Tumor metastasis involves circulating and tumor-initiating capacities of metastatic cancer cells. Hepatic TM4SF5 promotes EMT for malignant growth and migration. Hepatocellular carcinoma (HCC) biomarkers remain unexplored for metastatic potential throughout metastasis. Here, novel TM4SF5/CD44 interaction-mediated self-renewal and circulating tumor cell (CTC) capacities were mechanistically explored. TM4SF5-dependent sphere growth was correlated with $CD133^+$, $CD24^-$, ALDH activity, and a physical association between CD44 and TM4SF5. The TM4SF5/CD44 interaction activated c-Src/STAT3/ Twist1/ B mi1 signaling for spheroid formation, while disturbing the interaction, expression, or activity of any component in this signaling pathway inhibited spheroid formation. In serial xenografts of less than 5,000 cells/injection, TM4SF5-positive tumors exhibited locally-increased CD44 expression, suggesting tumor cell differentiation. TM4SF5-positive cells were identified circulating in blood 4 to 6 weeks after orthotopic liver-injection. Anti-TM4SF reagents blocked their metastasis to distal intestinal organs. Altogether, our results provide evidence that TM4SF5 promotes self-renewal and CTC properties supported by $CD133^+/TM4SF5^+/CD44^+^{(TM4SF5-bound)}/ALDH^+/CD24^-$ markers during HCC metastasis.
Breast cancer is the most common cancer among the population as a whole and among females, yet it is highly curable if diagnosed at an early stage. Different methods are used to diagnose breast cancer. One of these methods features immunological tests using flow cytometry to determine T-lymphocyte (CD4/CD8) ratios in peripheral blood. One hundred patients with breast cancer (50 from Basra, Iraq, and 50 from Baku, Azerbaijan) confirmed to have breast cancer by histopathology were studied. Blood samples were collected from all patients before initiation of treatment and were used for analysis. The mean age of women from Basra was $51.2{\pm}10.7years$ and that of women from Baku was slightly higher at $54.8{\pm}12.2$. The mean CD4/CD8 ratio in Basra was 1.4 and in Baku was 1.8 with P value < 0.05. The percentage of Basra patients who have CD4/CD8 value less than 1 was 50%, while the percentage for Baku patients was 24 % (p < 0.05). While the CD4/CD8 T-lymphocyte ratio might be useful for early diagnosis in patients with breast cancer parallel with other confirmed tests factors involved in explaining variation between countries such as that observed here need to be taken into account.
In this paper, CdS/Cd(Cu)S thin films and diodes were manufactured via a chemical bath deposition (CBD) process, and the effects of $NH_4Cl$ and TEA(triethylamine) on the properties of the films were examined. The addition of $NH_4Cl$ significantly increased the thickness of the CdS and Cd(Cu)S films, however, the addition of TEA decreased the thickness in both cases slightly. The addition of $NH_4Cl$ along with TEA increased the film thickness more effectively compared to the addition of only $NH_4Cl$. The thickness of the CdS film prepared from an aqueous solution of 0.007 M $CdSO_4$, 1.3 M $NH_4OH$, 0.03 M $SC(NH_2)_2$, 0.0001 M TEA and 0.03 M $NH_4Cl$ was 310 nm. Dark resistivity of the CdS film was $1.2{\times}10^3\;{\Omega}cm$ and the photo resistivity with $500\;W/cm^2$ irradiation of white light was $20{\Omega}cm$. The Cd(Cu)S/CdS thin film diodes prepared by CBD showed good rectifying characteristics.
The present study was done to assess the suppressive effects of Haedongpi-san(HDPS), a traditional herbal medicine, on collagen induced arthritis (CIA) in mice and to examined it's effects on immune system. Oral administration of HDPS (200 or 400 mg/Kg) significantly suppressed the progression of CIA, which extend is comparable to that of methotrexate (MTX, 30 mg/Kg), a positive control. Histological examinations reveled that HDPS inhibited infiltration of inflammatory cells into affected paw joint, and bone erosion and cartilage destruction were greatly reduced compared with control. In paw joint, the number of CD3+ cells and CD11b+/Gr-1+ cells were greatly reduced by HDPS. The levels of pathologic cytokines including TNF-a and IL-6 were significantly decreased in the serum by oral treatment with HDPS. The levels of $IFN-{\gamma}$ in the culture supernatant of splenocyte stimulated with CD3/CD28 or collagen were dramatically decreased, while those of IL-4 was increased. Rheumatoid factors including IgG, IgM and collagen specific antibody were present much lower in the serum of HDPS treated mice than control. In peripheral blood mononuclear cells of HDPS treated mice, the percentage of CD3+, CD3+/CD69+, CD4+, CD4+/CD25+ cells were significantly decreased, while CD19+ cells were slightly increased compared with control. The absolute number of CD19+, CD3+, CD3+/CD69+, CD4+/CD25+, CD49b+ cell in spleen from HDPS treated mice were significantly decreased. The absolute number of CD3+, CD3+/CD69+, CD4+, CD4+/CD25+ CD8+, CD49b+, CD3+/CD49b+ cells in draining lymph node were significantly increased compared with control. Taken together, HDPS has suppressive effects on rheumatoid arthritis by modulating immune system, and has potential to use as an therapeutic for rheumatoid arthritis.
We previously identified that tumor cells genetically modified with a 4-1BBL co-stimulatory molecule had anticancer effects in a CT26 mouse colorectal tumor model. To identify the distinction between immune cells in a mouse tumor model treated with tumor cells genetically modified with 4-1BBL or β-gal, we examined the immune cells in CT26-WT, CT26-βgal, and CT26-4-1BBL tumor bearing mice 21 days after tumor cell administration. The CD8+ T cells population in mice treated with tumor cells genetically modified with 4-1BBL was significantly increased on day 21 compared to that of tumor cells genetically modified with β-gal in the spleen and tumor tissue. The CD4+ T cell population was not different between the two mice groups. The Foxp3+CD25high CD4 T cell population decreased on day 21 in tumor tissues, but the decrease was not significant. We also found that CD8 T cells had pivotal roles in inhibiting tumor growth by treating mice with ant-CD4 and CD8 antibodies. These results suggest that tumor cells genetically modified with 4-1BBL could inhibit tumor growth by affecting on CD8 T lymphocytes.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제43권6호
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pp.388-394
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2017
Objectives: The objective of this study was to investigate the presence of oral lesions in human immunodeficiency virus/acquired immunodeficiency syndrome (HIV/AIDS) patients in a descriptive cross-sectional study, and to establish their presence according to levels of CD4+ cells (including the CD4+/CD8+ cell ratio). Materials and Methods: A total of 75 patients infected with HIV were included. Oral lesions were observed and classified using World Health Organization classification guidelines. Potential correlations between the presence and severity of oral lesions and CD4+ cells, including the CD4+/CD8+ cell ratio, were studied. Results: The most frequent oral lesion detected was oral pseudomembranous candidiasis (80.0%), followed by periodontal disease (40.0%), herpetic lesions (16.0%), hairy leukoplakia (16.0%), gingivitis (20.0%), oral ulceration (12.0%), Kaposi's sarcoma (8.0%), and non-Hodgkin's lymphoma (4.0%). The CD4+ count was <$200cells/mm^3$ in 45 cases (60.0%), between $200-500cells/mm^3$ in 18 cases (24.0%), and >$500cells/mm^3$ in 12 cases (16.0%). The mean CD4+ count was $182.18cells/mm^3$. The mean ratio of CD4+/CD8+ cells was 0.26. All patients showed at least one oral manifestation. Conclusion: There was no correlation between the CD4+/CD8+ cell ratio and the presence of oral lesions. The severity of the lesions was more pronounced when the CD4+ cell count was less than $200cells/mm^3$.
Single crystal of p-$CdIn_{2}Te_{4}$ was grown in a three-stage vertical electric furnace by using Bridgman method. The quality of the grown crystal has been investigated by x-ray diffraction and photoluminescence measurements. From the photoluminescence spectra of the as-grown $CdIn_{2}Te_{4}$ crystal and the various heat-treated crystals, the ($D^{o}$, X) emission was found to be the dominant intensity in the photoluminescence spectrum of the $CdIn_{2}Te_{4}$:Cd, while the ($A^{o}$, X) emission completely disappeared in the $CdIn_{2}Te_{4}$:Cd. However, the ($A^{o}$, X) emission in the photoluminescence spectrum of the $CdIn_{2}Te_{4}$:Te was the dominant intensity like in the as-grown $CdIn_{2}Te_{4}$ crystal. These results indicated that the ($D^{o}$, X) is associated with $V_{Te}$ which acted as donor and that the ($A^{o}$, X) emission is related to $V_{Cd}$ which acted as acceptor, respectively. The p-$CdIn_{2}Te_{4}$ crystal was obviously found to be converted into n-type after annealing in Cd atmosphere. The origin of ($D^{o},{\;}A^{o}$) emission and its to phonon replicas is related to the interaction between donors such as $V_{Te}$ or $Cd_{int}$, and acceptors such as $V_{Cd}$ or $Te_{int}$. Also, the In in the $CdIn_{2}Te_{4}$ was confirmed not to form the native defects because it existed in a stable bonding form.
Background: CTLA-4 (Cytotoxic T Lymphocyte associated Antigen 4, CD152) has been known as a homologue of CD28, an accessory molecule providing a key costimulatory signal for successful antigen-driven activations of T lymphocyte. Most of biochemical and cell biological characteristics of the CD152 protein remain unknown while those of CD28 have been characterized in detail. Methods: In this study CD152 expression in both $CD4^+$ and $CD8^+$ PBLs was studied by using flow cytometry. And intracellular CD152 multiprotein complex was purified and used for generating antibodies recognizing proteins composing of intracellular CTLA-4 multi protein complex. Results: Level of surface expression of this molecule was peaked at 2 days of PHA stimulation in flow cytometric analysis. 40~45% of PHA blast cells were $CD152^+$ in both of two subsets at this stage and the level of expression were equivalent in both two subsets. Contrary to this surface expression, intracellular expression was peaked at day 3 and it was preferentially induced in $CD8^+$ cells and about 60% of $CD8^+$ cells were $CD152^+$ at this stage. High molecular weight (>350 kD) intacellular CD152 protein complex purified by using preparative electrophoresis were immunized into rabbits and then 3 different anti-P34PC4, anti-P34PC7 and anti-P34PC8 antibodies were obtained. Using these 3 antibodies two unknown antigens associated with intracellular CD152 multiprotein complex were found and their molecular weights were 54 kD and 75 kD, respectively. Among these, the former was present as 110 kD homodimer in non-reducing condition. Conclusion: It seemed that 34 kD intracellular CD152 molecule forms high molecular weight multiprotein complex at least with 2 proteins of 75 kD monomer and 110 kD homodimer.
Babaei, Arash;Zarkesh-Esfahani, Sayyed Hamid;Gharagozloo, Marjan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제21권5호
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pp.529-535
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2011
Single-chain variable fragment (scFv) is a fusion protein of the variable regions of the heavy (VH) and light (VL) chains of immunoglobulin, connected with a short linker peptide of 10 to about 20 amino acids. In this study, the scFv of a monoclonal antibody against the third domain of human CD4 was cloned from OKT4 hybridoma cells using the phage display technique and produced in E. coli. The expression, production, and purification of anti-CD4 scFv were tested using SDS-PAGE and Western blot, and the specificity of anti-CD4 scFv was examined using ELISA. A 31 kDa recombinant anti-CD4 scFv was expressed and produced in bacteria, which was confirmed by SDS-PAGE and Western blot assays. Sequence analysis proved the ScFv structure of the construct. It was able to bind to CD4 in quality ELISA assay. The canonical structure of anti-CD4 scFv antibody was obtained using the SWISS_MODEL bioinformatics tool for comparing with the scFv general structure. To the best of our knowledge, this is the first report for generating scFv against human CD4 antigen. Engineered anti-CD4 scFv could be used in immunological studies, including fluorochrome conjugation, bispecific antibody production, bifunctional protein synthesis, and other genetic engineering manipulations. Since the binding site of our product is domain 3 (D3) of the CD4 molecule and different from the CD4 immunological main domain, including D1 and D2, further studies are needed to evaluate the anti-CD4 scFv potential for diagnostic and therapeutic applications.
Objectives : In order to investigate the effect of Bobitang on SD rats with deteriorated immunity caused by methotrexate. Methods : The test sample were dosed once a day for 14 days by gastric gavage at a dosage 1,000, 500 and $250mg/kg/10m{\ell}$ from 2 days after last MTX-dosing, and the changes on body weight and gains, spleen weight and total blood leukocyte numbers, total lymphocyte numbers, the percentage of B-cell, T-cell, CD3+CD4+ T-cell, CD3+CD8+ T-cell and CD4+/CD8+ T-cell ratios in the blood and spleen were observed. Results : The changes on body weight gains, the spleen weight, the total blood leukocyte numbers, the total lymphocyte numbers in the blood and spleen, the ratio of T-cell in the blood and spleen, the ratio of CD3+CD4+ T-cell in the blood and spleen were increased significantly in BBT Extracts groups as compared with control group. The ratio of B-cell in the blood and spleen was not increased significantly in BBT Extracts groups as compared with control group. The percentage of CD3+CD8+ T-cell in the blood and spleen was decreased significantly in BBT Extracts groups as compared with control group. The ratio of CD4+/CD8+ T-cell in blood and spleen was increased significantly in BBT Extracts group as compared with control group. Conclusions : According to the above results, Bobi-Tang has an effect of increasing immune responses on SD rats with deteriorated immunity caused by methotrexate.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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