proliferation behavior of human disc cells cultivated on PLGA micro spheres was analyzed using a MTT assay. MTT assay revealed that the cells can attach and proliferate on PLGA microspheres. According to these results, we concluded that BSA -loaded alginate/PLGA microspheres can be used as an injectable system for tissue engineering application.
So, Jeong-Won;Jang, Ji-Wook;Kim, Soon-Hee;Choi, Jin-Hee;Rhee, John-M.;Min, Byung-Hyun;Khang, Gil-Son
Polymer(Korea)
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v.32
no.6
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pp.516-522
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2008
Biodegradable polymers have been used extensively as scaffolding materials to regenerate new tissues and the ingrowth of tissue have been reported to be dependent directly of the porosity, pore diameter, pore shape, and porous structure of the scaffold. In this study, porous poly (L-lactide-co-glycolide) (PLGA) scaffolds with five different pore sizes were fabricated to investigate the effect of pore sizes for AF tissue regeneration. Cellular viability and proliferation were assayed by MTT test. Hydroxyproline/DNA content of AF cells on each scaffold was measured. sGAG analyses were performed at each time point of 2 and 6 weeks. Scaffold seeded AF cells were implanted into the back of athymic nude mouse to observe the difference of formation of disc-like tissue depending on pore size in vivo. We confirmed that scaffold with $180{\sim}250{\mu}m$ pores displayed high cell viability in vitro and produced higher ECM than scaffold with other pore sizes in vivo.
MicroRNAs (miRNAs) represent a class of small non-coding regulatory RNAs that play important roles in normal hematopoiesis, including erythropoiesis. Although studies have identified several miRNAs that regulate erythroid commitment and differentiation, we do not understand the mechanism by which the crucial erythroid transcription factors, GATA-1and NF-E2 directly regulate and control differentiation via miRNA pathways. In this study, we identified miR-199b-5p as a key regulator of human erythropoiesis, and its expression was up-regulated during the erythroid differentiation of K562 cells. Furthermore, the increase of miR-199b-5p in erythroid cells occurred in a GATA-1- and NF-E2-dependent manner during erythrocyte maturation. Both GATA-1 and NF-E2 bound upstream of the miR-199b gene locus and activated its transcription. Forced expression of miRNA-199b-5p in K562 cells affected erythroid cell proliferation and maturation. Moreover, we identified c-Kit as a direct target of miR-199b-5p in erythroid cells. Taken together, our results establish a functional link among the erythroid transcription factors GATA-1/NF-E2, miR-199b-5p and c-Kit, and provide new insights into the coupling of transcription and post-transcription regulation in erythroid differentiation.
The purpose of this work is to develope sodium-containing nonstoichiometric apatitic coatings on solid substrate. The apatitic coatings prepared at different concentrations of sodium salt indicated that the presence of sodium ions exerted significant effects on the physicochemical properties of the apatitic coating including surface morphology, chemical state, and Ca/P ratio. The variation of these properties was sustained up to 0.01 mM of sodium ion concentration. The ratio of calcium to phosphorus was varied from 2.18 to 2.03 which indicated the apatitic coating prepared in this study was calcium-rich nonstoichiometric apatite. The structure of all the samples appeared to be low crystalline. In the presence of sodium ion within the apaptitic coating, the adhesion of human osteoblast-like SaOS-2 cells was significantly promoted. On the other hand, the proliferation of the cells on the apatitic coatings was decreased with the increase of sodium ions. This reverse response of SaOS-2 cells indicates that the interaction between SaOS-2 and apatitic surface triggered considerable changes in intracellular mechanisms including cellular signal transductions.
Demineralized boneparticle (DBP) has been widely used as and a powerful promoter of new bone growth. In this study, DBP sponges were chemically crosslinked and characterized for the potential application of tissue engineered scaffolds. The DBP sponges prepared by crosslinking with EDC. 0.1, 0.2 or 0.3% pepsin was applied to DBP dissolved in 3% (v/v) acetic acid aqueous solution for 48 hrs. The prepared sponges were crosslinked by 1, 5, 10, 50 or 100 mM of EDC solution concentration and then were lyophilized. The DBP sponges were characterized by SEM, FT-IR and DSC and analyzed in terms of their porosity and water absorption ability. The cellular viability and proliferation were assayed by MTT assay. Our investigation revealed that 0.2$\sim$0.3% of pepsin and 50$\sim$100 mM of EDC produced DBP sponges with good physical characteristics. In conclusion, DBP sponge prepared under these conditions is potentially useful for the applications of tissue construction.
Ciglitazone is a member of the thiazolidinedione family, and specifically binds to peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ), thereby promoting adipocyte differentiation. We hypothesized that ciglitazone as a PPARγ ligand in the absence of an adipocyte differentiation cocktail would increase adiponectin and adipogenic gene expression in bovine satellite cells (BSC). Muscle-derived BSCs were isolated from six, 18-month-old Yanbian Yellow Cattle. The BSC were cultured for 96 h in differentiation medium containing 5 µM ciglitazone (CL), 10 µM ciglitazone (CM), or 20 µM ciglitazone (CH). Control (CON) BSC were cultured only in a differentiation medium (containing 2% horse serum). The presence of myogenin, desmin, and paired box 7 (Pax7) proteins was confirmed in the BSC by immunofluorescence staining. The CL, CM, and CH treatments produced higher concentrations of triacylglycerol and lipid droplet accumulation in myotubes than those of the CON treatment. Ciglitazone treatments significantly increased the relative expression of PPARγ, CCAAT/enhancer-binding protein alpha (C/EBPα), C/EBPβ, fatty acid synthase, stearoyl-CoA desaturase, and perilipin 2. Ciglitazone treatments increased gene expression of Pax3 and Pax7 and decreased expression of myogenic differentiation-1, myogenin, myogenic regulatory factor-5, and myogenin-4 (p < 0.01). Adiponectin concentration caused by ciglitazone treatments was significantly greater than CON (p < 0.01). RNA sequencing showed that 281 differentially expressed genes (DEGs) were found in the treatments of ciglitazone. DEGs gene ontology (GO) analysis showed that the top 10 GO enrichment significantly changed the biological processes such as protein trimerization, negative regulation of cell proliferation, adipocytes differentiation, and cellular response to external stimulus. Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathway analysis showed that DEGs were involved in the p53 signaling pathway, PPAR signaling pathway, biosynthesis of amino acids, tumor necrosis factor signaling pathway, non-alcoholic fatty liver disease, PI3K-Akt signaling pathway, and Wnt signaling pathway. These results indicate that ciglitazone acts as PPARγ agonist, effectively increases the adiponectin concentration and adipogenic gene expression, and stimulates the conversion of BSC to adipocyte-like cells in the absence of adipocyte differentiation cocktail.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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