In order to investigate the cytotoxic effect of hexavalent chromium ($Cr0_3$) and the protective effect of Nelumbo nucifera GAERTN (NNG) extract, cultured cerebral neuroglial cells (C6 glioma cells) were treated with $4{\sim}55{\mu}M$ concentrations of $Cr0_3$ for 48 hours. Cell viability was measured by XTT assay. The superoxide dismutase (SOD)-like activity for the antioxidant effect was also examined on the extract of NNG stamen. In this study, $Cr0_3$ significantly decreased cell viability dose-dependently. The cytotoxicities of $XTT_{90}$ and $XTT_{50}$ determined with $10{\mu}M$ and $55{\mu}M$ of $Cr0_3$, respectively, showed that the $Cr0_3$ had highly toxic effect on cultured C6 glioma cells by the cytotoxic criteria. In the protective effect of NNG extract, the cell viability was significantly increased by the treatment of NNG extract, and NNG extract increased SOD-like activity. From these results, it is suggested that $Cr0_3$ showed highly toxic effect on cultured C6 glioma cell s and NNG extract was very effective in the protection of $Cr0_3$-mediated cytotoxicity by antioxidative effect in these cultures.
The effect of protein supplementation, $O_2$ concentration and co-culture on the development of embryos produced by nuclear transfer using cultured cumulus cell was investigated. Recipient oocytes and cumulus cells were obtained from the ovaries of the slaughtered Hanwoo cows. Donor cumulus cells were cultured in Dulbecco's modified Eagle medium containing 10% fetal bovine serum at 5% $CO_2$ in air at $38.5^{\circ}C$. The 1 to 6 passages of cumulus cells were isolated and used as donor cells. The in vitro matured oocytes were enucleated and then the isolated donor cells were introduced. One $15{\mu}s$ pulse of 180 volts was applied to induce the fusion between karyoplast and cytoplast. The fused embryos were activated with $10{\mu}M$ calcium ionophore for 5 min and 2 mM 6-dimethylaminopurine for 3 h. To examine the effect of protein supplementation, nuclear transfer (NT) embryos were cultured in one of the following 4 treatments : 1) CR1aa + 3 mg/ml BSA for 7 days ; 2) CR1aa + 10% FBS for 7 days ; 3) CR1aa + 1.5 mg/ml BSA + 5% FBS for 7 days ; and 4) CR1aa + 3 mg/ml BSA for first 3 days and then CR1aa + 1.5 mg/ml BSA + 5% FBS for 4 days. Culture took place at 5% $CO_2$, 5% $O_2$ and 90% $N_2$ at $38.5^{\circ}C$. Although there were no significant differences in cleavage rate among different protein supplements, the rates of blastocyst formation were significantly different. When NT embryos were cultured in the medium supplemented with only BSA, they could develop to only morula not to blastocyst. However, when FBS was supplemented, NT embryos developed to blastocyst stage. In order to investigate the effect of $O_2$ concentration and co-culture, NT embryos were cultured in CR1aa + 1.5 mg/ml BSA + 5% FBS with or without cumulus cell co-culture at an atmosphere of 5% $CO_2$ in air (20% $O_2$) or 5% $CO_2$, 5% $O_2$, 90% $N_2$ (5% $O_2$) at $38.5^{\circ}C$ for 7 days. The percentage of blastocyst development was significantly higher when the NT embryos were cultured at an atmosphere of 5% $O_2$ than that of 20% $O_2$ (p<0.05). However, there was no significant difference between with and without cumulus cell co-culture at an atmosphere of 5% $O_2$ or 20% $O_2$. Fifty embryos were transferred to 25 recipients and 5 recipients were pregnant at 100 days. From 5 pregnant cows, only one cow was delivered of female twin. In conclusion, the embryos reconstructed by enucleation of metaphase II oocytes and introduction of the cycling and quiescent cumulus donor cells in Hanwoo had developmental potential to term after embryo transfer to recipient cows.
We studied oxidation behaviors of anti-oxidative Y-Cr oxide coated sol on ferritic steel for application of the Fe-Cr alloys as interconnectors of planar-type Solid Oxide Fuel Cells(SOFCs). In coated$YCrO_3$on the ferritic steel, the phases of $YCrO_3$,$Cr_2O_3$and $Mn_{1.5}Cr_{1.5}O_4$on the coated surface were detected, but iron base scales were not observed after oxidation at 80$0^{\circ}C$ for 40 h. The Mn-Cr oxide scales were grown with oxidation by diffusing components in the ferritic steel from inner. The Log(ASR/T) value that expresses electrical resistance of coated$YCrO_3$on the ferritic steel was -4.57~$-4.70{omega}cm^2K^{-1}$, lower in comparison with the one of the uncoated ferritic steel,$-3.99{omega}cm^2K^{-1}$. This indicates the applicability of Fe-l6Cr alloy as interconnector materials for SOFCs.
Objectives : It is well known that hexavalent chromium has toxic effect on normal cells. Recently, toxic effect of hexavalent chromium is diminished by the some extracts derived from herbs or plants. But, the toxic or protective mechanism of hexavalent chromium is well unknown. This study was performed to examine the protective effect of poncirin against $Na_2Cr_2O_7$-induced cytotoxicity on NIH3T3 fibroblasts. Methods : The protective effect of the cytotoxicity induced by $Na_2Cr_2O_7$ was measured by the cell viability after NIH3T3 fibroblasts were cultured with or without $Na_2Cr_2O_7$ for 48 hours. Antitoxic effects of poncirin on the cytotoxicity induced by $Na_2Cr_2O_7$ were examined by colorimetric assays such as MTT or XTT assay. Results : $Na_2Cr_2O_7$ decreased cell viability by the decreased absorbance in MTT or XTT assay, but, the poncirin increased cell viability which was decreased by $Na_2Cr_2O_7$-induced cytotoxicity on NIH3T3 fibroblasts. Conclusion : These results suggest that $Na_2Cr_2O_7$ showed cytotoxicity effect on NIH3T3 fibroblasts by the decrease of cell viavility, and poncirin was effective in the protection of $Na_2Cr_2O_7$-induced cytotoxicity in these cultures.
Fahrudin, Mokhamad;Otoi, Takeshige;Karja, Ni Wayan Kurniani;Murakami, Masako;Suzuki, Tatsuyuki
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.14
no.8
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pp.1057-1061
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2001
In this study we explored the possibility of performing nuclear transfer in the domestic cat and assessed the ability of different culture media to support in vitro development of reconstructed cat embryos. Donor somatic cells were derived from cultured cumulus cells or explants of oviduct tissue, and recipient cytoplasts from in vitro matured oocytes. A higher percentage of cleavage (84.6% and 86.5%) and development to the morula stage (35.9% and 44.2%) was found when reconstructed embryos receiving cumulus or oviduct cells were cultured in MK1 medium, compared with those cultured in CR1aa (58.7% and 72.5%, 13.8% and 13.6%, respectively). There was no significant difference between MK1 and CR1aa media with respect to the proportion developing to the blastocyst stage (15.4% and 17.3% vs 6.8% and 8.6%, respectively, p>0.05). There was no significant effect (p>0.05) of donor cell type (cumulus and oviduct cells) on the rates of fusion (65.0% and 52.5%), cleavage (84.6% and 86.5%), development to the morula (35.9% and 44.2%), and blastocyst (15.4% and 17.3%) stages when reconstructed embryos were cultured in MK1 medium. Similar results were found for the reconstructed embryos cultured in CR1aa medium. These results show that culture medium has a significant impact on the early development of reconstructed cat embryos, whereas donor cell type does not have a significant effect.
Sixteen specific pathogen free 4-wk-old crossbred weanling pigs were allotted into a $2{\times}2$ factorial experiment to evaluate the effects of chromium (Cr) on the immune responses after lipopolysaccharide (LPS) injection. Two factors included (1) no Cr or 400 ppb Cr supplementation from chromium picolinate (CrPic) and (2) LPS injection ($200{\mu}g/kg$ BW, intraperitoneally) on day 21 (d 21) and 35 (d 35) as compared with saline application. Plasma samples were obtained from all piglets before (0 h) and at 2 h, 4 h, 8 h, and 24 h after LPS injection. The changes in tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$) and leukocyte populations after LPS injection were not significant on d 21. On d 35, the plasma $TNF-{\alpha}$ level was increased at h 2 postinjection, and supplemental Cr reduced the $TNF-{\alpha}$ level. The leukocyte populations had changed profoundly and lymphocyte subsets of $CD2^+$ and $CD8^+$ were reduced at 8 h postinjection. The blood granulocytes were increased and the percentage of $CD2^+$ was reduced in the Cr-fed group on d 35. Furthermore, Cr supplementation decreased the blastogensis of concanavalin A-stimulated peripheral blood mononuclear cells (PBMC) on d 21. These results suggest that 400 ppb Cr supplementation from CrPic in diets may modulate the immune responses in weanling pigs during LPS injection.
Kim, Min-Kyoung;Min, Jae-Ki;Choi, Bu-Young;Lim, Hae-Young;Cho, Youl-Hee;Lee, Chul-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.10
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pp.1712-1716
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2007
To generate new scaffold candidates as highly selective and potent cyelin-dependent kinase (CDK) inhibitors, structure-based drug screening was performed utilizing 3D pharmacophore conformations of known potent inhibitors. As a result, CR229 (6-bromo-2,3,4,9-tetrahydro-carbolin-1-one) was generated as the hit-compound. A computational docking study using the X-ray crystallographic structure of CDK2 in complex with CR229 was evaluated. This predicted binding mode study of CR229 with CDK2 demonstrated that CR229 interacted effectively with the Leu83 and Glu81 residues in the ATP-binding pocket of CDK2 for the possible hydrogen bond formation. Furthermore, biochemical studies on inhibitory effects of CR229 on various kinases in the human cervical cancer HeLa cells demonstrated that CR229 was a potent inhibitor of CDK2 ($IC_{50}:\;3\;{\mu}M$), CDKI ($IC_{50}:\;4.9\;{\mu}M$), and CDK4 ($IC_{50}:\;3\;{\mu}M$), yet had much less inhibitory effect ($IC_{50}:>20\;{\mu}M$) on other kinases, such as casein kinase 2-${\alpha}1$ (CK2-${\alpha}1$), protein kinase A (PKA), and protein kinase C (PKC). Accordingly, these data demonstrate that CR229 is a potent CDK inhibitor with anticancer efficacy.
The protective effect of Agrimonia pilosa var. (AP) extract on potassium dichromate ($K_2Cr_2O_7$)-induced cytotoxicity in cultured NIH3T3 fibroblasts, was examined by performing an XTT assay for the cell viability and antioxidative effects, such as lactate dehydrogenase (LDH) activity and superoxide anion-radical (SAR) scavenging activity. In this study, $K_2Cr_2O_7$ decreased the cell viability significantly in a dose-dependent manner, and the $XTT_{50}$ value was determined to be $37.5{\mu}M$, which was highly-toxic according to the Borenfreund and Puerner' toxic criteria. The antioxidant, butylated hydroxytoluene (BHT), increased remarkably the cell viability damaged by $K_2Cr_2O_7$-induced cytotoxicity in these cultures. With regard to the protective effect of the AP extract on $K_2Cr_2O_7$-induced cytotoxicity, AP extract produced a significant increase in cell viability and antioxidative effects as the inhibitory ability LDH and SAR scavenging ability. These findings suggest that oxidative stress is involved in the cytotoxicity of $K_2Cr_2O_7$, and the AP extract effectively protected the cells from $K_2Cr_2O_7$-induced cytotoxicity by antioxidative effects. These results suggest that natural resources, such as AP extract, may be a putative therapeutic agent for the diminution or treatment of cytotoxicity induced by heavy metallic bases, such as $K_2Cr_2O_7$ correlated with oxidative stress.
Transactions of the Korean hydrogen and new energy society
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v.16
no.1
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pp.58-65
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2005
The $LaCrO_3$-dispersed Cr alloys for metallic interconnect of solid oxide fuel cell were prepared as a function of $LaCrO_3$ content in the range of 5 to 25 vol.% and were sintered at 1500$^{\circ}C$ under an Ar atmosphere with 5 vol.% $H_2$. The sintering and oxidation behaviors of these alloys were examined. The alloys indicated a good sinterability above 95% relative density at a given sintering condition, and their sintering densities is independent on $LaCrO_3$ content. The $LaCrO_3$ particles of the sintered alloys were concentrated on interfaces of Cr particles, and the size of the Cr particles increased with decreasing $LaCrO_3$ content, which is caused by inhibited grain growth of Cr particle by $LaCrO_3$ particle. The oxidation test showed all $LaCrO_3$-dispersed Cr alloys have good oxidation resistance as compared with pure Cr, which is attributed to presence of $LaCrO_3$ at the interface at which the oxidation reaction occurs rapidly. The Cr alloys with about 15 vol.% $LaCrO_3$ are very resistant to oxidation.
Background and Objective: Coptidis Rhizoma is a medicinal herb known for its antioxidant and anti-inflammatory effect. The purpose of this study was to examine the effects of CR on the experimental burn elicitation in vitro and in vivo. Material and Methods: In order to know the antioxidant effect on skin cell of mice after burn elicitation, superoxide dismutase (SOD) activity was measured. In vitro, the RAW 264.7 macrophage cells were treated with lipopolysaccharides for experimental inflammation. iNOS mRNA expression was observed after CR-treatment. In order to know effects on the skin regeneration in the burned mice, we counted the nitric oxide (NO) in blood. We also observed the histological structure in the epidermal basal layer and the dermal section, and we studied changes of angiogenesis in the capillaries surrounding the basal layer and dermal papilla. The changes of transcription of iNOS mRNA (inducible nitric oxide synthase mRNA) and changes of NF-${\kappa}$B (nuclear factor ${\kappa}$B) p65 positive reaction were also observed to investigate the changes of the stress in the skin. Results: The results indicated that CR has significant effects on the antioxidant effect on skin cells of mice after burn elicitation by increasing SOD activity in the in vitro test. It seemed that CR decreased the amount of NF-${\kappa}$B which induced the iNOS mRNA dose-dependently and suppress activating NO and angiogenesis. Furthermore, CR facilitated the process of skin recovery after experimental burn. Conclusion: CR can be applied for burned skin via antioxidant effect and skin regeneration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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