Pseudomonas sp. P20 was a bacterial isolate which has the ability to degrade 4-chlorobi- phenyl(4CB) to 4-chlorobenzoic acid via the process of meta-cleavage. The recombinant plasmid pCK1 was constructed by insetting the 14-kb EcoRI fragment of the chromosomal DNA containing the 4CB-degrading genes into the vector pBluescript SK(+). Subsequently, E. coli XL1-Blue was transformed with the hybrid plasmid producing the recombinant E. coli CK1. The recombinant cells degraded 4CB and 2,3-dihydroxybiphenyl(2,3-DHBP) by the pcbAB and pcbCD gene products, respectively. The pcbC gene was expressed most abundantly at the late exponential phase in E. coli CK1 as well as in Pseudomonas sp. P20, and the level of the pcbC gene product, 2,3-DHBP dioxygenase, expressed in E. coli CK1 was about two-times higher than in Pseudomonas sp. P20. The activities of 2,3-DHBP dioxygenase on catechol and 3-methylcatechol were about 26 to 31% of its activity on 2,3-DHBP, but the enzyme did not reveal any activities on 4-methylcatechol and 4-chlorocatechol.
The objective of the study was to determine the effects of animal related factors on bruising in slaughter cattle, creatine kinase (CK) and beef quality. Three hundred and twenty one cattle from three breeds (108 Bonsmara, 130 Beefmaster and 83 Brahman) were used in this study. The animals were grouped as follows: Group 1 (16 months old), Group 2 (18 months old) and Group 3 (24 months old). At exsanguinations, blood samples for CK determination were collected using disposable vacutainer tubes. Muscularis longissimus thoracis et lumborum (LTL) was collected 24 h after slaughter to determine the colour ($L^*$, $a^*$, and $b^*$) and ultimate pH ($pH_u$) of beef. Breed, sex and age had significant effects (p<0.05) on bruising score, CK levels and beef quality. Bonsmara breed had the highest (80%) bruising score percentage, CK ($705.3{\pm}80.57U/L$) and $pH_u$ ($6.3{\pm}0.05$) values while the Bonsmara had the highest $L^*$ ($24.8{\pm}0.78$) $a^*$ ($17.5{\pm}0.53$) and $b^*$ ($12.8{\pm}0.53$) values. Higher CK levels were also observed in winter compared to summer, spring and autumn respectively. Therefore, animal factors (sex, breed and animal age at slaughter) contribute to the development of bruises and have an effect on the levels of CK and meat quality. It was also concluded that there is no significant relationship between meat parameters (L,* $a^*$, and $b^*$) and CK levels.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.20
no.4
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pp.992-996
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2006
The study examined clinical effect of the 'Sexiang Shuhuo Jing' on serum CK and LDH activities and skeletal muscle ${\alpha}-actin$ mRNA expression concentration 140days after skeletal muscle injury in rats. The clinical research consisted of observing and measuring the serum CK, LDH activities and skeletal muscle ${\alpha}-actin$ mRNA expression, at the time of injury and during recovery. All experimental data were analyzed by repeated measurement with ANOVA on of SPSS(11.5v), accepting level for all significances was above ${\alpha}\;=.05.$ The results were as follows: That skeletal muscle injury in rats there existed a substantial increase serum CK, LDH activities and expression of skeletal muscle ${\alpha}-actin$ mRNA And Sexiang Shuhuo Jing treatment group's serum CK, LDH activities lower and faster recovery than control group. The 1 st day after skeletal muscle injury, Sexiang Shuhuo Jing treatment group's skeletal muscle ${\alpha}-actin$ mRNA expression was much more higher than control group, after 2 day's faster recovery normal level than control group. There existed a substantial increase again serum CK, LDH activities and skeletal muscle ${\alpha}-actin$ mRNA expression 3rd days after injury in control group. But in Sexiang Shuhuo Jing treatment group's can't be found that.
We studied the characteristics of extracellular autolysins from Moraxella sp. CK-1 which has been known to lyse the cyanobacterial cell walls. This bacterium excreted autolysins from the early exponential growth phase. These enzymes showed optimal action condition of 60-$70^{\circ}C$ and pH 9.0. Whereas $Na^{+}$, $K^{+}$ and $Li^{+}$ ions exhibited positive effect on the enzyme activity, $Ba^{2+}$, $Mg^{2+}$, $Ca^{2+}$ and $Mn^{2+}$ ions exhibited negative effect. Especially, $Fe^{2+}$ and $Cu^{2+}$ ions almost completely suppressed the activity. Four extracellular autolysins of 30, 32, 38 and 41 kDa were detected in renaturing SOS-PAGE gel containing 0.2% heat-killed Micrococcus luteus cells as substrate. Among these 4 autolysins, 2 enzymes of 32 and 41 kDa distributed in the culture medium throughout the experimental time, but the 38 kOa enzyme diminished and 30 kOa began to appear at mid-exponential growth phase. When SOS-insoluble peptidoglycan of M. luteus was treated with the autolysins of Moraxella sp. CK-l, the concentration of free amino groups in reaction mixture increased. This indicates that the autolysins are N-acetylmuramyl-L-alanine amidase or endopeptidase.
The chromosome analyses of blood culture were made of 11 Korean native and 53 crossbred males between the Korean native cattles(K) and Charolais(C), which consisted of $K\times$K, $C\times$K, $C\times$CK, CK$\times$CCK and Charolais synthetic males(CK$\times$CCK or CCK$\times$CK). 1. The diploid(2n=60, XY) Charolais synthetic male has the 29 pairs of acrocentric autosomes, a single large submetacentric X and a small metacentric Y chromosome. 2. The numbers of G-band of karyotype in these males were a few differences in the 8 pairs of autosomes(chromosome 2, 4, 5, 6, 9, 11, 19 and 26) compared to those of purebred Korean native ones. G-banding qualities were not matched in chromosome 16, 19 and 29 with the Korean native males and also in chromosome 14, 20 and 22 with other domestic cattles. 3. The G-banding pattern between chromosome 4-6-7 and 24-25-27 was alomost similar together and the possibilityof misidentification was greater in the G-banded preparations. 4. 1/29 Robertsonian translocation and other abnormalities were not observed among 11 Korean native and 53 crossbred males. This result is considered in relation to limited data and further investigation based on larger samples may be necessary for definite conclusion.
To evaluate the renal toxicity of the antitumor agent, p-{N,N,-Bis(2-chloroethyl)amino}-4-phenyl acetyl-amino-2,6-piperidinedione(CK-15), rats were treated with CK-15 (acute: 50mg/kg. i.p., single and subacute: 5mg/kg, i.p., daily for 7 days). The changes in the body weight, water consumption, kidney weights and urine volume after and during the treatment were observed. The concentrations of urinary creatinine and portein, the activities of N-acetyl-${\beta}$-D-glucosaminidase (NAG), alanine aminopeptidase (AAP), ${\gamma}$-glutamyl transpeptidase (${\gamma}$-GT) and lactate dehydrogenase (LDH) in 24hr urine were also determined. The body weight, water consumption, and urine volume were decreased after the acute and subacute administration. However the weights of kidney were not changed after the treatments. The excretion of creatinine was significantly decreased 1 day after acute administration but, returned to the control value. In subactute administration, the excretion of creatinine was gradually decreased. However, the protein excretion did not changed in both treatment. Those indicate that CK-15 might decrease the metabolic rate of muscle. THe urinary activities of NAG, AAP, ${\gamma}$-GT, and LDH were significantly affected bythe drug treatment. The urinary activities of NAG, AAP and ${\gamma}$-GT were significantly increased 1 day after the acute administration and then returned to the control value. However, the urinary activities of LDH were not changed in acute treatment. In subacute treatment, although the urinary activities of NAG were not changed, those of AAP and ${\gamma}$-GT were significantly increased 2.3 times at 3 days during the subacute administration. Also the urinary activities of LDH were significantly increased at 7 day after the administration. These results indicate that the high and subacute administration might induce a damage in the kidney cells. Furthermore the present results suggest that the toxic effects of CK-15 might be due to the accumulation of the metabolites.
Protein phosphorylation is one of the major mechanisms by which eukaryotic cells transduce extracellular signals into intracellular responses. Calcium/calmodulin ($Ca^{2+}/CaM$)-dependent protein phosphorylation has been implicated in various cellular processes, yet little is known about $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinases (CaMKs) in plants. From an Arabidopsis expression library screen using a horseradish peroxidase-conjugated soybean calmodulin isoform (SCaM-1) as a probe, we isolated a full-length cDNA clone that encodes AtCK (Arabidopsis thaliana calcium/calmodulin-dependent protein kinase). The predicted structure of AtCK contains a serine/threonine protein kinase catalytic domain followed by a putative calmodulin-binding domain and a putative $Ca^{2+}$-binding domain. Recombinant AtCK was expressed in E. coli and bound to calmodulin in a $Ca^{2+}$-dependent manner. The ability of CaM to bind to AtCK was confirmed by gel mobility shift and competition assays. AtCK exhibited its highest levels of autophosphorylation in the presence of 3 mM $Mn^{2+}$. The phosphorylation of myelin basic protein (MBP) by AtCK was enhanced when AtCK was under the control of calcium-bound CaM, as previously observed for other $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinases. In contrast to maize and tobacco CCaMKs (calcium and $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinase), increasing the concentration of calmodulin to more than $3{\mu}M$ suppressed the phosphorylation activity of AtCK. Taken together our results indicate that AtCK is a novel Arabidopsis $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinase which is presumably involved in CaM-mediated signaling.
Kim, Jae Hui;Goo, Min Ji;Yeom, Jung Sook;Park, Eun Sil;Seo, Ji Hyun;Lim, Jae Young;Park, Chan Hoo;Woo, Hyang Ok;Youn, Hee Shang
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.50
no.3
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pp.277-283
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2007
Purpose : Acute renal failure (ARF) is an important complication of rhabdomyolysis. The purpose of this study was to identify the major causes of rhabdomyolysis in children and to identify the factors associated with the developmet of ARF. Methods : A retrospective chart review between January 1997 to June 2005 was conducted of 60 patients with a diagnosis of rhabdomyolysis. Rhabdomyolysis was defined by an elevation of serum creatine phosphokinase (CK) greater than 1,000 IU/L with a MM fraction more than 95% or serum myoglobin>300 mg/dL or positive urine myoglobin. Patients were excluded if they had evidence of myocardial ischemia, or cerebrovascular insufficiency. Results : Sixty patients (37 males, 23 females) were enrolled, with the median age of 4.25 year. The most common causes of rhabdomyolysis were repiratory tract infection (9), seizure (7), hypoxia or asphyxia (6). Fifteen patients (25.0%) developed ARF and ten of them (66.0%) died. The initial serum creatinine, uric acid, potassium, pH and peak serum creatinine, initial systolic blood pressure, and mental status were statistically correlated with the development of ARF. The peak serum CK was associated with mortality of rhabdomyolysis. Conclusion : Acute renal failure was significant complication of rhabdomyolysis in children. Several clinical and laboratory factors were statistically associated with the development of ARF and death.
Embryonic stem cells (ESCs), representing a population of undifferentiated pluripotent cells with both self-renewal and multilineage differentiation characteristics, are capable of spontaneous differentiation into cardiomyocytes. The present study sought to define the kinetic characterization of lactate dehydrogenase (LDH) and creatine kinase (CK) of ESC- and neonatal-derived cardiomyocytes. Spontaneously differentiated cardiomyocytes from embryoid bodies (EBs) derived from mouse ESC line (Royan B1) and neonatal cardiomyocytes were dispersed in a buffer solution. Enzymes were extracted by sonication and centrifugation for kinetic evaluation of LDH and CK with spectrophotometric methods. While a comparison between the kinetic properties of the LDH and CK of both groups revealed not only different Michaelis constants and optimum temperatures for LDH but also different Michaelis constants and optimum pH for CK, the pH profile of LDH and optimum temperature of CK were similar. In defining some kinetic properties of cardiac metabolic enzymes of ESC-derived cardiomyocytes, our results are expected to further facilitate the use of ESCs as an experimental model.
To select the effective fungicides for the control of leaf spot disease of jujube tree (Zizyphus jujuba) caused by Phoma sp., inhibitory effects of 26 fungicides for mycelial growth were investigated at $250{\mu}g\;a.i./m{\ell}$. In the test, eight fungicides were selected and minimum inhibitory concentration (MIC) for mycelial growth and an inhibitory effect for spore germination were investigated. Among the fungicides, myclobutanil, hexaconazole, and triflumizole were excluded in control effect tests because of their relatively high MICs. MICs were ranged $10-50{\mu}g\;a.i./m{\ell}$ for benomyl, carbendazim + kasugamycin (CK), and thiophanate-methyl. triflumizole (TT), and $50-250{\mu}g\;a.i./m{\ell}$ for iprodione + propineb (IT) and iminoctadine-triacelate (IT). However, benomyl and IP showed very low inhibitory effect on conidial germination. When the fungicides were sprayed on the seedlings before the leaves were inoculated with conidial suspension of Phoma sp., the protective values of CK and TT were around 70% at 1,000 ppm and around 90% at 2,000 ppm. The protective values were around 70% at 2,000 ppm (benomyl), 4,000 ppm (IP), and 8,000 ppm (IT). When the fungicides were sprayed after inoculation, benomyl showed the highest curative values of over 90% at 1,000 ppm and the values of CK and TT ranged $70{\sim}80%$ at 1,000 ppm. However, IP and IT had little or no effect on therapy of the disease. IT caused necrotic phytotoxicity on the leaves of jujube seedlings. As results, the best fungicides for the protection of jujube trees from leaf spot disease were CK (2,000 ppm) and TT (2,000 ppm) and for the remedy of the tree, benomyl (1,000 ppm) was the best. Therefore, alternate application of benomyl and CK or TT will be effective in the disease control.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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