Background: Avian pathogenic Escherichia coli (APEC) causes colibacillosis, resulting in significant economic losses in the poultry industry. Objectives: In this study, the molecular characteristics of two extended-spectrum beta-lactamase (ESBL)-producing APEC isolates were compared with previously reported ESBL-producing E. coli isolates. Methods: The molecular characteristics of E. coli isolates and the genetic environments of the ESBL genes were investigated using whole genome sequencing. Results: The two ESBL-producing APEC were classified into the phylogenetic groups C and B1 and ST410 and ST162, respectively. Moreover, the ESBL genes of the two isolates were harbored in different Inc plasmids. The EC1809182 strain, harboring the blaCTX-M-55 gene on the plasmid, exhibited extensive homology to IncFIB (98.4%) and IncFIC(FII) (95.8%). The EC1809191 strain, harboring the blaCTX-M-1 gene, was homologous to IncI1-I (Gamma) (99.3%). All chromosomes carried the multidrug transporter, mdf(A) gene. Mobile genetic elements, adjacent to CTX-M genes, facilitated the dissemination of genes in the two isolates, analogous to other ESBL-producing E. coli isolates. Conclusions: This study clarifies the transmission dynamics of CTX-M genes and supports strengthened surveillance to prevent the transmission of the antimicrobial-resistant genes to humans via the food chain.
Kim, Semi;Sung, Ji Youn;Cho, Hye Hyun;Kwon, Kye Chul;Koo, Sun Hoe
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.9
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pp.1643-1649
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2016
The aims of this study were to characterize the molecular epidemiological profiles of CTX-M-producing uropathogenic Escherichia coli isolates from a tertiary hospital in Daejeon, Korea, and to investigate the genetic diversity and compare the prevalence of sequence types (STs) in different areas. Extended spectrum β-lactamase-producing E. coli strains isolated from urine were analyzed for CTX-M, integrons, and insertion sequence common regions (ISCRs) by PCR and sequencing. Multilocus sequence typing (MLST), pulsed-field gel electrophoresis (PFGE), phylogenetic analysis, and rep-PCR were also used for molecular typing of the isolates. Of 80 CTX-M producers, 31 and 46 expressed CTX-M-15 and CTX-M-14, respectively. MLST analysis indicated that the most prevalent ST was ST131 (n = 34, 42.5%), followed by ST38 (n = 22, 27.5%), ST405 (n = 8, 10.0%), and ST69 (n = 6, 7.5%). Most CTX-M producers harbored class 1 integrons. ST131 strains belonged to phylogenetic group B2 and showed identical rep-PCR patterns, whereas ST69, ST38, and ST405 strains belonged to phylogenetic group D; the ST38 and ST405 strains displayed the same rep-PCR pattern, respectively. ST131 and ST38 isolates showed 21 and 19 distinct types, respectively, by PFGE. In Daejeon, D-ST38 CTX-M-14 producers were relatively more prevalent than in other countries and Korean cities. Our results indicate that CTX-M-producing E. coli isolates belonged mostly to ST131 or ST38 and were more related to hospital-onset than to community-onset infections and that the blaCTX-M gene may vary according to the ST.
Shin, Seung Won;Jung, Myunghwan;Won, Ho Geun;Belaynehe, Kuastros Mekonnen;Yoon, In Joong;Yoo, Han Sang
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.9
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pp.1716-1723
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2017
The rapid dissemination of extended-spectrum ${\beta}$-lactamase (ESBL)-producing Escherichia coli has significantly contributed to public health hazard globally. A total of 281 E. coli strains recovered from pigs and chickens between 2009 and 2015 in South Korea were analyzed for ESBL production. ESBL phenotypes were recognized in 14 E. coli isolates; ten and three ESBL-producing isolates carried only $bla_{CTX-M}$ and $bla_{CMY}$ genes, respectively, and one isolate harbored both genes. The predominant CTX-M and CMY types were CTX-M-15 (n = 8) and CMY-2 (n = 3). We also detected ESBL-producing isolates harboring $bla_{CTX-M-65}$, $bla_{CTX-M-14}$, $bla_{CMY-6}$, $bla_{DHA-1}$, and $bla_{TEM-1}$ genes. All ESBL-producing isolates showed resistance to the extent of the fourth generation cephalosporins, along with multidrug resistance. CTX-M-15-producing isolates showed higher MIC values than CTX-M-14- and CTX-M-65-producing isolates. The $bla_{CTX-M}$ and $bla_{CMY}$ genes have the potential to be transferable. The spreading of $bla_{CMY}$ and $bla_{CTX-M}$ genes was arbitrated mainly via Frep and IncI1 plasmids. Our isolates showed clonal diversity in PFGE analysis. This is the first report of E. coli isolates carrying $bla_{CMY-6}$ in chicken from South Korea. The emergence of CMY-6 ESBLs in a population of poultry suggests that extensive screening with long-term surveillance is necessary to prevent the dissemination of ESBL from chicken to human.
The aim of this study was to survey susceptibilities of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae isolates against cefotaxime and to determine the prevalences of CTX-M type extended-spectrum $\beta$-lactamases (ESBLs) producing E. coli and K. pneumoniae in Korea. During the period of February to July, 2005, 153 E. coli and 52 K. neumoniae isolates were collected from 2 hospitals in Busan. Antimicrobial susceptibilities to cefotaxime were tested by the disk diffusion method. ESBL production of E. coli and K. pneumoniae was determined by the double disk synergy test. MICs of $\beta$-lactam antibiotics were determined by the agar dilution method. Blac$_{CTX-M}$ genes of the organism were detected by PCR. Among 153 isolates of E. coli and 52 isolates of K. neumoniae, 27 (17.6%) and 25 (48.0%) were intermediate or resistant to cefotaxime, respectively. Twenty-three (15.0%) isolates out of 153 E. coli and 13 (25.0%) out of 52 K. neumoniae isolates showed positive results for ESBL by the double disk synergy test. Twenty isolates out of 23 ESBL producing E. coli and 12 out of 13 ESBL producing K. neumoniae isolates harbored biacTx-M gene,11 of ESBL producing E. coli and 12 of ESBL producing K. neuinoniae isolates harbored bla$_{CTX-M}$ gene, 11 of the ESBL producing E. coli and 2 of ESBL producing K. neumoniae isolates harbored bla$_{TEM}$ gene, and 1 of the ESBL producing E. coli and 12 of ESBL producing K. neumoniae isolates harbored bla$_{SHV}$ gene. E. coli and K. neumoniae isolates producing CTX-M-type ESBLs were not uncommon in Korea. It is thought that continuous survey are necessary for inspecting the spread and novel variants of CTX-M-type ESBL genes. Further me]'e investigation and research on ESBL producing strains are needed in order to prevent the spread of resistant bacteria.
Sung, Ji Youn;Oh, Ji-Eun;Kim, Eun Sun;Son, Ja Min;Kim, Hye Yeon;Lim, Da Young
Korean Journal of Clinical Laboratory Science
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v.45
no.2
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pp.43-47
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2013
This study was designed to evaluate the prevalence of ESBL genes and monitor antimicrobial resistance pattern in Escherichia coli, isolated from a hospital and a community. We tested 200 E. coli strains isolated in the hospitals and community in Chungcheong area from January to March 2012. Antimicrobial susceptibilities were tested by using the disk diffusion method. A search for ESBL genes was conducted by PCR amplification, and the genotypes were determined by direct nucleotide sequence analysis of the amplified products. An Epidemiologic study was performed by repetitive extragenic palindromic sequence-based PCR (REP-PCR). The percentage of ESBL-producing isolates was 17% for hospital associated E. coli and 11% for community associated E. coli. The ESBL gene sequencing results showed that the most common ESBL in E. coli was CTX-M-14 (19/28), followed by CTX-M-15 (9/28). The REP-PCR study also showed the genetic diversity, but there was no difference between the hospital and community associated E. coli. In this study, the most common types of class A ESBLs identified were CTX-M in the hospital and the community in Chungcheong area. ESBL-producing E. coli isolates showed diverse clonality.
Kim, Jin Seok;Kim, Junyoung;Kim, Soo-Jin;Jeon, Se-Eun;Oh, Kyung Hwan;Cho, Seung-Hak;Kang, Yeon-Ho;Han, Soon Young;Chung, Gyung Tae
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.3
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pp.421-426
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2014
To characterize the extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) in diarrheagenic Escherichia coli from Korea in 2008-2011, we screened seven enterotoxigenic E. coli (ETEC) and one enteroaggregative E. coli (EAEC) that produce ESBLs from a nationwide survey. All eight isolates produced CTX-M-type ESBLs, including CTX-M-12 (n = 4), CTX-M-14 (n = 2), and CTX-M-15 (n = 2). PCR-based replicon typing indicated that the $bla_{CTX-M-12}$ genes of four ETEC isolates were carried on a conjugative IncF plasmid, whereas the $bla_{CTX-M-14}$ of one EAEC was located on an IncK plasmid. This is the first report of the occurrence of $bla_{CTX-M}$ genes in clinical isolates of EAEC in Korea. The ESBL-producing isolates were shown to be different based on pulsed-field gel electrophoresis and multilocus sequence typing, whereas the four isolates with CTX-M-12 were clonally related. These observations raise an alarm for the spread of plasmid-mediated resistance to ESBL among diarrheagenic E. coli.
Lee, Min Hyeok;Hwang, Yeoung Min;Baik, Keun Sik;Cho, Hyun Wook;Seong, Chi Nam
Journal of Life Science
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v.23
no.5
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pp.703-709
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2013
The aim of this study was to investigate the prevalence of Extended-spectrum ${\beta}$-lactamase (ESBL) gene and quinolone resistance determinant (qnr) and the pattern of antibiotic resistance in the ESBL-producing Escherichia coli clinical isolates. The 42 ESBL-producing strains from total 274 isolates were detected using a double disk synergy test. They were isolated from various specimens, such as urine (28 strains), sputum (6 strains), pus (3 strains), wound (2 strains), blood (2 strains), and tissue (1 strain). Using the PCR with the specific primers ESBL, ESBL and qnr gene types were determined. Thirty-five strains possessed one or two ESBL genes. CTX-M-1 type was the most abundant followed by CTX-M-9 type and TEM, but SHV, CTX-M-2, and CTX-M-8 gene types were not detected. qnr gene types were detected from ten isolates in the order of qnrB4, qnrB1, and qnrS. Coexistence of ESBL and qnr genes was found. ESBL-producing isolates showed high resistance against some antibiotics, such as cefotaxmie (80.0%), levofloxacin (82.9%), and ampicillin (100%). Neither a synergy effect from the coexistence of ESBL and qnr genes on antibiotic resistance nor a correlation between the production of qnr gene and quinolone resistance were found.
Recently, there has been a considerable increase in the prevalence of CTX-M type extended-spectrum ${\beta}$-lactamase (ESBL)-producing E. coli isolates worldwide, including Korea. To investigate the ESBL genes in the E. coli strains isolated from a university hospital in the Chungcheong area, a study was conducted using PCR amplification and nucleotide sequence analysis of the amplified products to detect the plasmid mediated quinolone resistance (PMQR) genes in ESBL producing E. coli isolates. The number of CTX-M-14 producing isolates was 25 (16.0%) isolates, and of them, 9 (5.8%) isolates also produced CTX-M-15. All CTX-M type ESBL producing E. coli isolates showed resistance to cefotaxime. Twelve (48%) CTX-M type ESBL producing E. coli isolates contained the PMQR genes, 8 contained qnrS1, and 8 contained aac(6')-Ib-cr. Four isolates harbored both qnrS1 and aac(6')-Ib-cr genes. In our study, we confirmed that the plasmid mediated antimicrobial resistant determinants-the ESBL and PMQR genes-were distributed in the E. coli isolates. To prevent further spreading of the resistant genes among the E. coli isolates, consistent effort is required to investigate and monitor the resistant genes.
Kim, Semi;Sung, Ji Youn;Cho, Hye Hyun;Kwon, Kye Chul;Koo, Sun Hoe
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.6
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pp.765-770
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2014
This study aimed to characterize CTX-M producers of urinary E. coli and K. pneumoniae isolates and to determine the prevalence of plasmid-mediated antimicrobial resistance genes among them. Minimum inhibitory concentrations (MICs) were determined, and PCR and sequencing were performed. Among the 42 (82.3%) E. coli and 24 (77.4%) K. pneumoniae isolates containing $bla_{CTX-M}$, $bla_{CTX-M-14}$ and $bla_{CTX-M-15}$ were detected in 23 and 19 E. coli isolates, respectively, and in 7 and 17 K. pneumoniae isolates, respectively. CTX-M producers of urinary E. coli and K. pneumoniae were resistant to multiple antibiotics and contained other antimicrobial resistance genes. CTX-M-15 producers contained more antimicrobial resistance genes than did CTX-M-14 producers.
This study was conducted to investigate the prevalence and genotypes of extended-spectrum ${\beta}$-lactamase (ESBL) in 377 Escherichia coli isolated from healthy and sick animals. Two isolates (0.5%), each of which were isolated from diseased swine and chicken, respectively, were confirmed as ESBL producing isolates by double disk synergy test, and showed a multidrug resistant phenotype. Minimum inhibitory concentration of cefotaxime for the two ESBL producing isolates were 3~4 times higher than those of ceftazidime, respectively. By PCR and sequencing, one isolate from swine have both $bla_{CTX-15}$ and $bla_{TEM-1}$, and one isolate from chicken have $bla_{CTX-15}$ and $bla_{TEM-116}$. Also, these genes were transferred to E. coli J53 by conjugation. These two isolates showed unrelated pulsed-field gel electrophoresis. To our knowledge, this is the first time that $bla_{TEM-116}$ gene was identified in E. coli isolated from animals in Korea. These results suggest more prudent use of third- generation cephalosporins, and surveillance and monitoring for ESBL producing E. coli in both animals and their environments should be necessary.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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