Autodisplay of a multimeric protein complex on a cell surface is limited by intrinsic factors such as the types and orientations of anchor modules. Moreover, improper folding of proteins to be displayed often hinders functional cell surface display. While overcoming these drawbacks, we ultimately extended the applicability of the autodisplay platform to the display of a protein complex. We designed and constructed a cell surface attachment (CSA) system that uses a non-covalent protein-protein interaction. We employed the high-affinity interaction mediated by an orthogonal cohesin-dockerin (Coh-Doc) pair from Archaeoglobus fulgidus to build the CSA system. Then, we validated the orthogonal Coh-Doc binding by attaching a monomeric red fluorescent protein to the cell surface. In addition, we evaluated the functional anchoring of proteins fused with the Doc module to the autodisplayed Coh module on the surface of Escherichia coli. The designed CSA system was applied to create a functional attachment of dimeric α-neoagarobiose hydrolase to the surface of E. coli cells.
Recent advancement of micro/nano technology enables the development of diverse micro/nano particle-based delivery systems. Due to the multi-functionality and engineerability, particle-based delivery system are expected to be a promising method for delivery to the target cell. Since the particle-based delivery system should be delivered to the various kinds of target cell, including the cardiovascular system, cancer cell etc., it is frequently decorated with multiple kinds of targeting molecule(s) to induce specific interaction to the target cell. The surface decorated molecules interact with the cell surface expressed molecule(s) to specifically form a firm adhesion. Thus, in this study, the probability of adhesion is estimated to predict the possibility to form a firm adhesion for the multi-ligand decorated particle-based delivery system.
The interaction between dual-ligand decorated particle-based delivery system and target cell under shear flow is predicted using probability model developed. We assumed the two kinds of ligand are decorated on the surface of the particle with 10% length difference. Fixed with other biophysical parameters, a study on the particle-cell interaction for the different non-specific interaction parameter is performed. To induce the firm adhesion, short ligand-receptor should be engaged. Also, it is shown that the rational design of ligand-receptor interaction, including receptor number, specific interaction parameter, kinds of ligand-receptor, etc., should be considered.
In this study, we describe the most expected behavior of cells on the modified surface and the correlation between the modified substrates and the response of cells. The physicochemical characteristics of substrates played an essential role in the adhesion and proliferation of cells. Glass and polymer substrates were modified using air plasma oxidation, and the surfaces were coated with self-assembled monolayer molecules of silanes. The PDMS substrates embedded with parallel micropatterns were used for evaluation of the effect of topologically modified substrate on cellular behaviour. BALB/3T3 fibroblast cells were cultured on different surfaces with distinct wettability and topology, and the growth rates and morphological change of cells were analyzed. Finally, we found the optimum conditions for the adhesion and proliferation of cells on the modified surface. This study will provide insight into the cell-surface interaction and contribute to tissue engineering applications.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2011.08a
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pp.187-187
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2011
Nowadays, the issue of solar cell durability in local weather and environment is a crucial issue. Above all, surface corrosion on solar cell multilayers is a major factor that determines the durability of commercial solar cells; corrosive chemical interactions between air, humidity and chemical species and solar cell multilayers can unfavorably affect the durability. Here, we study microscopic and spectroscopic surface techniques to investigate the corrosive interaction on the antireflective layers of solar cell multilayers under various conditions such as acid, base, constant temperature and humidity. Surface morphology and adhesion force were characterized with atomic force microscopy before and after chemical treatment. Chemical composition, and transmittance factors were studied with X-ray photoelectron spectroscopy, and ultraviolet-visible spectroscopy, respectively. Based on these studies, we suggest the dominant factors in the corrosive chemical processes, and their influences on the structural, compositional, and optical properties of the antireflective layers.
Kim, Yun-Kyoung;Oh, Soo-Jin;Jin, Bong-Suk;Park, Chan-Hoo;Jeon, Hye Sung;Boo, Doo-Wan;Yu, Yeon-Gyu
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.30
no.3
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pp.577-581
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2009
Interactions between the surface and capsid proteins of the hepatitis B virus (HBV) are critical for the assembly of virus particles. In this study, we developed a cell-based method to visualize the interactions between the capsid and surface proteins of HBV. Capsid-GFP, a capsid protein fused to a green fluorescence protein (GFP), forms nucleocapsid-like structures in the cytoplasm of mammalian cells. It relocates to the plasma membranes in cells expressing PH-PreS, a fusion protein consisting of the PreS region of the HBV surface protein and the PH domain of PLC-$\gamma$. Membrane localization of the capsid-GFP in these cells is prevented by an inhibitory peptide that blocks the interaction between the capsid and surface proteins. This dynamic localization of capsid-GFP is applicable for screening compounds that may potentially inhibit or prevent the assembly process of HBV particles.
In this study, we proposed a three-dimensional dynamic model under the diffuse interface description for the single crawling cell. From the developed model, we described the clear evolution processes for crawling neutrophil and assessed the reliable quantitative chemotactic property, which confirmed the high possibility of adequate predictions. To establish the system considering of multiple mechanisms such as, diffusion, chemotaxis, and interaction with surface, a diffuse interface model is employed.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2013.08a
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pp.275-275
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2013
Osteoblast is one of cells related with osseointegration and many research have conducted the adhesion of osteoblast onto the surface of implant. In the osseointegration, biocompatibility of the implant and cell adhesion to the surface are important factors. The researches related to cell adhesion have a direction from micro-scaled surface roughness to nano-scaled surface roughness with advancing nanotechnology. A cell reacts and sense to stimuli from extracellular matrix (ECM) and topography of the ECM [1]. Thus, for better osseointegration, we should provide an environment similar to ECM. In this study, we synthesize TiO2 nanowires using hydrothermal reaction because TiO2 provides inertness to titanium on its surface and enables it used as an implant material for the orthopedic treatment such as fixation of the bone fracture [2]. Ti substrate is immersed into NaOH aqueous solution. The solution are heated at $140{\sim}200^{\circ}C$ for various time (10~720 minutes). After heat treatment, we take out the sample and immerse it into HCl aqueous solution for 1 hour. The acid treated sample is heated again at $500^{\circ}C$ for 3 hours [3]. Then, we culture osteoblast on the TiO2 nanowires. For investigating cell adhesion onto nanostructured surface, we conduct several tests such as MTT assay, ALP (Alkaline phosphatase) activity assay, measuring calcium expression, and so on. These preliminary results of the cell culture on the nanowires are foundation for investigating cell-material interaction especially with nanostructure interaction.
Journal of the Korean Society for Nondestructive Testing
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v.32
no.3
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pp.263-268
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2012
It is important to know the mechanism of cell membrane fluctuation because it can be readout for the nanomechanical interaction between cytoskeleton and plasma membrane. Traditional techniques, however, have drawbacks such as probe contact with the cell surface, complicate analysis, and limit spatial and temporal resolution. In this study, we developed a new system for non-contact measurement of nano-scale localized-cell surface dynamics using modified-scanning ion-conductance microscopy. With 2 nm resolution, we determined that endothelial cells have local membrane fluctuations of ~20 nm, actin depolymerization causes increase in fluctuation amplitude, and ATP depletion abolishes all membrane fluctuations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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