The resting cells of Candida sp. SY16 produced a large amount of mannosylerythritol lipid as a biosurfactant when incubated in the distilled water containing only the carbon source. The resting cells exhibited the highest production at 20 g cells per liter on the soybean oil of 75 g/1 as a sole substrate and pH 4∼5 in the shaking culture. Under the optimal conditions, the biosurfactant was extracellularly produced to 58 g/1 after 120 h in jar fermentor, and the yield became higher than that obtained by using the glowing cells of the strain in batch fermentation.
In order to ferment D-xylose directly to ethanol, Yeasts capable of utilizing D-xylose as a sole carbon source and energy source were isolated from soil, sawdust and rotten woods. Among them, the yeast strain, which showed the best ability to produce ethanol, was identified as Candida sp. L-16 isolated from rotten woods. The optimal conditions for production of ethanol were 60rpm of agitation speed, 28j.deg.C of temperature, 4.5 of initial pH and 5% of D-xylose concentration. Ethanol production was reached to maximum state for 4 days culture. Under these optimal conditions, the maximum ethanol concentration and theoretical ethanol yield were 2.4%(v/v) and 74.4% of theoretical value, respectively.
The D-xylulokinase from Candida sp. L-16 was purified through a sequence of ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose chromatography, Sephadex G-100 and Sephadex G-200 gel filtration. The specific activity of the purified Dxylulokinase was increased to 23.2 fold and the yield was 11.2%. The enzyme was showed to be a single protein band by SDS-PAGE. The molecular weight of the enzyme was 150,000 dalton, this enzyme was identified to be a dimer with two subunits. The optimum conditions of the enzyme were pH 8.0 and 40$\^{C}$, respectively. The enzyme was relatively stable between pH 7.0 to pH 9.0, but it was unstable over 30$\^{C}$. The enzyme showed substrate specificity on D-xylulose, D-arabinose and D-ribose, Km value and Vmax for D-xylulose were 0.042 mM and 117 units/ml, respectively. The activation energy of the enzyme was 4.75 Kcal/mol. The one was inhibited by metabolic intermediates such as 6-phosphogluconic acid, 2-keto-gluconic acid. The enzyme was activated by EDTA and thiol compounds such as cysteine-HCI, DTT and glutathione.
Although there are no oil wells in Korea, yet more than 900 strains of petroleum hydrocarbon utilizing microorganisms have been isolated from 357 soil and sewage samples collected from oil depots and other sources there. From these samples 7 strains of yeast were selected on the basis of their superior cell yields. Five of them were identified as Candida tropicalis, the other being Candida lipolitica and Torulopis sp. Of the selected strains the mass doubling time is $2.9{\sim}4.5$ hrs., the yield is $6.5{\sim}16.3\;g/l$; the conversion rate of crude petroleum substrate into the microbial mass is $7.8{\sim}19.3%$; and protein content of dried cells is $48.8{\sim}59.8%$.
The actinomycete strain AMLK-335 was antagonistic to vancomycin-resistant enterococci (VRE). Based on the diaminopimelic acid (DAP) type, and morphological and physiological characteristics revealed by scanning electron microscopy (SEM), AMLK-335 was confirmed to belong to the genus Streptomyces. Analysis of the 16S rDNA nucleotide sequences found AMLK-335 to have a relationship with Streptomyces platensis. The production of antibiotic from this strain was most favorable when cultured on glucose, polypeptone, yeast extract (PY) medium for 6 days at $27^{\circ}$. The antibiotic was identified as cyclo(L-phenylalanyl-L-prolyl) by comparing ti with the reported MS and NMR spectral data. Cyclo(phe-pro) from the PY cultures of AMLK-335 was most effective (K-98-258). Futhermore, cyclo(phe-pro) had antimicrobial activity against Bacillus subtilis, Microcuccs luteus, Staphylococcus aureus, and Saccharomyces cerevisiae, but it wa ineffective against Candida albicans, Streptomyces murinus, and Aspergillus niger.
To develop natural antimicrobial substances from Theaceae, Schima wallichii subsp. liukiuensis was selected from 218 woody plants, and antimicrobial compounds against bacteria, fungi, and yeast were isolated. The antimicrobial activity of ethanol extracts proved higher than those of other organic solvents. The antimicrobial activity of S. liukiuensis extract showed no differences in sesonal variation, but, that of plant part was high in bark at autumn. An antimicrobial substance was isolated from the extract of Schima using column chromatography packed with silica gel and sephadex LH-20, and then a purified antimicrobial substance (Compound I) was obtained using HPLC analysis. The Compound I in the analysis of UV, IR, and GC-MS presumed a triterpene or steroidal saponin, ${\alpha}$-sitisterol as aglycon combined three sugars. The minimal inhibitory concentration (MIC) of the Compound I against a bacteria, fungi, and yeast were 1.25 g/L, 5.0 g/L, and 0.040 g/L, respectively. This is much lower than the MIC of hinokitiol, an natural antimicrobial compound used commercially, which suggests that Compound I could be developed as a natural preservative and pharmaceuticals.
LEE HAN-KI;LEE IN-HYE;YIM JEE-SUN;KIM YONG-HO;LEE SANG-HEE;LEE KISAY;KOO YOON-MO;KIM SANG-JIN;JEONG BYEONG-CHUL
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.4
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pp.734-739
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2005
Myxobacterium sp. HK1, isolated from Korean soil, degrades cellulose, differentiates to fruiting body, and its 16s rDNA has $95\%$ similarity to Polyangium sp. An anticancer molecule, CDMHK, was identified from culture broth of Myxobacterium sp. HK1, and purified by Diaion HP20, Silica gel, Sephadex LH-20 chromatography, and preparative HPLC using an YMC OSD-A C18 column. The molecular structure and formula were determined to be $C_{l2}H_{l9}N_3O_2$ (M.W 237) by MS spectrometry, 300 MHz $^{1}H\;and\;^{13}C$ NMR. The CDMHK was not active against Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Candida albicans. However, this molecule inhibited the growth of various cancer cell lines. The $ED_{50}$ values of CDMHK were determined to be 0.147, 0.086, 0.18, 0.166, and 0.142 $\mu$g/ml against A549, SK-OV-3, SK-MEL-2, VF498, and HCTl5 cancer cell lines, respectively. In addition, the CDMHK was able to induce apoptosis of the CCRF-CEM cancer cell line, evidenced by DNA fragmentation assay and DAPI staining.
An endospore-forming, rod-shaped bacterium was isolated from forest soil samples collected at the Taebaek mountain of Gangwon province, Korea, and taxonomically characterized by physiological, biochemical and phylogenetic methods. Its 16S rRNA sequences showed the maximum similarity of 97% with B. amyloliquefaciens. In addition, the isolate BCNU 2002 was determined to have the ability to produce enzymes such as amylase, protease, gelatinase and catalase. The in vitro antifungal activity of Bacillus sp. BCNU 2002 was also examined against human pathogenic fungi such as Aspergillus niger, Candida albicans, Epidermophyton floccosum, Saccharomyces cerevisiae, Trichophyton mentagrophytes and Trichophyton rubrum. A maximum production level of antifungal substances of Bacillus sp. BCNU 2002 was achieved under aerobic incubation at $28^{\circ}C$ for 7 days in LB broth. BCNU 2002 showed strong antifungal activities against T. mentagrophytes and T. rubrum with the range of percentage inhibition from 56.25 to 63.23%. It was also confirmed that ethylacetate extract of cultured broth showed a strong antifungal activity against A. niger, C. albicans, S. cerevisiae and T. rubrum by agar diffusion method. The peptide fraction also exhibited broad antifungal spectrum against various pathogenic fungi. The minimum inhibitory concentration values for active extracts ranged between 125 ${\mu}g$/mL and 1000 ${\mu}g$/mL.
The Actinomycete strain KH29 is antagonistic to the multidrug-resistant Acinetobacter baumannii. Based on the diaminopimelic acid (DAP) type, and the morphological and physiological characteristics observed through the use of scanning electron microscopy (SEM), KH29 was confirmed as belonging to the genus Streptomyces. By way of its noted 16S rDNA nucleotide sequences, KH29 was found to have a relationship with Streptomyces cinnamonensis. The production of an antibiotic from this strain was found to be most favorable when cultured with glucose, polypeptone, and yeast extract (PY) medium for 6 days at $27^{\circ}C$. The antibiotic produced was identified, through comparisons with reported spectral data including MS and NMR as a cyclo(L-tryptophanyl-L-tryptophanyl). Cyclo(L-Trp-L-Trp), from the PY cultures of KH29, was seen to be highly effective against 41 of 49 multidrug-resistant Acinetobacter baumannii. Furthermore, cyclo(L-Trp-L-Trp) had antimicrobial activity against Bacillus subtilis, Micrococcus luteus, Staphylococcus aureus, Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus niger, and Candida albicans, However, it was ineffective against Streptomyces murinus.
Ethanol productivity of a xylose fermenting yeast (Candida sp. X-6-4l) isolated from soil was investigated in laboratory scale using Erlenmeyer flask and mini-jar tormentor. The optimal conditions of xylose fermentation in flask experiment were pH 4, asparagine as nitrogen source, xylose 20g/$\ell$, and in these condition, ethanol yield was about 80% to theoretical yield. Using mini-jar fermentor containing 5% total sugar with 2.5% xylose and 2.5% glucose, we obtained 2.3%(v/ v) ethanol and the corresponding efficiency was 72.3% of total sugar. In this case, the consumming speed of sugar under aerobic condition was faster than that of anaerobic condition, and glucose was used previously to xylose. The optimum concentration of xylose for ethanol fermentation in mini-jar fer-mentor scale was 5%, and the efficiency was 69% of total sugar(Alc.2.2% v/v).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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