A Micrococcus sp. producing catalase was isolated from soil, and a commercial-scathe cultivation and purification of catalase were conducted. The maximum catalase activity was about 103 BU/mL obtained after 46 hr of cultivation in a 30 L fermenter containing 2% glucose, 2% peptone, 4% yeast extract, and 0.5% NaCl. Soybean sauce, CSL (corn steep liquor), and yeast extract were also studied as media substitutes in the media 30 L fermenter. The optimum medium components for the production catalase were found to be 2% glucose, 4% soybean sauce, and 16% CSL. In a 18 kL fermenter, the stationary phase in the cell growth and maximum catalase activity (112 BU/mL) were reached after 46 hr of cultivation, which was the same result as in the 30 L fermenter. The catalase activity was purified with over 17 folds in four steps with a 33.6% yield. From 104,250 mg of protein after cell lysis, 1,966 mg of the purified enzyme with a specific activity of 192.7 kBU/mg was obtained. The residual activity with the addition of 10% NaCl exhibited more than 100%. The use of just NaCl produced a higher residual activity than combination of bencol (benzyldimethyl ammoniumchloride) and PG (propyleneglycol).
The conversion of D-sorbitol to L-sorbose by Gluconobater suboxydans was analyzed, and continuous production of L-sorbose was carried out in immobilized cell reactors. L-Sorbose production by high densities of resting cells was more effective than by conventional batch fermentations. Sorbitol dehydrogenase, an enzyme converting D-sorbitol to L-sorbose, did not suffer from substrate inhibition, but from product inhibition. When L-sorbose production was carried out with Ca-alginate-immobilized cells, about 60 g/l of L-sorbose was obtained. On the other hand, when the corn steep liquor (CSL) concentration of medium was reduced to 0.08%, 80 g/l of L-sorbose was obtained. Outgrowth inside the immobilized carriers was thought to block the pores of the carriers so that substrate could not easily diffuse through the carriers. Continuous production of L-sorbose was well accomplished in a bubble column reactor, and 6. 5 g/l.h of productivity and 81.2% of yield were obtained at a substrate feeding rate of 0.08h$^{-1}$ under the optimum conditions with carrier volume of 55% and aeration rate of 3 vvm.
In order to maximize the riboflavin production by a mutant strain Ashbya gosspyii, the optimization of medium and fed-batch fermentation were performed. As carbon sources, glucose and soybean oil were necessary for the riboflavin overproduction. Optimal concentrations of glucose and soybean oil in the flask cultures were found to be 3.0% and 0.5%, respectively, in a complex medium containing corn steep liquor(CLS) 1%. Among the various organic nitrogen sources tested, CSL was the most effective one both for the cell growth and riboflavin overproduction.
Lactic acid production parameter optimization using Lactobacillus amylovorus NRRL B-4542 was performed using the design of experiments (DOE) available in the form of an orthogonal array and a software for automatic design and analysis of the experiments, both based on Taguchi protocol. Optimal levels of physical parameters and key media components namely temperature, pH, inoculum size, moisture, yeast extract, $MgSO_4{\cdot}7H_20$, Tween 80, and corn steep liquor (CSL) were determined. Among the physical parameters, temperature contributed higher influence, and among media components, yeast extract, $MgSO_4{\cdot}7H_20$, and Tween 80 played important roles in the conversion of starch to lactic acid. The expected yield of lactic acid under these optimal conditions was 95.80% and the actual yield at optimum conditions was 93.50%.
Statistical medium optimization has been carried out for the production of succinic acid in anaerobic fermentations of Actinobacillus succinogenes. Succinic acid utilized as a precursor of many industrially important chemicals is a fourcarbon dicarboxylic acid, biosynthesized as one of the fermentation products of anaerobic metabolism by A. succinogenes. Through OFAT (one factor at a time) experiments, corn steep liquor (CSL), a very cheap agricultural byproduct, was found to have significant effects on enhanced production of succinic acid, when supplemented along with yeast extract. Hence, using these factors including glucose as a carbon/energy source, interactive effects were investigated through $2^n$ full factorial design (FFD) experiments, showing that the concentration of each component (i.e., glucose, yeast extract and CSL) should be higher. Further statistical experiments were conducted along the steepest ascent path, followed by response surface method (RSM) in order to find out optimal concentrations of each constituent. Consequently, optimized concentrations of glucose, yeast extract and CSL were observed to be 180 g/L, 15.08 g/L and 20.75 g/L respectively (10 g/L of $NaHCO_3$ and 100 g/L of $MgCO_3$ to be supplemented as bicarbonate suppliers), with the estimated production level of succinic acid to be 92.9 g/L (about 3.5 fold higher productivity as compared to the initial medium). Notably, the RSM-estimated production level was almost similar to the amount of succinic acid (92.9 g/L vs. 89.1 g/L) produced through the actual fermentation process performed using the statistically optimized production medium.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.32
no.2
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pp.181-184
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2003
We investigated the effect of ethanol on the production of cellulose and acetic acid fermentation by Gluconacetobacter persimmonensis KJ145. Results showed that bacterial cellulose productivity was highest when 2% ethyl alcohol was added to apple-juice medium. For acetic acid production, 7% ethyl alcohol was needed. Optimal concentration of ethyl alcohol was 5% for simultaneous production of bacterial cellulose and acetic acid. For simultaneous production of bacterial cellulose and acetic acid, optimal nitrogen source and optimal concentration were corn steep liquor and 15% (w/v), respectively Optimal culture time for simultaneous production of bacterial cellulose and acetic acid was 14 days. At the optimal condition, Cluconacetobacter persimmonenis KJ145 produced 7.55 g/L of bacterial cellulose (dry weight).
S. chibaensis J-59 produced an extracellular xylanase in a CSL medium composed of 1.5% com steep liquor, 0.1% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.012% $CoCl_2{\cdot}6H_2O$, and 0.15% glucose containing xylan. but it did not produce in the culture medium containing xylose. The production of enzyme reached to a maximum level (0.83 uints/ml) when bacteria were cultured in 2.5 l jar fermentor for 48hrs at $30^{\circ}C$ and pH 7.0. Furthermore, S. chibaensis J-59 produced an intracellular glucose isomerase in a medium containing xylan and/or xylose. Xylanase was purified 29-fold over the culture supernatants of S. chibaensis J-59 by ammonium sulfate fractionation, chromatography on DEAE-Sephadex A-50, and gel filtration on Sephadex G-200. The purified enzyme is a monomeric enzyme with a native molecular mass of 25 kDa and a subunit molecular mass of 25 kDa. The purified enzyme requires $Mg^{2+}$ for activity, $Ca^{2+}$, $Co^{2+}$ is not an inhibitor but inhibit by $Fe^{3+}$, $Hg^{2+}$, and $Cu^{2+}$, sodium dodecyl sulfate, N-bromosuccinide. Pattern of hydrolysis demonstrated that the xylanase was an endo-splitting enzyme able to break down birchwood xylan at random giving xylobiose, xylotriose and xylotetrose as the main end products.
The influence of varying levels of urea and additives on nitrogen (N) retention and chemical composition of wheat straw was studied. The wheat straw was treated with 4, 6 and 8% urea and ensiled with 1.5, 2 and 2.5% of acetic or formic acid and 2, 4 and 6% of corn steep liquor (CSL) or acidified molasses for 15 days. The N content of wheat straw was significantly different across all treatments. The N content of urea treated wheat straw was increased with the increasing level of urea. The N content was higher in urea treated wheat straw ensiled with acetic or formic acid as compared to urea treated wheat straw ensiled without these organic acids. The N content of urea treated wheat straw was further enhanced when it was ensiled with CSL or acidified molasses. This effect was significant across all levels of urea used to treat the wheat straw. Nitrogen retention in urea treated wheat straw was decreased linearly as the urea level was increased to treat the wheat straw. The N content was increased linearly when higher levels of CSL or acidified molasses were used to ensile the urea treated wheat straw. Most of the N in urea treated wheat straw was held as neutral detergent insoluble N (NDIN). The NDIN content was increased linearly with the increasing levels of urea and additives. The neutral detergent fiber (NDF) contents were higher in urea treated wheat straw ensiled with acetic or formic acid as compared to urea treated wheat straw ensiled without additive. The NDF content further increased in urea treated wheat straw ensiled with CSL and acidified molasses. The entire increase in NDF content was because of fiber bound N. The hemicellulose content of urea treated wheat straw ensiled with CSL or acidified molasses was higher as compared to urea treated wheat straw ensiled with acetic or formic acid. The acid detergent fiber content of urea treated wheat straw ensiled with or without additives remained statistically non-significant. The cellulose contents of wheat straw was linearly reduced when urea level was increased from 4 to 6 and 8% to treat the wheat straw. This effect was further enhanced when urea treated wheat straw was ensiled with different additives. The results of the present study indicated that fermentable carbohydrates might improve the Nitrogen retention and bring the favorable changes in physiochemical nature of wheat straw. However, biological evaluation of urea treated wheat straw ensiled with fermentable carbohydrates is required.
Kim Sang-Dae;Kim Ji-Hye;Kim Jong-Bong;Han Yeong-Hwang
Korean Journal of Microbiology
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v.41
no.3
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pp.164-167
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2005
The culture condition and medium composition for the enhanced mycelial growth of Lepista nuda DGUM 26501 were investigated. The optimal temperature and pH for the mycelial growth were $24^{\circ}C$ and $7.0\~8.0$, respectively. The partial pressure of oxygen for the enhanced mycelial growth was more than $10\%\;O_2$. When Czapek-Dox medium was used as a minimal medium, manitol and xylitol were very good carbon sources. Organic nitrogen sources were better than inorganic ones for mycelial growth. As the nitrogen source tested, com steep liquor, soytone and protease peptone were the best as a source of organic nitrogen sources. When ammonium phosphate as phosphorus sources was used, the enhanced mycelial growth was shown. Nicotinic acid was proved to be the most appropriate source of vitamin. After the mycelia of L. nuda DGUM 26501 was cultivated at $24^{\circ}C$ for 10 days in LNM broth (pH 7.0), the activities of extracellular enzyme were determined. The specific activity of $\alpha-amylase$ was much higher than those of other enzymes. However, little or no enzyme activities of $\beta-glucosidase$, CMCase, laccase and lipase were found.
This study was targeted to isolate and characterize a bacterium producing lactic acid in a large amount. Lactic acid bacteria of about fifty strains were isolated from kimchi, a Korean traditional fermented vegetable food. Strain KH-1 of them was most effective in the lactic acid production and showed 99% homology with Lactobacillus casei from analysis of 16S rRNA sequencing. The conversion ratio of lactic acid from glucose by 1. casei KH-1 was 98% in anaerobic condition, and the lactic acid was composed as racemic mixture of D(-)-and L(+)-lactic acid, 7% and 93%, respectively. This result indicated that L. casei KH-1 was a homofermentative bacterium mainly producing L(+)-lactic acid. The strain KH-1 used glucose as a preferential substrate but not utilized lactose. In investigation of more inexpensive nitrogen source for cultivation of strain KH-1 using industrial MRS medium, when yeast extract and corn steep liquor were used at the ratio of 1 to 1, the molar yield of lactic acid produced per mole of glucose(Yp/s) was 1.09.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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