Hatchery waste including infertile eggs, dead embryos in shell, dead or low grade chicks was cooked at $100^{\circ}C$ for 15 minutes and then oven dried and ground. Hatchery waste meal (HWM) thus prepared contained 44.25% protein, 4,573 kcal/kg gross energy, 3,600 kcal/kg metabolizable energy, 30% ether extract, 1.9% fibre, 14% ash, 9.8% nitrogen free extract, 7.26% Ca, 0.84%P, 1.86% lysine and 0.66% methionine with no Salmonella and E. coli. In biological evaluation trial, significantly higher weight gain was observed in ration containing 12% HWM compared with that containing similar amount of fish meal. Protein efficiency ratio on the two rations was 3.96 vs 2.85; protein digestibility, 86.02 vs 71.9; net protein utilization, 64.9 vs 42.37 and biological value, 75.37 vs 58.84, respectively, indicating better balance of amino acids in HWM compared with fish meal. Growth performance trial on broiler chicks also revealed better weight gain and feed efficiency on ration containing 12% HWM than that containing similar level of fish meal.
Effects of temperature and additives on the stability of actomyosin extracted from skeletal muscle of Israeli carp, Cyprinus carpio nudus, were studied by analyzing free SH-group, ATP-sensitivity and Ca-ATPase activity. The used additives were sucrose, sorbitol, Na-glutamate and L-cysteine. Furthermore, the denaturation constant($K_D$), protective effect(${\Delta}E/M$) and the other thermo-dynamic parameters on protein denaturation are systematically discussed. The actomyosin showed $4.12{\sim}4.68 mg/ml$ in protein concentration, $2.63{\sim}2.93\%$ in ribonucleic acid to the protein, $1:2.20{\sim}2.63$ in the binding ratio of myosin and actin, $4.33{\sim}5.26\%$ in fat content, 109.78 in ATP-sonsitivity, $0.159{\sim}0.201\;{\mu}M-Pi/min/mg-protein$ in Ca-ATPase activity and $3.3{\sim}3.4M/10^5$g-protein in free SH-group content. The first-order rate plots were obtained on the decrease of Ca-ATPase activity and ATP-sensitivity with an increase in temperature, while the free SH-group was increased to $60^{\circ}C$ and decreased rapidly above the temperature. The half-life of Ca-ATPase activity on the actomyosin Ca-ATPase was 280 min at $12^{\circ}C$, 125 min at $20^{\circ}C$, 55 min at $30^{\circ}C$ and 13 min at $40^{\circ}C$, and activation energy, activation enthalpy, activation entropy and free energy of the proteins at $20^{\circ}C$ wene 5,395 cal/mole, 4,814 cal/mole, -40.42 e.u. and 17,626 cal/mole, respectively. The protective effect of the additives on the actomyosin Ca-ATPase showed that the most effective material is $3\%$ sorbitol and followed in the order of $8\%$ Na-glutamate, $1\%$ sucrose and $1\%$ L-cysteine. The actomyosin was more stable at $-30^{\circ}C$ than at $0^{\circ}C$ and $-20^{\circ}C$. and when the additives were used in the low temperature storage, $8\%$ Na-glutamate was the most effective. $3\%$ sorbitol, $1\%$ sucrose and $1\%$ L-cysteine was to become lower in the order.
We have previously shown that, in circular muscle cells of the lower esophageal sphincter (LES) isolated by enzymatic digestion, contraction in response to maximally effective doses of acetylcholine (ACh) or Inositol Triphosphate ($IP_3$) depends on the release of $Ca^{2+}$ from intracellular stores and activation of a $Ca6{2+}$-calmodulin (CaM)-dependent pathway. On the contrary, maintenance of LES tone, and response to low doses of ACh or $IP_3$ depend on a protein kinase C (PKC) mediated pathway. In the present investigation, we have examined requirements for $Ca6{2+}$ regulation of the interaction between CaM- and PKC-dependent pathways in LES contraction. Thapsigargin (TG) treatment for 30 min dose dependently reduced ACh-induced contraction of permeable LES cells in free $Ca6{2+}$ medium. ACh-induced contraction following the low level of reduction of $Ca6{2+}$ stores by a low dose of TG ($10^{-9}{\;}M$) was blocked by the CaM antagonist, CCS9343B but not by the PKC antagonists chelerythrine or H7, indicating that the contraction is CaM-dependent. After maximal reduction in intracellular $Ca{2+}$ from $Ca6{2+}$stores by TG ($10^{-6}{\;}M$), ACh-induced contraction was blocked by chelerythrine or H7, but not by CCS9343B, indicating that it is PKC-dependent. In normal $Ca^{2+}$medium, the contraction by ACh after TG ($10^{-9}{\;}M$) treatment was also CaM-dependent, whereas the contraction by ACh after TG ($10^{-9}{\;}M$) treatment was PKC-dependent. We examined whether PKC activation was inhibited by activated CaM. CCS 7343B Inhibited the CaM-induced contraction, but did not inhibit the DAC-induced contraction. CaM inhibited the DAC-induced contraction in the presence of CCS 9343B. This inhibition by CaM was $Ca{2+}$dependent. These data are consistent with the view that the switch from a PKC-dependent pathway to a CaM dependent pathway can occur and can be regulated by cytosolic $Ca{2+}$ in the LES.
Polygalacturonase of Byssochlamys fulva was purified and characterized. Specific activity increased from 2.21 units/mg protein to 10.47 units/mg protein through $(NH_4)_2SO_4$ treatment, SephadexG-100 gel filtration, and DEAE-Sephadex ion exchange chromatography. Divalent cations, such as $Ca^{++}\;and\;Cu^{++}$, increased polygalacturonase activity greatly. Added as $10^{-3}M$ concentration, $Ca^{++}$ ion enhanced enzyme activity 9.8folds. Optimum temperature was $50^{\circ}C$ and optimum pH was 5.0. Activation energy of reaction was 8.69 Kcal/mole. Michaelis-Menten $constant(K_M)\;and\;V_{max}$ of reaction were $6.27{\times}10^{-3}mole/l\;and\;2.85{$\mu}moles/min$. Polygalacturonase of Byssochlamys fulva preferred polygalacturonic acid to pectin as substrate and was presumed as endo-type on the basis of the relationship between viscosity reduction and substrate degradation. Molecular weight of polygalacturonase was estimated as 55,000.
Proceedings of the Korean Biophysical Society Conference
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1998.06a
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pp.37-37
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1998
Effects of endothelin-l (ET-l) on contraction, $Ca^{2+}$ transient and L -type $Ca^{2+}$ current ( $I_{Ca,L}$) were investigated in single ventricular myocytes isolated from guinea-pig hearts. ET-l at concentrations of 5 and 10 nM produced a biphasic pattern of inotropism: a first decrease in contraction by 34.4$\pm$2.5 % of the control followed by a sustained increase in contraction by 66.6$\pm$8.4% (mean$\pm$S.E.M., n=9).(omitted)
In a previous study, we showed that Cecropin A (1-8)-Magainin 2 (1-12) hybrid peptide (CA-MA)'s analogue, Anal P5, exhibit broad-spectrum antimicrobial activity. Anal P5, designed by flexible region (positions 9, 10)-substitution, Lys- (positions 4, 8, 14, 15) and Leu- (positions 5, 6, 12, 13, 16, 17, 20) substitutions, showed an enhanced antimicrobial and antitumor activity without hemolysis. The primary objective of the present study was to gain insight into the relevant mechanisms of antimicrobial activities of Anal P5 by using flow cytometric analysis. Anal P5 exhibits strong antifungal activity in a salt concentration independent manner. In addition, Anal P5 causes significant morphological alterations of the bacterial surfaces as shown by scanning electron microscopy, supporting its antibacterial activity. Its potent antibiotic activity suggests that Anal P5 is an excellent candidate as a lead compound for the development of novel antibiotic agents.
Objectives : Angelicae Gigantis Radix (AG) is a plant of the Ranunculus family. AG have been reported to have various pharmacological effects on human health which include uterine growth promotion, anti-inflammatory, analgesic, and immune enhancement. However, research on dermatitis disease is insufficient. Therefore, we investigated the effects of AG on tumor necrosis factor-α (TNF-α)/interferon-γ (IFN-γ) stimulated HaCaT cell. Methods : To investigate the effect of AG on HaCaT cell, HaCaT cells were pre-treated with AG for 1 hour and then stimulated with TNF-α/IFN-γ. After 24 hours, media and cells were harvested to analyze the inflammatory mediators. Concentration of human interleukin-1beta (IL-1β), monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), and TNF-α in the media were assessed by ELISA. mRNA expression of human thymus and activation-regulated chemokine (TARC), IL-6, and IL-8 were analyzed by RT-PCR. Additionally, the mechanisms of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) signaling pathway were investigated by Western blot. Results : The treatment of AG inhibited gene expression levels of IL-6, IL-8, and TARC and protein expression levels of IL-1β, MCP-1, and GM-CSF. Also, AG significantly reduced extracellular signal-regulated kinase (ERK) phosphorylation and NF-κB translocation in TNF-α/IFN-γ stimulated HaCaT cell. Conclusions : Taken together, these results demonstrate that AG can alleviate inflammatory diseases such as atopic dermatitis by regulating the expression of inflammatory cytokines. Also, it suggest that AG may a promising candidate drug for the treatment of inflammatory disease such as atopic dermatitis.
The effect of boiling with apple vinegar and citric acid on the dissolution of Ca, Mg, and P out of pork rib bone during stew preparation was investigated. As the concentration (0, 1, 2. 4%) of apple vinegar and citric acid increased, the amount of Ca, Mg, and P dissolved out of the rib bone increased compared with the control. The increase in boiling time(3, 6, 9, 12 hour) also showed the same result. Between the two acid condiments citric acid extracted more Ca, Mg, and P than the apple vinegar at the same concentration. The pH of the pork rib bone stew added with the acid condiments increased gradually during the boiling process. Between the two acid condiments the apple vinegar extracted more amino acids and protein than citric acid at the same concentration.
The aim of this study was to investigate the effect of resveratrol on the oxidative stress-induced inhibition of gap junctional intercellular communication in HaCaT keratinocytes. Anti-oxidative activity of resveratrol was measured by $\alpha,\alpha$-diphenyl-$\beta$-picrylhydrazyl assay and dichlorodihydrofluorescein diacetate oxidation assay. Gap junctional intercellular communication in HaCaT keratinocytes was assessed using the scrape loading/dye transfer technique. Western blots and reverse transcription-polymerase chain reaction were also analyzed for connexin 43 protein and mRNA expression, respectively. Resveratrol scavenged directly the stable $\alpha,\alpha$-diphenyl-$\beta$-picrylhydrazyl radical over a concentration range of 4 mg/ml ($78.2{\pm}2.7$% of control) to 500 mg/ml ($29.9{\pm}4.2$% of control) and decreased the intracellular reactive oxygen species induced by ultraviolet A (UVA) irradiation ($89.3{\pm}1.1$% of UVA group), ultraviolet B (UVB) irradiation ($70.9{\pm}1.7$% of UVB group) and 12-0-tet-radecanoylphorbol-13-acetate (TPA, $48.3{\pm}1.1$% of TPA group), respectively. UVA irradiation and TPA markedly reduced gap junctional intercellular communication, which was restored by resveratrol. There were no significant differences in the level of connexin 43 protein and mRNA expression among any of the experimental groups. Our data suggests that resveratrol has the protective effect on the oxidative stress-induced inhibition of gap junctional intercellular communication in HaCaT keratinocytes, and this protection is likely due to the scavenging of reactive oxygen species.
This study was conducted to identify the differences in proteomic characteristics between Ca-enriched king oyster mushrooms and general king oyster mushrooms. A combined high-throughput proteomic approach was employed to determine the expression profiles and identity of proteins using 2-dimensional gel electrophoresis and matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight (MALDI-TOF) mass spectrometry. The overall distribution patterns of the proteins were quite similar, but many of the protein spot intensities varied. A total of 10 proteins, representing a significant difference in the quantities of protein betweenthe two types of mushrooms, were successfully identified. Among these proteins, eight kinds were increased in the Ca-enriched king oyster mushrooms and two kinds were decreased. This study showed that proteomic analysis can help define specific changes in protein level and composition, which can occur in mushrooms where Ca content may or may not be enriched.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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