Over expression of TGF-${\beta}1$ revealed the same phenotype as NFI-C deficient mouse. It has been reported that NFI-C deficient mice demonstrated abnormal odontoblast differentiation and aberrant dentin formation during root development. In the present study, in order to investigate the histological differences between wild type (WT) mouse and NFI-C deficient mouse, we compared morphological characteristics and smad4 expression between those mice. Hematoxyline-eosin (H-E) staining was used to investigate morphological changes and immunohistochemistry was also performed to observe the Smad4 expression pattern. In H-E staining, incisor of NFI-C deficient mouse showed an open area in the lingual root, irregular odontoblasts and osteodentin. Also, NFI-C deficient mouse showed short root and osteodentin in molar. In addition, Smad4 protein was strongly expressed in NFI-C deficient mouse compared with wild type. These findings suggest that NFI-C deficiency affects odontoblast differentiation and result in the formation of abnormal roots. Therefore, balancing between NFI-C and TGF-${\beta}$ signaling including Smad4 is important for the regulation of normal odontoblast differentiation and dentin formation.
Administration of dopamine agonist, apomorphine (2 mg/kg, s.c.), produces cage climbing behavior in mice that exhibit typical dopaminergic stimulation. The present study investigated the pCREB expression level in several brain regions following apomorphine treatment in order to determine whether the increased the dopaminergic activation produced by apomorphine accompanies the changes in pCREB immunoreactivity. A mouse brain was removed at 0min, 10 min, 30 min, 1 h, 2 h, 7 h, and 24 h after apomorphine treatment. The brain tissue was fixed by an intracardiac perfusion with ice-cold 4% paraformaldehyde in PBS. Immunohistochemical study was conducted using the ABC-DAB method. The data showed that the immunoreactivity of pCREB increased in the striatum, nucleus-accumbens, piriform cortex and the dentate gyrus of the hippocampus of a mouse brain 30 min after the apomorphine treatment. Increased immunoreactivity began to diminish 2 h after the apomorphine treatment in all the brain regions measured. The time course for the pCREB immunoreactivity was similar to the behavioral response induced by the apomorphine treatment. These results suggest that activation of the dopamine receptor is accompanied by an increase in pCREB expression in the mouse brain.
These experiments were carried out to obtain basic information necessary for sexing embryos by chromosomal analysis. To observe metaphase chromosomes, all embryos developed to blastocysts were cultured in Ho, pp. & Pitts' medium containing 0.001% Colcemid under the gas phase of 5% CO2 in air at 37$^{\circ}C$ for 2 hours. The sex chromosome of mouse embryos shown normal development after culture in medium containing H-Y antiserum (10%, v/v) and complement (20%, v/v) also was confimed by chromosomal analysis. The results obtained in these experiments were summarized as follows: 1. Among 89 mouse blastocysts, the number of embryos identified to have XX and XY chromosome was 22(25%) and 25(28%), respectively and 42(47%) embryos were not identified. 2. Of total 40 mouse balstocysts cultured in medium containing H-Y antiserum and complement, 23(58%) embryos which were able to be discriminated their sex chromosomes were identified to be XX bearing embryos. 3. Sex chromosomes of a number of embryos subjected to chromosomal analysis were not identified. This result may be due to absence or poor quality of metaphase spreads.
The study was conducted to find out the gene effects on litter size and birth weights in mice with 362 progenies from full-diallel crosses of four lines of BALB/c, CBA, C3H and C57BL. The progenies were farrowed at the Experimental Animal Farm, College of Agriculture, Kyungpook National University in November, 1984, and data were analyzed into general combining ability, specific combining ability and reciprocal effects with Griffing's model. General combining ability effects estimated in line-crosses were -0.4163~0.3337 for litter size and -0.0356~0.0894 for birth weights. However, no significant differences were observed in general combining ability effects on litter size and birth weights. Specific combining ability effects estimated in line-crosses were -1.0388~1.7913 for litter size and -0.1144~0.1343 for birth weights. However, the specific combining ability effects for litter size and birth weights appeared to be insignificant. The reciprocal effects, which appeared to be significant, were -2.26 from BALB/c ${\times}$ C3H, 1.84 from CBA ${\times}$ C57BL and -1.50 from BALB/c ${\times}$ CBA for litter size. For birth weights, the reciprocal effects were estimated -0.26 from CBA ${\times}$ C57BL, 0.15 from BALB/c ${\times}$ CBA and -0.15 from BALB/c ${\times}$ C57BL.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2011.02a
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pp.20-20
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2011
It has been known that, under certain conditions, application of low-temperature atmospheric-pressure plasmas can enhance proliferation of cells. In this study, conditions for optimal cell proliferation were examined for various cells relevant for orthopaedic applications. Plasmas used in our experiments were generated by dielectric barrier discharge (DBD) with a helium flow (of approximately 3 litter/min) into ambient air at atmospheric pressure by a 10 kV~20 kHz power supply. Such plasmas were directly applied to a medium, in which cells of interest were cultured. The cells examined in this study were human synoviocytes, rat mesenchymal stem cells derived from bone marrow or adipose tissue, a mouse osteoblastic cell line (MC3T3-E1), a mouse embryonic mesenchymal cell line (C3H-10T1/2), human osteosarcoma cells (HOS), a mouse myoblast cell line (C2C12), and rat Schwann cells. Since cell proliferation can be enhanced even if the cells are not directly exposed to plasmas but cultured in a medium that is pre-treated by plasma application, it is surmised that long-life free radicals generated in the medium by plasma application stimulate cell proliferation if their densities are appropriate. The level of free radical generation in the medium was examined by dROMs tests and correlation between cell proliferation and oxidative stress was observed. Other applications of plasma medicine in orthopaedics, such as plasma modification of artificial bones and wound healing effects by direct plasma application for mouse models, will be also discussed. The work has been done in collaboration with Prof. H. Yoshikawa and his group members at the School of Medicine, Osaka University.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.37
no.5
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pp.612-617
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2008
Tetrodotoxin (TTX) analogues were first determined from the liver extracts of puffer fish, Takifugu niphobles, by LC/MS with Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography (HILIC). In total, 7 TTX analogues were detected within 20 minutes as follows; 5,6,11-trideoxyTTX (34.0%, 1,029.6 nmol/g), 6,11-dideoxyTTX (29.3%, 887.6 nmol/g), TTX (22.1%, 667.8 nmol/g), 4,9-anhydro-TTX (11.2%, 339.3 nmol/g), 11-deoxyTTX+5-deoxyTTX (2.6%, 78.6 nmol/g), and 4-epiTTX (0.8%, 23.6 nmol/g). Mouse toxicity of diluted liver extracts showed the highest toxicity at pH 3 (8.7 MU/mL) and decreased, as increasing pH, to 1.4 MU/mL at pH 10. At acidic (pH 5) and neutral conditions (pH 7), mouse toxicity of liver extracts (79 MU/mL) decreased slowly, as increasing temperature from $80^{\circ}C$ to $115^{\circ}C$, and time until 1 hour; in contrast, at the akaline condition (pH 9), the toxicity decreased rapidly to the more than half within 10 minutes. Individual toxicity of the fillet of T. niphobles were between $43.2{\sim}106.7$ MU, and $64{\sim}78%$ of its toxicity was eluted to soup when boiled with 3 volumes of water during 10 minutes.
These experiments were carried out to clarify the optimalconditions and interspecific cross reaction of H-Y antibody activity. H-Y antiserum was prepared in inbred SD female rats and Balb/c female mice by repeated immunization of rat newborn testis homogemate, rat and mouse spleen cells obtained from males of same strain. The activity of H-Y antibody in antiserum was tested by ELISA and biological tests. The cross reactivity of H-Y antibody was confirmed by culturing mouse and rabbit embryos in medium containing H-Y antibody and complement obtained from rat and guinea pig, respectively. The optimal condition for the activity of H-Y antibody was also investigated by culturing embryos in medium with different pH and complement concentration. The results obtained in these experiments were summarized as follows: 1. The formation rates of H-Y antibody in rats immunized with newborn testis and spleen cell were 40.0 and 50.0% respectively, and that in mouse immunized with spleen cell was 48.4%. 2. The activity of H-Y antibody was not affected by pH in range of 6.5 to 8.0, and the same was true for the relative concentration of complement to the H-Y antibody. 3. Minimum time needed for the activity of H-Y antibody was confirmed to be 0.5 to 1 hour and 24 to 48 hours respectively for the zona free embryos and intact embryos. 4. When mouse and rabbit embryos were treated with H-Y antibody obtained from rat, 46.4 and 54.8% of embryos were retarded or destroyed. From these results it could be said that H-Y antibody had strong interspecific cross reactivity.
Park, Sung-Baek;Park, Kee-Sang;Lee, Taek-Hoo;Chun, Sag-Sik;Song, Hai-Bum
Proceedings of the KSAR Conference
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2003.06a
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pp.66-66
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2003
The aim of this study was to investigate effect of different energy substrates on embryonic development of mouse embryos. Two cell embryos, recovered from ICR female mice (4 weeks old) at 44~52hrs after hCG injection (mated just after hCG injection), were cultured fur 72 hrs in the medium (MEM) supplemented with the three different energy substrates [glucose(G), pyruvate(P) and lactate(L)] and combinations (Control: 0 mM: group A: G 0.5; B: G 3.15; C: P 0.1; D: P 0.32; E: L 5.87; F: L 10.5; G: G0.5+P0.32+L10.5; H: G3.15+P0.1+L5.87; I: G0.5+P0.1+L5.87; J: G3.15+P0.32+L10.5). Blastocysts were stained differentially using PI and bisbenzimide. The 69.8% of the 2 cell embryos cultured in group F were developed the blastocysts. This was the highest (NS) than all other tested groups (44.2~62.8%). Blastocysts, cultured in the group E (60.4$\pm$26.9) and G (58.1$\pm$26.3), had significantly(p<0.05: group E vs. control, B, C, D; G vs. control, A, B, C, D) higher mean cell number compared with the other (42.6$\pm$25.8 ~ 55.2$\pm$31.3) and control (42.6$\pm$25.8) was at the basal level. The proportion of ICM (% ICM of total cells) in blastocysts cultured in group B (26.0$\pm$9.5%), C (29.6$\pm$22.8%) and J (26.0$\pm$11.8%) were significantly higher (p<0.05: control vs. group B, C, J: A vs. C, J; C vs. D, E, I) than those of other tested groups (15.0$\pm$10.6 ~ 23.8$\pm$ 12.9%) and control (15.0$\pm$10.6%) was at the basal level. These results showed that energy substrates supported the development of mouse 2 cell embryos, especially with greater embryo development in high dose of lactate added to media.
These experiments were carried out to clarify the effects various kinds of cryoprotectants which were frequently used in freezing embryos of domestic animals on the survival of frozen-thawed mouse embryos. As cryoprotectant, glycerol, DMSO and methanol were used and the procedures of adding them in medium were practiced by one-step or six-step adding method. Morphologically normal mouse embryos developed to blastocyst by in vitro culture after freezing and thawing were transferred to pseudopregnant recipients by surgical procedures. The results obtained in these experiments were summarized as follows: 1. The survival rates of the frozen-thawed 8-cell embryos, morulas and blastocysts following one-step addition of glycerol were 83.6, 80.3 adn 70.3%, respectively, while following six-step addition of glycerol, 69.2, 56.3 and 66.7% respectively. 2. When glycerol, DMSO and methanol were used as cryoprotectant under the same condition of freezing and thawing, the survival rates of frozen-thawed embryos were 74.0, 76.1 and 37.6%, respectively. 3. The implantation rate of embryos transferred to pseudopregnant recipients after freezing and thawing was 49.2%.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.22
no.4
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pp.489-493
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1993
The major objective of this study carried out was to compare the binding of Kintoki bean lectin (KBL) and Taro tuber lectin (TTL) to the mouse intestinal segments using $^3$H-labeled lectins and to assess the effect of such binding on the ability of the small intestine. Binding of $^3$H-KBL or $^3$H-TTL was studied under various conditions of time course, temperature, concentration, pH and additives of sugars, EDTA or unlabeled native lectin. The interaction of the lectins to intestinal tissue was stronger in KBL than in TTL, which was supposed to be the major reason for the stronger antinuritional enen of KBL. The optimal binding conditions were at 37$^{\circ}C$ for 60mins and at pH 7. The binding of both lectins were inhibited by fetuin and EDTA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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