The Tcf-1 (T cell specific factor-1) is a transcription factor uniquely expressed in T-lineage cells. Its expression is developmentally regulated, which is high in the specific stage of immature thymocytes, but is much lower in mature T cells. We cloned the Tcf-1 gene by subtractive hybridization and found it to be highly expressed in the thymus compared to the mRNA level in the spleen as expected. Since apoptosis occurs enormously in the thymus, we were interested in whether Tcf-1 gene expression could be regulated by such a high level of apoptotic assault. By using T cell hybridoma 70.7 cells, we induced apoptosis by incubating cells with anti-CD3 antibody in vitro. After apoptosis induction, Tcf-1 mRNA level was found to be significantly reduced compared to normal cells. Since Tcf-1 is a transcription factor for the CD3-e gene, we tested how CD3-e expression is regulated in apoptotic cells. The surface level of CD3-e protein is also down-regulated after apoptosis induction. Such a down-modulation of CD3-e protein would reduce the TCR/CD3 complex on the cell surface, which would be an important regulator for T cell apoptosis.
Jae-Hyung Lee;Jae-Min Yuk;Guang-Ho Cha;Young-Ha Lee
Parasites, Hosts and Diseases
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v.61
no.2
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pp.138-146
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2023
Toxoplasma gondii is an intracellular protozoan parasite which can infect most warm-blooded animals and humans. Among the different mouse models, C57BL/6 mice are more susceptible to T. gondii infection compared to BALB/c mice, and this increased susceptibility has been attributed to various factors, including T-cell responses. Dendritic cells (DCs) are the most prominent type of antigen-presenting cells and regulate the host immune response, including the response of T-cells. However, differences in the DC responses of these mouse strains to T. gondii infection have yet to be characterized. In this study, we cultured bone marrow-derived DCs (BMDCs) from BALB/c and C57BL/6 mice. These cells were infected with T. gondii. The activation of the BMDCs was assessed based on the expression of cell surface markers and cytokines. In the BMDCs of both mouse strains, we detected significant increases in the expression of cell surface T-cell co-stimulatory molecules (major histocompatibility complex (MHC) II, CD40, CD80, and CD86) and cytokines (tumor necrosis factor (TNF)-α, interferon (IFN)-γ, interleukin (IL)-12p40, IL-1β, and IL-10) from 3 h post-T. gondii infection. The expression of MHC II, CD40, CD80, CD86, IFN-γ, IL-12p40, and IL-1β was significantly higher in the T. gondii-infected BMDCs obtained from the C57BL/6 mice than in those from the BALB/c mice. These findings indicate that differences in the activation status of the BMDCs in the BALB/c and C57BL/6 mice may account for their differential susceptibility to T. gondii.
Background: The serum level of soluble CD30 (sCD30) is known to be increased with several lymphomas and to correlate with prognosis. Primary effusion lymphoma (PEL) is a highly aggressive malignant lymphoma with poor prognosis, but the existence and significance of sCD30 in PEL have not yet been investigated in detail. Objectives: Since the membrane type of CD30 is frequently expressed on the surface of PEL cells, we compared the expression of the membrane type of CD30 and the production of sCD30 among PEL cell lines as well as other lymphomas. Methods: The expression of surface CD30 in various lymphoma cell lines was analyzed with flow cytometry ans sCD30 was quantified by ELISA. Results: Both surface and sCD30 were detected on PEL cell lines as well as on Hodgkin's lymphoma and adult T-cell leukemia/lymphoma cell lines. Surface CD30 and sCD30 levels of each cell lines correlated with each other. Conclusion: The serum level of sCD30 appear to be a useful biological tumor marker for the diagnosis and management of CD30-positive PEL.
Park, Sung-Jae;Bae, Sang-Bum;Kim, Su-Kyoung;Eom, Tae-Gwan;Song, Seung-Il
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.37
no.3
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pp.214-224
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2011
Objective: This study examined the potential of the in vitro osteogenesis of microtopographically modified surfaces, RBM (resorbable blasting media) surfaces, which generate hydroxyapatite grit-blasting. Methods: RBM surfaces were modified hydroxyapatite grit-blasting to produce microtopographically modified surfaces and the surface morphology, roughness or elements were examined. To investigate the potential of the in vitro osteogenesis, the osteoblastic cell adhesion, proliferation, and differentiation were examined using the human osteoblast-like cell line, MG-63 cells. Osteoblastic cell proliferation was examined as a function of time. In addition, osteoblastic cell differentiation was verified using four different methods of an ALP activity assay, a mineralization assay using alizarin red-s staining, and gene expression of osteoblastic differentiation marker using RT-PCR or ELISA. Results: Osteoblastic cell adhesion, proliferation and ALP activity was elevated on the RBM surfaces compared to the machined group. The cells exhibited a high level of gene expression of the osteoblastic differentiation makers (osteonectin, type I collagen, Runx-2, osterix). imilar data was represented in the ELISA produced similar results in that the RBM surface increased the level of osteocalcin, osteopontin, TGF-beta1 and PGE2 secretion, which was known to stimulate the osteogenesis. Moreover, alizarin red-s staining revealed significantly more mineralized nodules on the RBM surfaces than the machined discs. Conclusion: RBM surfaces modified with hydroxyapatite grit-blasting stimulate the in vitro osteogenesis of MG-63 cells and may accelerate bone formation and increase bone-implant contact.
Shin, Yong-Jae;Lenardo, Michael J;Park, Tae-Kyu;Lee, Kwang-Ho
The Journal of Korean Society of Virology
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v.29
no.1
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pp.33-38
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1999
Retroviral vector provide a highly efficient method for gene transfer into eukaryotic cells. This vector system can be divided into two components; the retroviral vector itself and the retroviral packaging cell line. The key improvement in the design of these two components are, focused on two aspects; the reduction of helper virus production and high titer-virus. We used PA317 for retrovirus packaging cell line, for its high producibility of viral titer. To test the ability of the vectors to generate high titer-virus, we have chosen four different retroviral vectors; LN, LNSX, LNCX and LXSN. To test easily the viral titer, we have made recombinant construction with CD4 and CD8, checked their viral titer and stained their surface expression. LXSN which contain SV40 early promoter in front of neo gene showed best results in viral transient transfection assay, dot blot assay and surface expression. In addition, recombinant containing CD8 generally showed much higher viral titration and surface expression than CD4.
Park, Ju-Mi;Jeon, Hye-Ran;Pang, Eun-Kyoung;Kim, Myung-Rae;Kang, Na-Ra
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.38
no.sup2
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pp.299-308
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2008
Purpose: The aim of this study was to evaluate adhesion and gene expression of the MC3T3-E1 cells cultured on machined titanium surface (MS) and anodized titanium surface (AS) using MTT test, Scanning electron micrograph and cDNA microarray. Materials and Methods: The MTT test assay was used for examining the proliferation of MC3T3-E1 cells, osteoblast like cells from Rat calvaria, on MS and AS for 24 hours and 48 hours. Cell cultures were incubated for 24 hours to evaluate the influence of the substrate geometry on both surfaces using a Scanning Electron Micrograph (SEM). The cDNA microarray Agilent Rat 22K chip was used to monitor expressions of genes. Results: After 24 hours of adhesion, the cell density on AS was higher than MS (p < 0.05). After 48 hours the cell density on both titanium surfaces were similar (p > 0.05). AS had the irregular, rough and porous surface texture. After 48 hours incubation of the MC3T3-E1 cells, connective tissue growth factor (CTGF) was up-regulated on AS than MS (more than 2 fold) and the insulin-like growth factor 1 receptor was down-regulated (more than 2 fold) on AS than MS. Conclusion: Microarray assay at 48 hours after culturing the cells on both surfaces revealed that osteoinductive molecules appeared more prominent on AS, whereas the adhesion molecules on the biomaterial were higher on MS than AS, which will affect the phenotype of the plated cells depending on the surface morphology.
Natural killer (NK) cell activity is more attenuated in hepatocellular carcinoma (HCC) patients than normal. Hypoxic-inducible factor (HIF)-1α is highly expressed in tumors to maintain their metabolism in a hypoxic environment. The expression of HIF-1α in cancers can lead to cell growth, proliferation, invasion/metastasis and immune escape. Although apigenin, a flavonoid, is known to have various biological activities, it has not been demonstrated in NK cell immune activity in HCC cells. In this study, NK-92 cells were directly cocultured with HCC SK-Hep1 cells for 24 h to evaluate NK cell activity in HCC cells or HCC cells expressing HIF-1α by apigenin. NK cell cytotoxicity to HCC cells expressing HIF-1α was significantly increased, and NK cell-activating receptors, NKG2D, NKp30 and NKp44 were highly expressed. The activating effect of apigenin on NK cells substantially induced apoptosis in HCC cells expressing HIF-1α through high expression of CD95L on the surface of NK-92 cells. Moreover, apigenin excellently inhibited the level of TGF-β1 in a coculture of NK cells and HCC cells. In conclusion, apigenin seems to be a good compound that increases NK cell cytotoxicity to HCC cells by controlling HIF-1α expression.
Yoon, Seo Young;Park, Yi-Seul;Choi, Sung-Eun;Jung, Da Hee;Lee, Jin Seok
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2013.08a
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pp.93-93
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2013
To make the rationale design of interface between cell and artificial surface, many studies have been controlled influencing cue which can typically be divided into two central categories: chemical cues based on modification surface chemical properties containing attractive/repulsive molecules, and physical cues that may include applied tension/stress, electrical polarization, magnetic field, and topography. Recently, researches have been focused on physical cue, especially topography. The surface topography may influence cellular responses for example, cell adhesion, cell morphology and gene expression. However, there were few systematic studies about these nanotopographical effects on neuronal developments in a feature size-dependent manner. Herein, we report a nanoscale-resolved study of nanotopographical effects on cellular adhesion and growth. In this study, we use substrates with packed glass beads by rubbing method for generating highly periodic nanotopographies with various sizes. We found that acceleration of neuritogenesis appeared only on the beads larger than 200 nm in diameter, and observed that filopodial thickness was comparable with this scale. This study is expected to be essential to elucidate the nanotopographical effect on cellular adhesion and growth.
Cancer stem cells (CSCs) are often characterized by the elevated expression of drug-resistance related stem-cell surface markers, such as CD133 and ABCG2. Recently, we reported that CSCs have a high level of expression of the IL-6 receptor (IL-6R). The purpose of this study was to investigate the effect of anticancer drugs on the expression of the drug resistance-related cancer stem cell markers, ABCG2, IL-6R, and CD133 in non-small cell lung cancer (NSCLC) cell lines. A549, H460, and H23 NSCLC cell lines were treated with the anticancer drugs 5-fluorouracil (5-FU; $25{\mu}g/ml$) and methotrexate (MTX; $50{\mu}g/ml$), and the expression of putative CSC markers was analyzed by fluorescent activated cell sorter (FACS) and the gene expression level of abcg2, il-6r and cd133 by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). We found that the fraction of ABCG2-positive(+) cells was significantly increased by treatment with both 5-FU and MTX in NSCLC cells, and the elevation of abcg2, il-6r and cd133 expressions in response to these drugs was also confirmed using RT-PCR. Also, the number of IL-6R(+) cells was increased by MTX in the 3 cell lines mentioned and increased by 5-FU in the H460 cell line. The number of CD133(+) cells was also significantly increased by both 5-FU and MTX treatment in all of the cell lines tested. These results indicate that 5-FU and MTX considerably enhance the expression of drug-resistance related CSC markers in NSCLC cell lines. Thus, we suggest that antimetabolite cancer drugs, such as 5-FU and MTX, can lead to the propagation of CSCs through altering the expression of CSC markers.
Park, Sang-Jun;Park, Hae-Ryoun;Kim, Gyoo-Cheon;Park, Bong-Soo;Kim, Tae-Kyu
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.26
no.2
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pp.132-136
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2000
The cell surface glycoprotein CD44 is a kind of adhesion molecule, which binds hyaluronic acid, type I collagen and fibronectin. Although there have been numerous reports on the expression and the function of CD44 in lymphocytes and macrophages, very little is known about its distribution and definite role in epithelial tissue, especially in oral epithelial one. The present study was performed to investigate the distribution and expression of the CD44 in human gingiva and squamous cell carcinoma(SCC) arising in human gingiva. And the authors compared CD44 expression with histopathologic grade of SCC. The results were as follows: 1. The CD44 was strongly expressed in granular, spinous and basal layers of normal marginal and attached gingiva, in spinous and basal layers of normal sulcular gingiva, and in all epithelial layers of normal junctional gingiva. 2. In SCC of gingiva, the CD44 was expressed in all but one case. In most of the cases the CD44 was expressed at cell membrane and the degree of expression was relatively strong. 3. In low-grade SCC of gingiva, the CD44 was strongly expressed, especially at the basal and spinous layers of abundantly keratinized cancer nests. In high-grade SCC of gingiva, the CD44 expression tended to be weak but was strong at cells showing individual keratinization. This study suggest that the CD44 expression of normal and cancerous gingival epithelium is associated with the degree of proliferation and differentiation of epithelial cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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