Proteases are one of the most abundant classes of enzymes in living organisms and have been considered major targets for drug development. However, despite the ability to specifically cleave their substrates, many attempts to assay protease activity have generally relied upon the use of gel zymography or fluorophore-labeled peptide substrates, which is limited in rapid and multiplex analysis. Here we review the recent advances in nanoparticle (NP)-utilized assays of protease activity focused on in vitro and cell imaging-based approaches. Owing to large surface area and unprecedented physical properties of NPs, these approaches are anticipated to facilitate many applications related to protease activity-based disease diagnosis and drug discovery.
Molecular imaging with targeted contrast agents enables tissues to be distinguished by detecting specific cell-surface receptors. In the present study, a ligand-targeted acoustic nanoparticle system is used to identify angioplasty-induced expression of tissue factor by smooth muscle cell within carotid arteries. Pig carotid arteries were overstretched with balloon catheters, treated with tissue factor-targeted or a control nanoparticle system, and imaged with intravascular ultrasound before and after treatment. Tissue factor-targeted emulsion bound and increased the echogenicity and gray-scale levels of overstretched smooth muscle cell within the tunica media, versus no change in contralateral control arteries. Expression of stretch-induced tissue factor in carotid artery media was confirmed by immunohistochemistry. The potential for abnormal thrombogenicity of balloon-injured arteries, as reflected by smooth muscle expression of tissue factor, was imaged using a novel, targeted, nanoparticulate ultrasonic contrast agent.
We have developed a fluorescence optical detection system using a digital micromirror device (DMD) for monitoring 3D cell culture matrices in situ. Full 3D imaging with fast scanning speed was implemented by the combined action of a DMD and a motorized stage. Imaging results with fluorescent microbeads measure the minimum axial resolution of the system as $6.3{\mu}m$, while full 1-mm scanning through 3D alginate-based matrix was demonstrated. For cell imaging, improved images were obtained by removing background fluorescence although the scanning distance was reduced because of low intracellular fluorescence efficiency. The system is expected to be useful to study various dynamics and behaviors of 3-dimensionally cultured cells in microfluidic systems.
Non-Hodgkin's lymphomas are a group of highly diverse malignancies and have a strong tendency to affect organs and tissues that do not ordinarily contain lymphoid cells. Primary extra nodal lymphoma of the hard palate is rare. Here, we present a case of diffuse large B cell lymphoma in a 60-year-old male patient that manifested as slightly painful ulcerated growth on the edentulous right maxillary alveolar ridge extending onto the palate, closely resembling carcinoma of the alveolar ridge. Computed tomography images showed the involvement of the maxillary sinus and right nasal cavity, along with destruction of hard palate, superiorly extending into the orbit. This case report highlights the importance of imaging to evaluate the exact extent of such large malignant lesions, which is essential for treatment planning.
By considering the biological properties of a tumor, it should be possible to realize better results in cancer therapy. PET imaging offers the opportunity to measure tumor growth non-invasively and repeatedly as an early assessment of response to cancer therapy. Measuring cellular growth instead of energy metabolism showed offer significant advantages in evaluating therapy. Thymidine and its derivative nucleoside compounds can be changed to mono, di- and tri- phosphate compounds by thymidine kinase and then be incorporated into DNA. Their bindings are increased in highly proliferating cells due to the high DNA synthesis rate. To evaluate cell proliferation, many kinds of thymidine and uridine derivatives have been labeled with positron emitter and radioactive iodine. Compared to radiopharmaceuticals which have radioisotope labeled base ring such as pyirmidine, the radiopharmacuticals which have radioisotope labeled sugar ring are more stable in vivo and have metabolic resistance. The biological properties such as DNA incorporation ratios are highly dependent on their chemical structures and metabolic processes. This overview describes synthesis of radiopharmaceuticals and their biological properties for imaging of tumor cell proliferation.
Park, Sun Hwa;Kim, Ami;An, Jieun;Cho, Hyun Sung;Kang, Tong Mook
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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v.24
no.6
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pp.529-543
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2020
In contrast to ventricular myocytes, the structural and functional importance of atrial transverse tubules (T-tubules) is not fully understood. Therefore, we investigated the ultrastructure of T-tubules of living rat atrial myocytes in comparison with ventricular myocytes. Nanoscale cell surface imaging by scanning ion conductance microscopy (SICM) was accompanied by confocal imaging of intracellular T-tubule network, and the effect of removal of T-tubules on atrial excitation-contraction coupling (EC-coupling) was observed. By SICM imaging, we classified atrial cell surface into 4 subtypes. About 38% of atrial myocytes had smooth cell surface with no clear T-tubule openings and intracellular T-tubules (smooth-type). In 33% of cells, we found a novel membrane nanostructure running in the direction of cell length and named it 'longitudinal fissures' (LFs-type). Interestingly, T-tubule openings were often found inside the LFs. About 17% of atrial cells resembled ventricular myocytes, but they had smaller T-tubule openings and a lower Z-groove ratio than the ventricle (ventricular-type). The remaining 12% of cells showed a mixed structure of each subtype (mixed-type). The LFs-, ventricular-, and mixed-type had an appreciable amount of reticular form of intracellular T-tubules. Formamide-induced detubulation effectively removed atrial T-tubules, which was confirmed by both confocal images and decreased cell capacitance. However, the LFs remained intact after detubulation. Detubulation reduced action potential duration and L-type Ca2+ channel (LTCC) density, and prolonged relaxation time of the myocytes. Taken together, we observed heterogeneity of rat atrial T-tubules and membranous ultrastructure, and the alteration of atrial EC-coupling by disruption of T-tubules.
Lee, So-Yeong;Jang, Soo-Hwa;Cho, Myung-Haing;Kim, Young-Min;Cho, Keun-Chang;Ryu, Pan Dong;Gong, Myoung-Seon;Joo, Sang-Woo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.9
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pp.904-910
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2009
The development of effective cellular imaging requires a specific labeling method for targeting, tracking, and monitoring cellular/molecular events in the living organism. For this purpose, we studied the cellular uptake of isocyanide-functionalized silver and gold nanoparticles by surface-enhanced Raman scattering (SERS). Inside a single mammalian cell, we could monitor the intracellular behavior of such nanoparticles by measuring the SERS spectra. The NC stretching band appeared clearly at ${\sim}2,100cm^{-1}$ in the well-isolated spectral region from many organic constituents between 300 and 1,700 or 2,800 and $3,600cm^{-1}$. The SERS marker band at ${\sim}2,100cm^{-1}$ could be used to judge the location of the isocyanide-functionalized nanoparticles inside the cell without much spectral interference from other cellular constituents. Our results demonstrate that isocyanide-modified silver or gold nanoparticle-based SERS may have high potential for monitoring and imaging the biological processes at the single cell level.
Farag, Amina Fouad;Abou-Alnour, Dalia Ali;Abu-Taleb, Noha Saleh
Imaging Science in Dentistry
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v.48
no.4
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pp.233-244
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2018
Purpose: Oral carcinoma cuniculatum is a rare well-differentiated variant of oral squamous cell carcinoma. The purpose was to systematically review its unique features to differentiate it from other variants as verrucous carcinoma, papillary squamous cell carcinoma and well-differentiated squamous cell carcinoma. Materials and Methods: A systematic review was performed using MEDLINE, Dentistry and Oral Sciences Source and PubMed databases and any existing articles related to the research subject missed in the search strategy to screen ones reporting cases occurring exclusively in the oral cavity in English literature. Variables analyzed included clinical, etiologic, imaging, histopatholgical features, treatment, follow-up and survival rates. Results: From 229 hits, 17 articles with 43 cases were included in the systematic review. Clinically it showed a female predilection with pain and/or ulceration of a relatively long duration and exudation being the most common symptoms. Histologically, it showed more endophytic features comprising well-differentiated squamous epithelium with absent or minimal cytological atypia and multiple keratin filled crypts or cuniculus. Inflammatory stromal reaction and discharging abscesses were reported in most of the cases. Bone destruction was predominant in most imaging features. Complete surgical resection with a safety margin was the treatment of choice in most of the cases with few recorded recurrence cases. Conclusion: Apprehensive knowledge of oral carcinoma cuniculatum unique features is essential to avoid its misdiagnosis and provide proper treatment especially for recurrent cases.
Kang, Kyeung Jun;Ko, In Ok;Park, Ji-Ae;Kim, Jung Young
Journal of Radiopharmaceuticals and Molecular Probes
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v.5
no.1
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pp.61-68
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2019
Purine type compounds has been recently reported to cause the death for lung cancer cell, related to microtubules-targeting agents (MTAs). Therefore it can be used to develop as theranostic radiopharmceuticals in nuclear medicine or gadolinium-based MRI imaging agents by chelate chemistry. In the study, we tried to chemically bind a DOTA chelate on the end of purine compound and obtained a specific conjugate of DOTA-purine for metal coordination. In particular, radiometal like Cu-64, for the development of MRI imaging agents, can be utilized to choice good candidates before the synthesis of gadolinium complexes. By the screening of radioisotope technique, Gd-DOTA-purine type complex was successfully prepared and showed MRI imaging for lung cancer cell into the mouse model.
Recent progress in the development of non-invasive imaging technologies continues to strengthen the role of molecular imaging biological research. These tools have been validated recently in variety of research models, and have been shown to provide continuous quantitative monitoring of the location(s), magnitude, and time-variation of gene expression. This article reviews the principles, characteristics, categories and the use of radionuclide reporter gene imaging technologies as they have been used in imaging cell trafficking, imaging gene therapy, imaging endogenous gene expression and imaging molecular interactions. The studios published to date demonstrate that reporter gene imaging technologies will help to accelerate pre-clinical model validation as well as allow for clinical monitoring of human diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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