Objective: We reported the overcoming effect of $Ni^{2+}$ on the in vitro 2-cell block of mouse embryos. In this study, we aim to investigate whether $Ni^{2+}$ should induce intracellular $Ca^{2+}$ transient in the mouse embryos. Materials and Methods: Embryos were collected at post hCG 32hr from the oviduct of the ICR mouse and cultured in M2 medium omitted phenol red. Intracellular $Ca^{2+}$ was checked by using a confocal laser scanning microscope and fluo-3AM by using various intracellular $Ca^{2+}$ antagonists. Results: In 1mM $Ni^{2+}$ treated medium which contained $Ca^{2+}$(1.71mM), 75.7% of the embryos showed $[Ca^{2+}]i$ transient about 200 sec later. In the $Ca^{2+}$-free medium, 69.8% of the embryos showed $[Ca^{2+}]i$ transient. In U73122, phospholipaseC(PLC) inhibitor (5uM, 10min) pretreated group, 33.3% of the embryos showed $[Ca^{2+}]i$ transient. Heparine, inositol 1, 4, 5-triphosphate receptor(IP3R) antagonist preinjected embryos showed no response with 1mM $Ni^{2+}$. In danthrolene treatment, ryanodine receptor(RyR)-antagonist, 43% embryos showed $[Ca^{2+}]i$ transient but they showed delayed response about 340sec in the presence of $Ca^{2+}$. Conclusions: Summing up the above results, $Ni^{2+}$ seems to induce $Ca^{2+}$-release from the $Ca^{2+}$-store even in the $Ca^{2+}$-free medium. IP3 receptors of the mouse 2-cell embryos might have an essential role for the intracellular $Ca^{2+}$ increase by $Ni^{2+}$.
본 연구에서는 국내산(경북 포항 영일만) 제올라이트 분말소재를 산 처리하여 MA필름 제조시 수분억제제(결로방지, 방담처리)를 병행 처리하여 생산한 개발포장구(CA)로 포장한 감귤과의 신선도유지 효과를 조사하고자 기존의 LLDPE 필름과 개발포장구(CA)에 감귤을 포장하여 온도 $15^{\circ}C$, 상대습도 67%의 항온항습실에 120일 동안 저장하면서 기호도, 중량, Vitamin C, 당도, 산도와 기체조성을 비교 분석하였다. 품질유지기간은 대조구(L)은 100일 개발포장구(CA)는 130일로 예측되었으며 30일 정도 품질유지기간이 대조구보다 길게 나타남을 확인했다. 저장 중 중량 감소는 저장 120일 후에 대조구(L)은 1% 내외였고 개발포장구(CA)는 1.6%였다. Vitamin C함량은 개발포장구(CA)에서 Vitamin C 잔존량이 17% 정도 더 높게 유지되고 있었다. 당도는 개발포장구(CA) 보다 대조구(L)에서 더 높게 나타났고 산도는 대조구(L)보다 개발포장구(CA)에서 더 높게 나타났다. 포장재 내의 에칠렌 가스 농도는 저장 120일 후에는 대조구(L)은 89.5 ppm을 개발포장구(CA)는 73.6 ppm으로 대조구(L)보다 개발포장구(CA)에서 15.9 ppm 낮게 나타났다. $O_2$ 가스의 경우 저장 120일 후 대조구(L)은 9.5%였고 개발포장구(CA)는 10.9%로 나타나 대조구보다 1.4% 높게 유지되고 있었다. $CO_2$ 가스의 경우 저장 120일후 대조구(L)은 7.5%였고 개발포장구 C는 6.5%를 나타내 대조구(L)보다 개발포장구(CA)에서 1% 더 낮게 유지되고 있었다. 이상의 결과에서 개발한 MA필름을 감귤의 선도유지용 포장재로 활용할 수 있음이 입증되었다. 또한 수분응축현상이 생기지 않도록 수분응축억제 처리한 필름을 처리하지 않은 필름과 비교해 보았을 때, 신선도에는 큰 영향이 없지만 상품성유지에는 도움이 될 것으로 판단되었다.
Change in intracellular $Ca^{2+}$-concentration ($[Ca^{2+}]_i$) is an essential event for egg activation and further development. $Ca^{2+}$ ion is originated from intracellular $Ca^{2+}$-store via inositol 1,4,5-triphosphate receptor and/or $Ca^{2+}$ influx via $Ca^{2+}$ channel. This study was performed to investigate whether changes in $Ca^{2+}$/calmodulin dependent protein kinase II (CaM KII) activity affect $Ca^{2+}$ influx during artificial egg activation with ethanol using $Ca^{2+}$ monitoring system and whole-cell patch clamp technique. Under $Ca^{2+}$ ion-omitted condition, $Ca^{2+}$-oscillation was stopped within 30 min post microinjection of porcine sperm factor, and ethanol-induced $Ca^{2+}$ increase was reduced. To investigate the role of CaM KII known as an integrator of $Ca^{2+}$- oscillation during mammalian egg fertilization, CaM KII activity was tested with a specific inhibitor KN-93. In the eggs treated with KN-93, ethanol failed to induce egg activation. In addition, KN-93 inhibited inward $Ca^{2+}$ current ($I_{Ca}$) in a time-dependent manner in whole-cell configuration. Immunostaining data showed that the voltage-dependent $Ca^{2+}$ channels were distributed along the plasma membrane of mouse egg and 2-cell embryo. From these results, we suggest that $Ca^{2+}$ influx during fertilization might be controlled by CaM KII activity.
Voltage-sensitive release mechanism was pharmacologically dissected from the $Ca^{2+}-induced\;Ca^{2+}\;release$ in the SR $Ca^{2+}$ release in the rat ventricular myocytes patch-clamped in a whole-cell mode. SR $Ca^{2+}$ release process was monitored by using forward-mode $Na^+-Ca^{2+}$ exchange after restriction of the interactions between $Ca^{2+}$ from SR and $Na^+-Ca^{2+}$ exchange within micro-domains with heavy cytosolic $Ca^{2+}$ buffering with 10 mM BAPTA. During stimulation every 10 s with a pulse roughly mimicking action potential, the initial outward current gradually turned into a huge inward current of $-12.9{\pm}0.5\;pA/pF$. From the inward current, two different inward $I_{NCX}s$ were identified. One was $10\;{\mu}M$ ryanodine-sensitive, constituting $14.2{\pm}2.3%$. It was completely blocked by $CdCl_2$ (0.1 mM and 0.5 mM) and by $Na^+-depletion$. The other was identified by 5 mM $NiCl_2$ after suppression of $I_{CaL}$ and ryanodine receptor, constituting $14.8{\pm}1.6%$. This latter was blocked by either 10 mM caffeine-induced SR $Ca^{2+}-depletion$ or 1 mM tetracaine. IV-relationships illustrated that the latter was activated until the peak in $30{\sim}35\;mV$ lower voltages than the former. Overall, it was concluded that the SR $Ca^{2+}$ release process in the rat ventricular myocytes is mediated by the voltage-sensitive release mechanism in addition to the $Ca^{2+}-induced-Ca^{2+}\;release$.
Atrial myocytes have two functionally separate groups of ryanodine receptors (RyRs): those at the periphery colocalized with L-type $Ca^{2+}$channels (DHPRS) and those a t the cell interior not associated with DHPRs. $Ca^{2+}$ current ($I_{ca}$) directly gates peripheral RyRs on action potential and the subsequent peripheral $Ca^{2+}$ release propagates into the center of atrial myocytes. The mechanisms that regulate the $Ca^{2+}$+ propagation wave remain Poorly understood. Using 2-D confocal$Ca^{2+}$ imaging, we examined the role of inositol 1,4,5-trisphosphate receptor (IP $_3R$) and mitochondria on ($I_{ca}$)- gated local $Ca^{2+}$ signaling in rat atrial myocytes. Blockade of IP $_3R$ by xestospongin C (XeC) partially suppressed the magnitudes of I ca-gated central and peripheral $Ca^{2+}$ releases with no effect on $I_{ca}$. Mitochondrial staining revealed that mitochondria were aligned with ${\thickapprox}2-{\mu}m$ separations in the entire cytoplasm of ventricular and atrial myocytes. Membrane depolarization induced rapid mitochondrial $Ca^{2+}$ rise and decay in the cell periphery with slower rise in the center, suggesting that mitochondria may immediately uptake cytosolic $Ca^{2+}$, released from the peripheral SR on depolarization, and re-release the $Ca^{2+}$ into the cytosol to activate neighboring central RyRs. Our data suggest that the activation of IP $_3R$ and mitochondrial $Ca^{2+}$ handing on action potential may serve as a cofactor for the $Ca^{2+}$ propagation from the DHPR-coupled RyRs to the DHPR-uncoupled RyRs with large gaps between them.
Gabriela Leite de Souza;Thamara Eduarda Alves Magalhaes;Gabrielle Alves Nunes Freitas;Nelly Xiomara Alvarado Lemus;Gabriella Lopes de Rezende Barbosa;Anielle Christine Almeida Silva;Camilla Christian Gomes Moura
Restorative Dentistry and Endodontics
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제47권4호
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pp.38.1-38.15
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2022
Objectives: This study investigated the cytotoxicity, radiopacity, pH, and dentinal tubule penetration of a paste of 1.0% calcium-doped zinc oxide nanocrystals (ZnO:1.0Ca) combined with propylene glycol (PRG) or polyethylene glycol and propylene glycol (PEG-PRG). Materials and Methods: The pastes were prepared by mixing calcium hydroxide [Ca(OH)2] or ZnO:1.0Ca with PRG or a PEG-PRG mixture. The pH was evaluated after 24 and 96 hours of storage in deionized water. Digital radiographs were acquired for radiopacity analysis and bubble counting of each material. The materials were labeled with 0.1% fluorescein and applied to root canals, and images of their dentinal tubule penetration were obtained using confocal laser scanning microscopy. RAW264.7 macrophages were placed in different dilutions of culture media previously exposed to the materials for 24 and 96 hours and tested for cell viability using the MTT assay. Analysis of variance and the Tukey test (α = 0.05) were performed. Results: ZnO:1.0Ca materials showed lower viability at 1:1 and 1:2 dilutions than Ca(OH)2 materials (p < 0.0001). Ca(OH)2 had higher pH values than ZnO:1.0Ca at 24 and 96 hours, regardless of the vehicle (p < 0.05). ZnO:1.0Ca pastes showed higher radiopacity than Ca(OH)2 pastes (p < 0.01). No between-material differences were found in bubble counting (p = 0.0902). The ZnO:1.0Ca pastes had a greater penetration depth than Ca(OH)2 in the apical third (p < 0.0001). Conclusions: ZnO:1.0Ca medicaments presented higher penetrability, cell viability, and radiopacity than Ca(OH)2. Higher values of cell viability and pH were present in Ca(OH)2 than in ZnO:1.0Ca.
Effects of dietary calcium lactate (CaL-A) and Chungkukjang (Korean native fermented soybean) on bone mass, calcium status, body weight, serum glucose and cholesterol levels in young male rats were investigated. Chungkukjang was fermented by mixing 4 types of Bacillus sp., and then dried at 45$^{\circ}C$. Calcium lactate was prepared from the ash of black snail. The rats were fed a commercial rat diet for 1 week and then the experimental diets for 4 weeks. Animals were divided into four dietary groups: one calcium-deficient diet (Ca-De) and one of three with calcium supplemented diets (5 g calcium/kg diet) with either calcium phosphate (Ca-P), CaL-A, or CaL-A + Chuntkukjang (CaL-AC). Calcium supplemented diets contained 39 g Ca-P/kg diet and 28 g/kg of calcium lactate in the CaL-A and CaL-AC diets. Body weight gains during the 4 weeks in the Ca-P, CaL-A, CaL-AC and Ca-De groups were 130.45 g,112.50 g, 143.40 g and 10.20 g, respectively. Feed consumption of the groups from high to low was CaL-AC > Ca-P > CaL-A > Ca-De. The Ca-De group had low femur weights and low serum calcium concentrations, while they were comparatively high in CaL-AC, Ca-P and CaL-A groups. The Ca-De groups excreted less calcium in urine than did the other rats, probably due to increased absorption of the mineral in Ca-P, CaL-A and CaL-AC groups. Microscopic observations revealed that there were many regularly spaced holes in the femur of Ca-De group, while there were much smaller regularly spaced holes in Ca-P group. However, no holes in femur were observed in the CaL-A and CaL-AC groups. Bone surfaces were especially smooth and clean in the CaL-AC group. Serum concentrations of glucose and total cholesterol were remarkably lower in the CaL-AC group than in the other supplemented groups. These results suggest that calcium from CaL-A has higher bioavailability than from Ca-P, and dietary Chungkukjang may have a beneficial effect on calcium metabolism.
CAS계 유리에 $CaCO_3-Al_2O_3$ 혼합물 및 화합물을 10, 30 wt% 첨가하여 저온 소걸 및 마이크로파 유전 특성을 고찰하였다. CAS계 유리의 연화온도는 $841^{\circ}C$ 이며, CAS계 유리에 $CaCO_3$ 와 30 wt%의 $CaCO_3-Al_2O_3$ 혼합물을 melting되며, 10 wt%의 $CaCO_3$, $Al_2O_3$, $1CaCO_3-1Al_2O_3$ 혼합물 및 $CaAl_2O_4$ 화합물를 10 wt% 첨가하였을 때 $900^{\circ}C$ 이하에서 소걸이 가능하였다. 복합체의 XRD 상 분석 결과, CaCO3를 첨가하였을 때에는 모든 조성이 비정질을 나타내었고, $Al_2O_3$와 $1CaCO_3-1Al_2O_3$ 혼합물은 $Al_2O_3$ 결정상이 생성되었고, $CaAl_2O_4$ 화합물은 $CaAl_2Si_2O_8$의 hexagonal와 anorthite 결정상이 생성되었다. 따라서 CAS-10 (A, C-A, CA) 복합체는 $900^{\circ}C$에서 각각 유전율 ($\varepsilon_r$) 6.4, 6.9, 5.15 와 품질계수 ($Q^*f$) 2,400, 1,500, 3,000의 마이크로파 유전 특성을 나타내어 LTCC 기판 재료로 사용이 가능하며, 특히 $CaAl_2O_4$ 화합물을 사용하였을 때 가장 우수한 유전 특성을 나타내는 것을 확인하였다.
Choi, Kyung Jin;Hwang, Jin Wook;Kim, Se Hoon;Park, Hyung Seo
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제26권3호
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pp.219-225
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2022
Glucagon like peptide-1 (GLP-1) released from enteroendocine L-cells in the intestine has incretin effects due to its ability to amplify glucose-dependent insulin secretion. Promotion of an endogenous release of GLP-1 is one of therapeutic targets for type 2 diabetes mellitus. Although the secretion of GLP-1 in response to nutrient or neural stimuli can be triggered by cytosolic Ca2+ elevation, the stimulus-secretion pathway is not completely understood yet. Therefore, the aim of this study was to investigate the role of reverse Na+/Ca2+ exchanger (rNCX) in Ca2+ entry induced by muscarinic stimulation in NCI-H716 cells, a human enteroendocrine GLP-1 secreting cell line. Intracellular Ca2+ was repetitively oscillated by the perfusion of carbamylcholine (CCh), a muscarinic agonist. The oscillation of cytosolic Ca2+ was ceased by substituting extracellular Na+ with Li+ or NMG+. KB-R7943, a specific rNCX blocker, completely diminished CCh-induced cytosolic Ca2+ oscillation. Type 1 Na+/Ca2+ exchanger (NCX1) proteins were expressed in NCI-H716 cells. These results suggest that rNCX might play a crucial role in Ca2+ entry induced by cholinergic stimulation in NCI-H716 cells, a GLP-1 secreting cell line.
복숭아 백도 품종에 칼슘의 효과를 평가하기 위해 $CaCl_2$을 포장에서 엽면시비 하였다. 엽면시비는 $CaCl_2$ 단용 살포와 $CaCl_2(Ca:\;400mg.kg^{-1})$ 과 보조제(amino acid: $2g.kg^{-1}$, phytic acid: $2ml.kg^{-1}$ 및 wood vinegar: $2g.kg^{-1}$)를 혼용하여 6월 21부터 7월 4일까지 7일 간격으로 4번 살포하였다. 수확기에 잎과 과실에 Ca함량, 과실 강도, 당도, Monilinia fructicola에 의한 잿빛무늬병을 조사하였다. 저장 과실의 품질조사는 실온에서 14동안 저장 후 Ca 함량, 과실의 강도, 당도 및 자연부패 율을 조사하였다. 수확기 잎과 과실에 Ca 함량은 $CaCl_2+amino$ acid 처리구에서 가장 높았으나(P=0.05), 과피에 Ca 함량은 처리구간에 유의차이가 없었다. 과실경도는 $CaCl_2+amino$ acid 처리구에서 가장 높았다(P=0.05). 실온에서 14일 저장기간 중 자연부패(Rhizopus stolonifers)에 의한 부패 율은 $CaCl_2+wood$ vinegar 처리구에서 가장 낮았다. 과실의 경도는 $CaCl_2$와 보조제를 혼용 처리한 구에서 높았다. 포장에서 잿빛무늬병의 발생 억제율과 잿빛무늬병원균(Monilinia fructicola)으로 인공 접종한 실내시험에서 발병 억제율을 조사한 결과 $CaCl_2+phytic$ acid과 $CaCl_2+amino$ acid 처리한 구에서 가장 효과가 높았다. 이들 결과는 과실의 칼슘함량 과 과실경도 증가, 병 발생 억제 및 자연부패 방지는 $CaCl_2$과 보조제를 혼용하여 엽면 살포할 경우 정의 상관관계가 있다는 것을 제시하고자 한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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