KIM, SU-JIN;GEUN-JOONG KIM;DON-HEE PARK;YEON-WOO RYU
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제13권2호
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pp.175-181
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2003
The production of a carotenoid astaxanthin, a growth-associated principal pigment, is limited in a batch cultivation, because a high glucose concentration severely inhibits the cell growth and also influences the carotenoid production. Therefore, a fermentation strategy including effective chemicals for the high-level production of cells and astaxanthin by a mutant strain Phaffia rhodozyma AJ-6-1 was developed in a fed-batch culture. First, a production medium for maximizing the cell and astaxanthin yields was formulated and optimized. Using this optimized medium, the highest cell and astaxanthin concentrations obtained were about 38.25 g/1 and 34.77 mg/1, respectively. In addition, an attempt was made to increase the amount of astaxanthin using effective chemicals such as ethanol and acetic acid, which are known at an inducer and/or precursor of carotenoid synthesis. When either 10g/1 ethanol or 5 g/1 acetic acid was added to investigate the resulting astaxanthin content, a relatively high astaxanthin concentration or 45.62 mg/l and 43.87 mg/1, respectively, was obtained, and the cell concentrations also increased slightly under these conditions. Therefore, these results imply that a fed-batch culture of the mutant strain P. rhodozyma AJ-6-1 could be effectively employed in the commercial production of astaxanthin, although the factors affecting the productivity remain to be elucidated.
Studies were made to elucidate the cell growth and the production of camptothecin and its derivatives in cell cultures of Camptotheca acuminata. High resolution HPLC chromatograms to analyze camptothecin and 10-hydroxycamptothecin in lactone and carboxylate forms were obtained with a fluorescence detector. Calli inductions were optimized with the young stem of explant on Schenk and Hildebrandt (SH) medium supplemented with 5 mg/l $\alpha$-naphthaleneacetic acid (NAA), 0.2 mg/l 6-benzylamino purine (BAP), 2.0% sucrose, and 0.5% agar. The hybrid medium, a mixture of SH and Murashige and Skoog (MS) salts, was developed for homogeneous suspension cultures without large cell aggregates. The optimum phytohormone concentrations for successful suspension cultures were 1.0mg/l of 2,4-D and 0.5 mg/l of kinetin. The highest growth in suspension cultures was observed when 49.7% (w/w) of the cells was composed of small aggregates which were below 0.1 mm in diameter. Time course changes of cell growth and camptothecin production showed that camptothecin accumulation was started at the end of the growth phase and the maximum content was obtained 10 days after inoculation. Yeast extract elicitor increased camptothecin accumulation 4 times. Methyl jasmonate and jasmonic acid also increased camptothecin production 6 and 11 times, respectively.
주목 (Taxus cuspidata) 세포배양을 이용하여 modified B5 배지중의 질소원, 인산 그리고 세포 고정화가 세포생장과 taxol 생산에 미치는 영향을 살펴보았다. Nitrate와 ammonium의 비는 세포생장 및 taxol 생산에 있어 중요한 인자임을 알수 있었고 비값이 1인 경우는 modified B5 배지 조성중 원래 비값인 20에 비해 taxol 생산을 10배나 증가시켰다. 인산의 농도를 감소시킨 경우 세포생장은 저하되었지만 taxol 생산은 현저하게 증가하였다. 고정화세포는 ${\sim}120\;g/l$의 taxol을 생산하였다.
To establish an in vitro mass production system of grape anthocyanin pigments through callus and cell suspension culture, the effects of nitrogen source and sucrose on fresh weight and anthocyanin production in cell suspension culture of 'Sheridan' grape level were studied. When the medium was devoid of $NO_3^-$, cell fresh weight was either remained stable (1% sucrose) or slightly decreased with culture time (2,3, and 4% sucrose). When $NH_4^-$ was lacking, 3% sucrose was most favorable for cell growth. When $NH_4^-$ was supplied as N source, the anthocyanin content of 2% sucrose containing medium was maintained 2 times higher than other levels till day 8 in culture, then that of 3 and 4% sucrose which peaked at day 12 thereafter. The anthocyanin content was low than $NO_3^-$-free media. Total anthocyanin content in $NH_4^-$-free medium was just about a half of that of $NH_4^+$ medium. Anthocyanin production of 2% sucrose in $NH_4^+$ medium was maintained about 3-fold till day 8, then decreased thereafter. In $NH_4^+$ medium, pH decreased gradually with final pH of 3.5 to 4.0, while pH in $NH_4^+$-free medium increased with final pH of 6.5 to 7.5.
CHO 세포를 0.5%, 1 %. 2%, 3%, 4% 및 5% 놓도의 FBSd를 함유한 MEMa 배지에 $1{\times}10^4cells/\textrm{cm}^2 와 2{\times}10^4cells/\textrm{cm}^2$의 초기 농도로 정치배양하여 세포 성장과 EPO 생산 특성을 조사하였다. 혈청 농도와 접종 농도를 증가시킴에 따라 세포 증식 속도와 최대 세포 농도가 증가하는 경향을 보였으며, 적절한 혈청 농도의 선택이 세포 성장의 최적화에 필 요하다고 할 수 있다. 세포 성장 도중에 무혈청배지로 교환한 결과 세포 성장과 EPO 생산이 증가되었다. 배지를 교환하지 않았을 경우 세포 성장이 최대 ($2.1{\times}10^5cells/\textrm{cm}^2$)에 도달된 후 급격히 세포농도가 감소하는 높은 사멸율을 보이고, EPO의 최대 농도 도 2,380units/mL에 불과하였으나, 무혈청배지로 교환한 배양에서는 세포 성장이 크게 증가하여 $6.2{\times}105cells/$\textrm{cm}^2$의 최대 세포농도와 7,470units/mL 의 EPO 농도를 얻었다. 따라서 CHO 세포 성장과 E EPO 생산과는 상호 연관이 있으며, 세포배양으로 EPO 생산을 극대화하기 위해서는 CHO 세포의 고 농도 배양이 필요하다고 할 수 있다.
Various pesticides known or suspected to interfere with steroid hormone function were screened toy effects in leydig cells on catalytic activity and mRNA expression of aromatase. Dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) is a widespread environmental pollutant. In this study, we investigated the effect of DDT on testosterone production through aromatase activity and its molecular mechanism in testicular leydig cell, R2C by using radioimmunoassay (RIA). As the results, the potent leydig: cell activator LH increased testosterone production compared to the control. DDT exposure significantly decreased testosterone production in R2C cell. In addition, DDT was found to increase aromatase gene expression and activity in R2C cell in a dose dependent manner. In order to assess whether the suppressive effects of DDT on LH-inducible testosterone (T) production might be influenced by the ER, ICI 182.780 was used, and it was found that these inhibitory effects of DDT were antagonized by ICI 182.780, implying that the estrogen receptor (ER) mediates the suppressive effects of DDT. Furthermore, the inducible effects of DDT on aromatase gene expression might be influenced by the ER, ICI 182.780 was used, and it was found that these enhancing effects of DDT were antagonized by ICI 182.780, implying that the ER mediates the inducible effects of DDT. Our results indicated that DDT inhibition of luteinizing hormone (LH) -inducible T production in R2C cell is mediated through aromatase. However, the precise mechanisms by which DDT enhance in R2C cell remains unknown. The current study suggests the possibility that DDT might act as a modulator aromatase gene transcription.
Kim, Min-Soo;Lee, Won-Kyu;Kim, Hwa-Young;Kim, Chul;Ryu, Yeon-Woo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제8권3호
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pp.237-244
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1998
A study was carried out to elucidate the relation between the production of flavonol glycosides and the change of phenylalanine ammonia-lyase activity in cell suspension cultures of Ginkgo biloba by the unassisted and synergistic effects of various factors. The quercetin production showed a mixed-growth-associated pattern in cell suspension cultures. Fluorescent light and UV radiation increased phenylalanine ammonia-lyase (PAL) activity, and resulted in the increase of the production of quercetin and kaempferol ten- and four-fold, respectively, as compared to that obtained in the normal culture condition. The cell growth of Ginkgo biloba was enhanced .at higher temperatures whereas the quercetin production was at its maximum at low temperatures. Moreover, the quercetin production was increased by temperature change during the culture period. In particular, the quercetin production was at the highest level when the culture temperature was elevated from $10^{\circ}C\;to\;30^{\circ}C$. The addition of phenylalanine as a precursor in the culture medium stimulated an 8-fold increase in the production of quercetin; the addition of naringenin caused a l0-fold increase. The quercetin production was also greatly increased by feeding enzyme cofactors such as 2-ketoglutarate and ascorbic acid in the culture medium, but specific PAL activity was not increased except with phenylalanine feeding. The synergistic effect of UV radiation and naringenin feeding was observed, resulting in the increase of flavonol glycoside production at a rate higher than in any other case investigated.
When reserpine-producing cell strains of Rauwolfia serpentina were transferred from the dark to the light irradiation, the production of reserpine was extremely enhanced whereas the cell growth was suppressed. In an incubation period of 20 days, the most effective culture condition for reserpine production was the combination of 8 days of dark culture and following 12 days of light culture. The time courses of both cell growth and reserpine production were measured in vitro in order to clarify the effect of wave length range of light on the biosynthesis of reserpine. Although the growth of cultured cells which had been incubated under continuous red, yellow, and green lights, respectively, was similar to that of the cultured cells subcultured in the dark. The cells cultured under red light irradiation produced less reserpine than dark-grown cultures. Both blue and near-ultraviolet light inhibited the growth of cultured cells. The production of reserpine was strikingly enhanced by blue light, but was strongly inhibited by near-ultraviolet light.
The application of renewable energy in electric power systems is growing rapidly in order to make provision for the inequality of the climate, the dwindling supplies of coal, oil and natural gas and a further rise in oil prices. Solar cell generators(SCG) is one of the fastest growing renewable energy. This paper presents a methodology on probabilistic production cost simulation of a power system including SCGs. The generated power by SCGs is variable due to the random variation of solar radiation. In order to solve this problem, the SCGs is modeled as multi-state operational model in this paper. Probabilistic production cost of a power system can be calculated by proposed method considering SCGs with multi-state. The results show that the impacts of SCGs added to a power system can be analyzed in view point of production cost using the proposed method.
Phaffia rhodozyma is the most promising microbial source of astaxanthin production, though wild-type strains are needed to increase the astaxanthin content for commercial production. To increase astaxanthin content for commercial production, a mutant strain of P. rhodozyma was selected and culture conditions of the mutant selected were optimized. P. rhodozyma was treated with mutagenic agent such as NTG, acriflavine, and UV in serial order and carotenoids hyper-producing mutant strain was selected based on the capabilities of cell growth on the agar plate containing chemical inhibitors and carotenoids production. Among the mutants tested, a mutant WS-2 was finally selected. Mutant WS-2 produced 1.26mg carotenoids/g-dry cell weight and this value was about- 4-folds higher than that of wild-type. The optimum culture conditions were $24^{\circ}C$ of temperature, 1.5vvm of aeration and 300rpm of agitation. In the optimized condition, cell and carotenoids concentrations were 7.62g/l and 14.9mg/l, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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