본 연구는 식품 샘플에서 단시간 내에 간단한 방법으로 Campylobacter jejuni를 검출하기 위하여 10가지의 Campylobacter genus-specific primer와 C. jejuni species-specific oligonucleotide를 제작하였고, amplification efficiency test를 통하여 4종으로 축소한 후 다시 specificity, sensitivity analysis를 통하여 최종적으로 CB4, CJ1 2종의 oligonucleotide primer를 선별하였다. 선별된 oligonucleotide primer는 각각 Campylobacter genus specific, Campylobacter jejuni에 대한 species specific한 특성을 지닌다. 또한, sensitivity analysis를 통하여 isolated colony에서 reaction tube당 $10^0{\sim}10^1$까지의 detection limit을 확보하였다. 육류 시료에서는 Sensitivity가 $10^1{\sim}10^2$으로 떨어지는 양상을 보였으며, 이는 쇠고기나 돼지고기에 존재하는 hemoglobin이나 immunoglobulin 등의 PCR inhibitor의 영향에 의한 것으로 추정된다.
Campylobacter species are known to the high optimum growth temperature ($42^{\circ}C$) and the cause of enteritis in people. Erythromycin has a curative effect for enteritis caused by the bacteria. However, the rate of erythromycin-resistant bacteria was not well known until recently in Korea. Swine are one of sources of the infection with a Campylobacter species which cause the symptom of a high temperature. In this study, we cultured rectum fecal specimens of 100 pigs in an area of Buan-gun, Jeonbuk Province during July 2009. As a result, the detection rate of C. jejuni and C. coli and the rate of erythromycin-resistant bacteria for the separated Campylobacter species on the condition of high temperature were investigated. The possession or not of hipO and glyA gene and ciprofloxacin-resistant gene gyrA was also reviewed with biochemical characteristics and PCR.
Purpose: Community-acquired bacterial enteritis (CABE) is a common problem in developed countries. It is important to understand the epidemiologic changes in bacterial pathogens for prevention and treatment. Therefore, we studied the epidemiologic changes in CABE in Korean children. Methods: A total of 197 hospitalized pediatric patients aged <19 years that presented with dysentery symptoms and showed positive polymerase chain reaction results for bacterial species in stool samples, were enrolled in this study for 10 years (June 2010 to June 2020). We classified patients in phase I (06, 2010-06, 2015) and phase II (07, 2015-06, 2020) and analyzed their epidemiologic and clinical characteristics. Results: The most common pathogens were Campylobacter species (42.6%) and Salmonella species were the second most common pathogens (23.9%). The abundance of pathogens decreased in the following order: Clostridium difficile (9.6%), Shigella (5.6%), and Clostridium perfringens (5.6%). Escherichia coli O157:H7 was found to be the rarest pathogen (2.0%). Campylobacter species showed an increase in the infection rate from 32.1% in phase I to 49.6% in phase II (p=0.0011). Shigella species showed a decline in the infection rate in phase I from 14.1% to 0.0% in phase II (p<0.001). C. difficile and C. perfringens showed an increase in infection rate in phase II compared to phase I, but the difference was not statistically significant. Conclusion: The infection rate of Campylobacter species in CABE has been rising more recently, reaching almost 50%. This study may help establish policies for prevention and treatment of CABE in Korean children.
Purpose: Campylobacter species are currently the most common cause of bacterial gastroenteritis. In Lebanon, Campylobacter infection occurrence is underdiagnosed owing to the lack of specific culture and rapid test kits, particularly among children. This study aimed to evaluate the prevalence, laboratory findings, and clinical characteristics of Campylobacter infection in hospitalized children with acute gastroenteritis in South Lebanon. Methods: We conducted a 6-month retrospective cohort study between January and June 2018, including 291 children aged between 1 month and 12 years, who were admitted to a tertiary healthcare center in South Lebanon. The medical files of the patients were reviewed to retrieve the required clinical information, including clinical and laboratory data. Results: The prevalence of campylobacteriosis agents in pediatric patients with acute gastroenteritis is 12.02%. Patients infected with Campylobacter had more severe acute gastroenteritis than Campylobacter-negative patients and often presented with high-grade fever, diarrhea episodes more than six times per day, diarrhea lasting for more than five days, and dehydration. Indeed, children with high-grade fever (≥38.5℃) were five times more likely to test positive for Campylobacter than those with low-grade fever. In addition, the results showed a higher Vesikari score for the majority of Campylobacter-positive patients with severe acute gastroenteritis compared to a moderate profile for Campylobacter-negative patients. Conclusion: The present study findings highlight that Campylobacter infection is frequent among children with acute gastroenteritis. Therefore, the detection of Campylobacter should be carried out for the diagnosis of human gastroenteritis in Lebanon, along with the detection of routine enteropathogens.
Using 200 porcine colon tissues, the efficiencies of three isolation methods of Campylobacter from porcine intestines were compared: Method 1, direct streaking of colon mucosa; Method 2, direct inoculation of intestinal contents with a swab; Method 3, inoculation of pre-enriched medium. A total of 460 Campylobacter isolates were obtained from 178 samples (89%) by direct streaking of colon mucosa, 142 samples (71%) by direct streaking of a swab, and 94 samples (47%) by pre-enrichment of intestinal contents in Preston broth. Direct streaking of colon mucosa was superior to the other two isolation methods, in terms of rapidity and higher efficiency. When isolates were identified with various biochemical tests and PCRs specific to 16s rRNA, mapA, and ceuE, C. coli was the predominant species (87%) in porcine, whereas the rest of the isolates were identified as C. lanienae.
Seung-Hwan Hong;Kun-Ho Seo;Sung Ho Yoon;Soo-Ki Kim;Jungwhan Chon
한국축산식품학회지
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제43권1호
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pp.73-84
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2023
Campylobacteriosis is a common cause of gastrointestinal disease. In this study, we suggest a general strategy of applying gold nanoparticles (AuNPs) in colorimetric biosensors to detect Campylobacter in chicken carcass. Polymerase chain reaction (PCR) was utilized for the amplification of the target genes, and the thiolated PCR products were collected. Following the blending of colloid AuNPs with PCR products, the thiol bound to the surface of AuNPs, forming AuNP-PCR products. The PCR products had a sufficient negative charge, which enabled AuNPs to maintain a dispersed formation under electrostatic repulsion. This platform presented a color change as AuNPs aggregate. It did not need additional time and optimization of pH for PCR amplicons to adhere to the AuNPs. The specificity of AuNPs of modified primer pairs for mapA from Campylobacter jejuni and ceuE from Campylobacter coli was activated perfectly (C. jejuni, p-value: 0.0085; C. coli, p-value: 0.0239) when compared to Salmonella Enteritidis and Escherichia coli as non-Campylobacter species. Likewise, C. jejuni was successfully detected from artificially contaminated chicken carcass samples. According to the sensitivity test, at least 15 ng/μL of Campylobacter PCR products or 1×103 CFU/mL of cells in the broth was needed for the detection using the optical method.
It is becoming increasingly apparent that periodontitis consists of mixture of diseases, most of which respond favorably to traditional mechanical therapy. Among these variants of the disease, some appear to be associated with unusual microbial infections and defective host defenses. Many of these fail to respond to conventional treatment. The recognition that some forms of periodontitis are refractory to standard periodontal therapy has given rise to a new classification of peridontitis. A series of 1692 subgingival microbial samples sent to a diagnostic microbiology laboratory included 738 samples that could be identified as compatible with a clinical diagnosis of refractory or recurrent periodontitis. In descending order of prevalence the associated microbiota included Bacteroides forsythus(85%) ,Fusobacterium species(78%), Spirochetes(67%), Campylobacter rectus(64%), Porphyromonas gingivalis(59%), Peptostreptococcus micros(58%), motile rods(46%), Prevotella intermedia(33%), Eikenella corrodens(13%), Capnocytophaga species(12%) ,and Actinobacillus actinomycetemcomitans(6%). Antibiotic resistance to tetracycline, penicillin G, or metronidazole was particularly noticeable for Fusobacterium species, Capnocytophaga species, and Actinobacillus actinomycetemcomitans. It was largely absent for Campylobacter rectus. No antibiotic data were obtained for Porphyromonas gingivalis or Bacteroides forsythus, as these species were detected by immunofluorescence. The results indicate that a substantial number of microorganisms associated with refractory periodontitis are variably resistant to commonly-used antibiotics. Diagnostic microbiology must be considered an essential adjunct to the therapist faced with periodontal lesions refractory to conventional treatment.
1996년 3월부터 1998년 10월간에 경남지방의 시판 냉장 및 냉동우육 350건,돈육 338건 및 계육 350건으로부터 최확수법(MPN)을 이용하여 식중독균의 오염수준을 조사하였다. Staphylococcus aureus의 경우 10∼10,000 CFU/8으로 비교적 높은 오염수준은 나타내었고, Salmonella 및 Listeria monocytogenes는 0,9 MPN/g 이하였으며, Campylobacter jejunilcoli는 7.0 MPN/g (cm2)이하였다. 분리된 4종류의 병원세균에 대하여 냉장우육의 14.3%,돈육의 25.3% 및 계육의 55.0%가 1종류에, 그리고 우육 2.7%,돈육 5.6% 및 계육의 14.7%가 2종류에, 돈육의 2.4%가 3종류의 병원세균에 교차오염 되어있었다. 일반적으로 병원세균은 냉장계육에서 보다 냉동 포장계육에서 더 높은 분리 빈도를 나타내었다.
An antimicrobial susceptibility test was conducted to compare the resistance rates among Campylobacter spp. isolates from dogs (n = 50) raised under diverse conditions and humans (n = 50). More than 60% of Campylobacter (C.) jejuni from dogs and humans showed resistance to nalidixic acid, enrofloxacin and ciprofloxacin. C. jejuni isolates from humans showed higher resistance to tetracycline (83.3%) and ampicillin (91.3%) than those from dogs. None of the C. jejuni or Campylobacter coli isolates from humans or dogs were resistant to erythromycin. Overall, 85% of Campylobacter spp. isolates showed a multidrug resistant phenotype. Nucleotide sequencing analysis of the gryA gene showed that 100% of $NA^R/CIP^R$ C. jejuni isolates from dogs and humans had the Thr-$86^{th}$-Ile mutation, which is associated with fluoroquinolone resistance. flaA PCR restriction fragment length polymorphism (RFLP) typing to differentiate the isolates below the species level revealed 12 different clusters out of 73 strains. The human isolates belonged to eight different RFLP clusters, while five clusters contained dog and human isolates.
A total of 145 strains of thermophilic Campylobacter spp. isolated from the fecal specimens of 108 cattle, 120 pigs and 104 chickens. The isolation rates of Campylobacter jejuni from cattle, pigs and chickens were 36.1%, 38.3% and 28.8%, respectively. In the biotyping of 115 strains of C. jejuni, 49.6% were belonged to biotype I, 33.9% biotype II, 10.4% biotype IV and 6.1 % biotype III. Twenty-eight strains of C. coli were 78.6% of biotype I, 21.4% biotype II. Two strains of C. laridis belonged to biotype I and II. One hundred of 105 C. jejuni cultures were typable serologically and represented 13 serogroups Serotype 4, 5, 26, 27 and 36 were encountered most frequently. Eighteen of 23 C. coli cultures were typable serologically and represented 6 serogroups. Serotype 8, 20, 21 and 31 were encountered most frequently. In the comparison of frequency of serotype between animal species, serotypes 4, 30, 5, 26 and 27 were encountered relatively common in the cattle source isolates, serotypes 26 and 36 in the pigs, and 36 and 17 in the chickens. The serotypes of C. coli encountered most frequently were serotype 8 and 31.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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