• Restorative Dentistry and Endodontics
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• 제31권3호
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• pp.153-160
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• 2006

본 연구는 치수조직, 치은, 치주인대로부터 배양된 조직을 SP (Substance P)로 4시간 SP, CGRP (Calcitonin Gene-related Peptide) , Tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$)로 8시간 자극 후 RNase Protection Assay를 시행하고, IL-8의 분비량을 측정해 다음 결과를 얻었다. 1. IL-8 mRNA는 모든세포에서 발현됐다. 2. IL-8 mRNA 발현은 SP ($10^{-5}M$)와 SP ($10^{-8}M$)로 4시간 자극 시 증가되지 않았다. 3. IL-8 mRNA 발현은 SP ($10^{-4}M$)와 CGRP ($10^{-6}M$)로 8시간 자극 시 증가되지 않았다. 4. TNF-$\alpha$ (2 ng/ml) 자극 시, IL-8 mRNA 발현이 증가됐다. 5. 치은 세포를 CGRP ($10^{-6}M$)로 8시간 자극 시, IL-8 분비량이 증가했다 (p<0.05). 6. 치주인대 세포를 SP ($10^{-4}M$)로 8시간 자극 시 IL-8 분비량이 증가했다 (p<0.05).

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제20권1호
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• pp.129-136
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• 2016

This study was performed to investigate whether an intra-articular injection of transient receptor potential vanilloid 1 (TRPV1) receptor agonist, resiniferatoxin (RTX) would alleviate behavioral signs of arthritic pain in a rat model of osteoarthritis (OA). We also sought to determine the effect of RTX treatment on calcitonin gene-related peptide (CGRP) expression in the spinal cord. Knee joint inflammation was induced by intra-articular injection of monosodium iodoacetate (MIA, $8mg/50{\mu}l$) and weight bearing percentage on right and left hindpaws during walking, paw withdrawal threshold to mechanical stimulation, and paw withdrawal latency to heat were measured to evaluate pain behavior. Intra-articular administration of RTX (0.03, 0.003 and 0.0003%) at 2 weeks after the induction of knee joint inflammation significantly improved reduction of weight bearing on the ipsilateral hindlimb and increased paw withdrawal sensitivity to mechanical and heat stimuli. The reduction of pain behavior persisted for 3~10 days according to each behavioral test. The MIA-induced increase in CGRP immunoreactivity in the spinal cord was decreased by RTX treatment in a dose-dependent manner. The present study demonstrated that a single intra-articular administration of RTX reduced pain behaviors for a relatively long time in an experimental model of OA and could normalize OA-associated changes in peptide expression in the spinal cord.

• Restorative Dentistry and Endodontics
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• 제24권2호
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• pp.372-380
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• 1999

The purpose of this study was to investigate the distribution of calcitonin gene-related peptide(CGRP) containing nerve fivers after pulp exposure in rats. The Spague-Dawley rats weighing about 250 - 300g were used. The animals were devided into normal control group and experimental groups. Experimental animals were sacrified on 2, 4, 7, 10 days after pulp exposure. The maxillary teeth and alveolar bone were removed and immersed in the 4% paraformaldehyde plus 0.1M phosphate buffer (pH 7.4). Serial frozen $50{\mu}m$ thick sections were cut with a cryostat. In the immunohistochemical staining procedure, the rabbit CGRP antibody was used as a primary antibody. The sections were incubated for 48 hours at $4^{\circ}C$, and placed into biotinylated anti-rabbit IgG as a secondary antibody and incubated in ABC (avidin-biotin complex), The sections were visualized by 0.05% 3.3 diaminobenzidine tetrahydrochloride. The results of this study were as follows: 1. In control group, CGRP containing nerve fibers ran parallel to the long axis of root and reached the coronal pulp. They were distributed on Raschkow plexus under the odontoblastic layer. 2. In 2 day group after pulp exposure, tissue necrosis and acute inflammation occurred and CGRP containing nerve fibers increased. In 4 day group, the necrotic tissue extended to the pulp and CGRP containing nerve fibers were distributed around the inflammation zone. 3. In 7 day group after pulp exposure, pulp necrosis occurred, and in 10 day group, the abscess under the necrotic pulp extended to the root apex area and CGRP containing nerve fibers were not observed in root canals. 4.The sprouting of CGRP nerve fibers was most remarkable at the pulp chamber under injury in 4 day group, and it was found at inflammation zone under the necrotic tissue in 7 day group and the remaining root pulp tissue in 10 day group. As mentioned above, CGRP nerve fibers had a tendency to increase around the inflammatory zone, especially around the acute inflammation tissue, when compared with control group. It is suggested that CGRP nerve fibers maybe related to the control of inflammatory response of pulp tissue.

• 대한소아치과학회지
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• 제24권2호
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• pp.339-351
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• 1997

출생 후 성장 발육에 따른 흰쥐 유곽유두의 신경분포 및 변화를 관찰하기 위하여 생후 1, 5, 10, 15, 20, 25, 35일 및 완전히 성장한 흰쥐를 대상으로 calcitonin gene-related peptide (CGRP)를 이용한 면역조직화학적 방법으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. CGRP-면역양성 신경섬유들이 혀의 양측에서부터 유두 내로 진입하여 성장발육에 따라 그 분포밀도가 증가하다가 10일군부터는 상피의 직하방에 특히 풍부하게 분포하여 subepithelial plexus를 형성하고 있었다. 1일군에서는 CGRP-면역양성 신경섬유의 특징적인 양상인 염주알 모양이 명확히 관찰되었으나 그 이후로는 염주알 모양은 다소 감소하였고 하나의 선으로 보이는 경우도 있었다. 상피 내로 진입하는 CGRP-면역양성 신경섬유들은 5일군에서 드물게 관찰되었으며 taste pore를 가진 성숙한 미뢰가 처음으로 관찰되는 10일군에서 그 수가 증가하여 출생 후 15일군에서는 상피 전반에 걸쳐 풍부하게 관찰되었다. 그러나 그 이후 20일군부터는 미뢰가 존재하는 trench wall의 하방 2/3부위의 CGRP-면역양성 신경섬유는 감소하고 유두의 top surface와 trench wall의 상방 1/3에 CGRP-면역양성 신경섬유가 제한적으로 관찰되었다.

• 대한약리학회지
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• 제32권1호
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• pp.39-49
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• 1996

본 실험에서는 흰쥐의 뇌 기저동맥을 이용하여 $K^+$과 U46619에 의한 수축과 세포내 $Ca^{2+}$의 변동을 관찰하고, 이들 반응을 CGRP 전처치시 나타나는 반응과 비교하였다. CGRP (30과 100 nM)는 U46619에 의하여 야기된 수축반응과 세포내 $Ca^{2+}$의 증가반응을 억제시켰으나, $K^+$ (90 mM)에 의하여 나타나는 반응에는 영향을 미치지 아니하였다. 게다가, U46619에 의하여 야기되는 장력에 대하여 세포내 $Ca^{2+}$의 변동 $(F_{340}/F_{380})$을 도표화하여 세포내 $Ca^{2+}$ 농도와 장력의 발생과의 상관관계를 검토하고, 이들 결과를 CGRP 전처치시 나타나는 결과와 비교하였다. CGRP (30과 100 nM) 전처치군에서 얻어진 직선이 오른쪽으로 치우치지는 않으면서 아래쪽으로 이동하는 점으로 볼 때, CGRP가 $Ca^{2+}$에 대한 수축기구의 감수성에는 영향을 미치지 않으면서 세포내 $Ca^{2+}$ 농도를 저하시킴에 의하여 U46619에 의한 근수축반응을 억제시키는 것으로 보여진다. 이러한 CGRP의 효과는 CGRP1 수용체 길항제인 CGRP$(8{\sim}37)$ 분획(100 nM)의 전처치시 현저히 억제되었다. CGRP에 의한 수축력과 세포내 $Ca^{2+}$의 저하는 large conductance $Ca^{2+}$에 의하여 활성화되는 $K^+$ 통로 봉쇄제인 charybdotoxin (100 nM)과 iberiotoxin (100 nM)의 전처치에 의하여 완전하게 역전되었으나, small conductance $Ca^{2+}$에 의하여 활성화되는 $K^+$ 통로 봉쇄제인 apamin (300 nM)과 ATP에 감수성이 높은 $K^+$ 통로 봉쇄제인 glibenclamide (1 ${\mu}M$)에 의해서는 영향을 받지 아니하였다. 이상의 결과로 볼 때 CGRP1 수용체는 $Ca^{2+}$에 의하여 활성화되는 $K^+$ 통로를 개방시킴으로 세포내 $Ca^{2+}$을 감소시켜 뇌 기저동맥의 이완반응을 매개하는 것으로 사료된다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제1권3호
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• pp.251-262
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• 1997

Peripheral nerve injury sometimes leads to neuropathic pain and depletion of calcitonin gene related-peptide (CGRP) and substance P (SP) in the spinal cord. However, the pathophysiological mechanisms for depletion of CGRP and SP following the neurorathic injury are still unknown. This study was performed to see whether the distribution of immunoreactivity for CGRP and SP in the superficial dorsal horn and dorsal root ganglia(DRG) was related to the distance between the DRG and injury site. To this aim, we compared two groups of rats; one group was subjected to unilateral inferior and superior caudal trunk transections at the level between the S3 and S4 spinal nerves (S34 group) and the other group at the levels between the S1 and S2, between S2 and S3 and between S3 and S4 spinal nerve (S123 group). The transections in both groups equally eliminated the inputs from the tail to the S1-3 DRG, but the distance from the S1/S2 DRG to the injury site was different between the two groups. Immunostaining with SP and CGRP antibody was done in the S1-S3 spinal cord and DRG of the two groups 1 and 12 weeks after the injury. The results obtained are as follows: 1. The immunoreactivity for CGRP and SP in the ipsilateral superficial dorsal horn and DRG decreased 1 and 12 weeks after neuropathic nerve injury. 2. The immunoreactive area of SP and CGRP in the S1 dorsal horn was smaller in the S123 group than in the S34 group, whereas that in the S3 dorsal horn was not significantly different between the two groups. The number of SP-immunoreactive DRG cells decreased on the neuropathic side as compared to the sham group's in all DRGs of experimental groups except the S1 DRG of the S34 group. These results suggest that the amounts of SP and CGRP in the dorsal horn and DRG following neuropathic injury inversely decrease according to the distance between the DRG and injury site.

• 대한수의학회지
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• 제36권2호
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• pp.265-276
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• 1996

This study was performed to identify the localization of several neuropeptides; calcitonin gene-related peptide(CGRP), substance P(SP), vasoactive intestinal polypeptide(VIP), neuropeptide Y(NPY), serotonin(5-HT) and neurotensin in the tongue of Korean native goat(Capra hircus) by immunohistochemical method. The results were summarized as follows: CGRP- and SP-immunoreactive fibers were observed as moderate immunoreactivity at the subepithelial plexus and subgemmal fibers in lamina propria of lingual papillae, but not seen in intragemmal, intergemmal, perigemmal fibers as well as in the supporting, basal and taste cells. Fibers around the acinus of the von Ebner's gland and blood vessels showed weak immunoreactivities against CGRP and SP. In the intrinsic ganglion cells, CGRP- and SP-immunoreactivities were not observed. The distribution patterns of VIP- and NPY-immunoreactive fibers were similar to CGRP-or SP-immunoreactive fibers, but their immunoreactivities were stronger than those of CGRP- or SP immunoreactive fibers. The immunoreactivities to VIP or NPY were seen in the intrinsic ganglion. Only a few serotonin immunoreactive fibers were seen in some filiform or fungiform papillae. Neurotensin immunoreactivity was not observed in the tongue of Korean native goat.

• Journal of Oral Medicine and Pain
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• 제34권4호
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• pp.387-395
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• 2009

신경섬유 말단에서의 유해자극 인지과정에는 신경성장인자 (nerve growth factor [NGF])와 감각성 신경펩티드가 관여하고, 또한 이들은 중추신경계에도 광범위하게 분포되어 있다. 본 연구는 인체 혈액과 타액에서 NGF와 감각성 신경펩티드(substance P [SP], calcitonin gene-related peptide [CGRP])의 농도를 조사하여 다양한 구강안면통증 증상들과의 관계를 알아보고자 시행되었다. 67명의 구강안면통증 환자 (관절 통증, 치아 혹은 치주 통증, 점막 통증)와 36명의 건강한 성인에서 혈장과 안정시 전타액을 채취하여 효소면역분석법 (enzyme immunoassay)을 이용하여 NGF, SP, CGRP의 농도를 측정하였다. 만성통증척도 (Graded Chronic Pain Scale) 설문지를 이용하여 각 피실험자들의 통증강도를 조사하였으며 안정시 전타액의 타액분비율 또한 측정하였다. 관절 통증 환자군은 치아 통증 환자군, 점막 통증 환자군, 대조군 각각에 비하여 유의하게 높은 혈장 내 NGF 농도를 나타내었다. 치아 통증 환자군의 혈장 내 NGF 농도는 대조군에 비하여 유의하게 높았다. 치아 통증 환자군의 타액 내 SP 농도와 점막 통증 환자군의 타액 내 CGRP 농도 또한 대조군에 비하여 유의하게 높았다. 관절 통증 환자군의 혈장 및 타액 내 SP 농도는 통증 강도와 유의한 상관관계를 보였다. 치아 통증 환자군과 점막 통증 환자군에서, 혈장 내 SP 농도, 타액 내 SP 농도, 타액 내 CGRP 농도는 연령에 따라 증가하였다. 혈장과 타액에서의 신경성장인자와 신경펩티드 검사는 다양한 구강안면통증의 특성과 예후를 평가하는데 도움을 줄 수 있으리라 생각된다.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1993년도 제2회 신약개발 연구발표회 초록집
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• pp.85-85
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• 1993

뇌동맥계는 일과성 저혈압에 반응하여 혈관확장이 야기되고, 혈압 상승시에는 혈관수축이 일어남으로서 뇌혈류가 일정하게 조절된다. 이러한 자가조절은 뇌손상 등의 병적 상태에서 야기된다. 연구의 목적은 \circled1 Cromakalim, CGRP(calcitonin-gene related peptide), 및 substance P에 의하여 뇌연막동맥의 직경이 어떻게 변동하는가를 관찰하고 \circled2 이들 신경성 peptide의 작용에 대하여 $K^{＋}$ 통로 개방 봉쇄제인 glibenclamide의 전처치 효과를 검색하고 \circled3 Capsaicin 전처치가 뇌혈류 자가조절에 어떻게 영향을 미치는가를 검색하였다. 그 결과는 다음과 같다. 1. 뇌혈류 자가조절은 대퇴동맥을 통한 사혈에 의하여 혈압하강을 일으킬 때 뇌연막 동맥은 이완하였고, reservoir내의 혈액을 체내로 주입함로서 혈압반전을 일으켰을 때는 혈관 수축이 일어났다. 2. 연막동맥은 glibenclamide (1~3$\mu$M)의 관류에 의하여는 영향을 받아니하였다. 3. 혈압변동에 따른 혈관직경의 변화를 회기직선으로 분석하였다. Glibenclamide 1과 3$\mu$M의 전처치 관류에 의하여 혈압하강에 따른 혈관 이완경사도와 혈압반전에 따른 혈관수축 경사도가 대조군에 비하여 현저히 약화되었다. 4. Cromakalim (0.1-30$\mu$M)의 각 농도를 대뇌표면에 관류시 연막동맥의 기초직경은 약물농도에 의존하여 증가되었고, 이는 glibenclamide (1$\mu$M) 전처치 관류에 의하여 억제되었다. 5. CGRP (0.1~100 nM)와 substance P (0.1~10nM)도 용량에 의존하여 혈관이완을 일으켰다. 전자는 glibenclamide (1$\mu$M) 전처치 관류에 의하여 억제되었으나 후자는 영향을 받지 아니하였다. 6. Capsaicin(50 nmol: intracisternally) 주사에 의하여 뇌혈류자가조절의 변동이 초래되었다. 이상의 결과들을 종합하면 CGRP가 혈압변동에 의하여 반사적으로 유리되고, 이는 glibenclamide-sensitive $K^{＋}$ 통로에 작용하는 것으로 시사된다.

• 동의생리병리학회지
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• 제19권1호
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• pp.75-80
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• 2005

The purpose of study is that we will observe the change of c-fos and CGRP with the immunohistochemistry method and then we will study the effect of microcurrent stimulation following the frequency after inducing pain to rats with capsaicin. The experimental groups were divided by microcurrent application and pain induce. Normal control groups is used in experiment I, the group which we induce pain is used in experiment II, the application group which we induce pain and then the high frequency microcurrent stimulation is used in experiment III, the application group which we induce pain and then the low frequency microcurrent stimulation is used in experiment IV. c-fos was strongly expressed after pain induced 2 hours and positive neurons were decreased from 2 hours. At 7 days, positive neuron recovers to normal range, But c-fos positive neuron of microcurrent stimulation group were decreased from 2 hours. CGRP was strongly expressed after pain induced 24 hours, and positive neurons were decreased from 7 days. These results suggests that microcurrent stimulation therapy effect to control pain according to expression of c-fos and CGRP examined by immunohistochemistry. Also high frequency microcurrent stimulation is more effective than low frequency microcurrent stimulation for controling the pain.