Hoi, Nguyen Ngoc;Luong, Hoang Van;Long, Nguyen Van;Duong, Vu Binh;Byun, Sang-Yo
KSBB Journal
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v.25
no.2
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pp.193-198
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2010
Cell cultures of Taxus wallichiana Zucc. were made to enhance the production of anticancer agent paclitaxel. In suspension cultures, the maximum cell growth rate in exponential growth phase was 0.14 $day^{-1}$ which was correlated to 4.96 days of cell doubling time. The production of paclitaxel was non-growth associated. The paclitaxel production was started after the exponential growth phase and increased to declined phase where the maximum concentration was observed. Various elicitors were tested to enhance the production of paclitaxel. The combination of two elicitors of jasmonic acid and cellulase increased the production of paclitaxel 1.8 and 3.1 times compared to paclitaxel production by individual elicitor respectively.
Recently, Rhei Rhizoma extracts (RRE) have begun to receive more attention as potential biological response modifiers. In the present study, we studied the antiproliferative effect of RRE on tumor cells and the effect of RRE on macrophage function. A variety of tumor cells and macrophages were treated with RRE at various concentrations. The effect of RRE on cell proliferation was measured by MTT assay and the effect of RRE on the production of nitric oxide (NO) was determined in the macrophage-like cell lines Raw264.7, C6 and peritoneal macrophages (pMQ). RRE inhibited the growth of tumor cells (e.g., B16, HOS). However, the effects of RRE on the production of NO varied with macrophage types. RRE had no effect on C6 cell growth and slightly increased the growth of Raw264.7 cells. In addition, treatment of normal pMQ with RRE enhanced NO production in a concentration-dependent manner, whereas RRE suppressed NO production at $50\;{\mu}g/mL$ in both Raw264.7 and C6 cells. However, RRE suppressed NO production in LPS/IFN-$\gamma$-stimulated C6 cells. Overall, these results suggest that RRE elicits an antiproliferative property and differentially modulates NO production in various macrophages, and have a potential for therapeutic application.
The aim of this study is to evaluate the effects essential oil from Lavendular officinalis on the production of UVB-irradiated-induced nitric oxide(NO), in vivo and in vitro. NO is a recently discovered mediator of cell communication involved in a variety of physiological and pathophysiological processes. This enzyme is present in various tissues including smooth muscle cells and macrophages and take part in several immunopathological process. In vitro, the cytotoxicity and cell viability of aroma oil was evaluated by the MTT assay in the concentration of 0.01, 0.05, 0.1%. And, the effect of aroma oil was investigated to production of NO in human fibroblast cells line CCD-986sk ($2{\times}10^5$ cell/well) after UVB-irradiation with aroma oil (0.01, 0.1, and 1%). The result showed that aroma oil did not affected the production of NO. In vivo, it was investigated to production of NO after UVB- irradiation with aroma oil. The experimental groups were divided into four groups. Aroma oil was stimulated the production of NO by itself. As the results, all of the in vitro and in vivo, aroma oil were affected production of NO by dependent the concentration-manners.
The purpose of this study was to investigate the effect of lactic acid bacteria (LAB) cell wall extract on the proliferation and cytokine production of immune cells to select suitable probiotics for space food. Ten strains of LAB (Lactobacillus bulgaricus, L. paracasei, L. casei, L. acidophilus, L. plantarum, L. delbruekii, Lactococcus lactis, Streptococcus thermophilus, Bifidobacterium breve, and Pedicoccus pentosaceus) were sub-cultured and further cultured for 3 d to reach 7-10 Log colony-forming units (CFU)/mL prior to cell wall extractions. All LAB cell wall extracts failed to inhibit the proliferation of BALB/c mouse splenocytes or mesenteric lymphocytes. Most LAB cell wall extracts except those of L. plantarum and L. delbrueckii induced the proliferation of both immune cells at tested concentrations. In addition, the production of TH1 cytokine (IFN-γ) rather than that of TH2 cytokine (IL-4) was enhanced by LAB cell wall extracts. Of ten LAB extracts, four (from L. acidophilus, L. bulgaricus, L. casei, and S. thermophiles) promoted both cell proliferating and TH1 cytokine production. These results suggested that these LAB could be used as probiotics to maintain immunity and homeostasis for astronauts in extreme space environment and for general people in normal life.
Human Erythropoietin (EPO) gene is cloned in quail fibrosarcoma cell, QT35. Because molecular weight of EPO is similar to that of serum albumin, cell culture with serum containing medium makes purification of EPO very difficult. Using fractional factorial study, we have developed serum free medium for the recombinant QT35 cell lines, QT N4D4 and QT SY-IMP, which have cloned EPO with glutamine synthetase (GS) gene amplification system and with puromycin selective marker, respectively. Among the seven frequently used medium components, fibronectin, BSA, and EGF were the most important for EPO production. However, sufficient fibronectin supplement to the medium did not make any good attachment of QT35 to culture plate over 3 days. Therefore, to maximize EPO production, we attempted a medium-shift at confluence from serum containing medium to serum free medium(QT SFM6). Using the medium-shift protocol with QT SFM6, nearly the same productivity of EPO was achieved comparing with that without medium-shift. This result was true in both QT35 cell lines in three types of culture, i.e. T flask, microcarrier and roller bottle cultures.
CHO (Chinese hamster ovary) cells were transfected with plasmids containing both cis-acting HRE (hypoxia response element) and CMV-promoter that controls tissue-type plasminogen activator (t-PA). CHO cells with HRE produced 16.2 fold higher t-PA concentration than CHO cells without HRE. It was noted that hypoxia strongly induced CHO cell apoptosis. which resulted in decrease of cell viability and protein production. In this study. by introducing Bcl-2, anti-apoptotic gene, we tried to recover cell viability and increase the protein production. When batch culture of both control cells without transfection of Bcl-2 and cells transfected with Bcl-2 were performed in the absence of CoCl ι hypoxia mimic condition. the cells with Bcl-2 were effected specific cell growth rates, maximum cell density. Immunoblotting assay showed Bcl-2 was recombinant with HRE dependent t- P A expression cassette, and their expression level was depended on hypoxia. By introducing Bcl-2, both cell viability and maximum cell density could be increased.
Dayem, Ahmed Abdal;Lee, Soo Bin;Kim, Kyeongseok;Lim, Kyung Min;Jeon, Tak-il;Cho, Ssang-Goo
BMB Reports
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v.52
no.5
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pp.295-303
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2019
Breakthroughs in stem cell technology have contributed to disease modeling and drug screening via organoid technology. Organoid are defined as three-dimensional cellular aggregations derived from adult tissues or stem cells. They recapitulate the intricate pattern and functionality of the original tissue. Insulin is secreted mainly by the pancreatic ${\beta}$ cells. Large-scale production of insulin-secreting ${\beta}$ cells is crucial for diabetes therapy. Here, we provide a brief overview of organoids and focus on recent advances in protocols for the generation of pancreatic islet organoids from pancreatic tissue or pluripotent stem cells for insulin secretion. The feasibility and limitations of organoid cultures derived from stem cells for insulin production will be described. As the pancreas and gut share the same embryological origin and produce insulin, we will also discuss the possible application of gut organoids for diabetes therapy. Better understanding of the challenges associated with the current protocols for organoid culture facilitates development of scalable organoid cultures for applications in biomedicine.
Glutathione production was carried out using mixed cells of E. coli TG1/pDG7 $\alpha$ and bakers yeast in an Aerated Slurry Bioreactor. Glutathione-producing enzymes were stable for 34 hours, yielding 4.6 mM glutathione in suspension reaction. Glutahione production with high density mixed cells was studied as a function of flow rate in an Aereated Slurry Bioreactor. Glutathione concentration was higher than that in suspension reaction for 32 hours at the substrate feeding rate of 5.2 mL/hr with cell recycle in continuous Aerated Slurry Bioreactor. It was for 42 hours at 2.6 mL/hr and 22 hours at 5.2 mL/hr without cell recycle. Glutahione productivity was 25.7 mg/g wet $cell{\cdot}hr$ at the substrate feeding rate of 10.4 mL/hr with cell recycle, but 5.28 mg/g wet $cell{\cdot}hr$ at 5.2 mL/hr and 1.65 mg/g wet $cell{\cdot}hr$ at 2.6 mL/hr without cell recycle. Effective production time increased from 25 to 45 hours, by using a surfactant, tween 80. As a purfing gas, nitrogen was tested instead of air to avoid a possible oxidizing effect on glutathione-producing enzymes, resulting in the increase of effective production time to 40 hours.
The optimization of culture conditions for the bacterium Pseudomonas aeruginosa BYK-2 KCTC 18012P, was performed to increase its rhamnolipid production. The optimum level for carbon, nitrogen sources, temperature and pH, for rhamnolipid production in a flask, were identified as 25 g/L fish oil, 0.01% (w/v) urea, 25 and pH 7.0, respectively. Optimum conditions for batch culture, using a 7-L jar fermentor, were 200 rpm of agitation speed and a 2.0 L/min aeration rate. Under the optimum conditions, on fish oil for 216 h, the final cell and rhamnolipid concentrations were 5.3 g/L and 17.0 g/L respectively. Fed-batch fermentation, with different feeding conditions, was carried out in order to increase, cell growth and rhamnolipid production by the Pseudomonas aeruginosa, BYK-2 KCTC 18012P. When 2.5 g of fish oil and 100 mL basal salts medium, containing 0.01 % (w/v) urea, were fed intermittently during the fermentation, the final cell and rhamnolipid concentrations at 264 h, were 6.1 and 22.7 g/L respectively. The fed-batch culture resulted in a 1.2-fold increase in the dry cell mass and a 1.3-fold increase in rhamnolipid production, compared to the production of the batch culture. The rhamnolipid production-substrate conversion factor (0.75 g/g) was higher than that of the batch culture (0.68 g/g).
Kim, Kwang-Hyuk;Kim, So-Hee;Rhee, Sook-Hee;Park, Kun-Young
Preventive Nutrition and Food Science
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v.3
no.3
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pp.282-286
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1998
To determine the immune effect of kimchi extracts in mice, 0.5mg/day of the extracts from kimchis, which were prepared with conventionally (general kimchi)and organically(organic kimchi) cultivated ingredients, were treated orally to male BALB/c mice. Following 1, 3 and 5 weeks of treatment , the Interleukin-2(IL-2) production in the presence (con-A-stimulated )or the absence(spontaneous)of con A 95 $\mu\textrm{g}$/ml) and the natural killer cell (NK) activity of the splenocytes were measured. The IL-2 production in most of treatments with methanol extract from general kimchi were significantly higher than those of control(p<0.05).And at the 3 weeks of treatment, the spontaneous or con A-stimulated IL-2 productions from splenocytes of mice treated with it increased more than those of control group, by 2.8 and 2.2 times, respectively. However, the longer the treatment with methanol extracts from organic kimchi showed the higher the enhancing effect on the IL-2 production. The spontaneous or con A-stimulatdIL-2 productions form splenocytes of mice treated with dicholoromethyane fraction from general kimchi also increased at 5 weeks of treatment compared to those of control group, by 2.7 and 2.5 times, respectively. The natural killer cell activity of splenocytes from mice treated with methano lextracts from general kimchi for 1 ~5 weeks significantly higher than that of control goup (p<0.01). The effect of methano extracts from general kimchi was the highest at 3 weeks of treatment, as same as in the IL-2 production. The enhancing effect of methano extracts from organic kimchi on the NK cell activity was the highest at 5 weeks of treatment . The NK cell activity of splenocytes from mice treated with dichloromethane fraction from general kimchi for 5 weeks was significantly higher than those in control and 3 weeks of treatment. These results showed that the effects of kimchi extracts on the IL-2 production and the NK cell activity in mice were profound in long term of treatment (3 and 5 weeks than 1 week) . We suggest that kimchi extracts might have an immune effect in part due to its enhancing action on the IL-2 production and the NK cell activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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