On the purpose of epidemiological survey related to foods poisoning, a total of 316 specimens collected from street vended foods in Pusan area were examined for the presence of Campylobacter Jejuni(C. jejuni) and also the isolation rates, biochemical properties and antibiotic susceptibility were investigated. Of the 316 specimens, 13 strain(4.1%) of Campylobacter jejuni were isolated. Isolation rate for each food was 37.5% in gizzard, 4.1% in Korean sausage and 3.9% in kimpop. Isolated C. jejuni were grouped as biotype I(84.6%), II(7.7%) and IV(7.7%). C. jejuni isolated from street vended foods were resistant to cephalothin(100%), penicillin(84.6%) and erythromycin(76.9%), but sensitive to gentamicin(92.3%), kanamycin(84.7%) and chloramphenicol(77.0%).
본 연구에서는 가장 빈번하게 발생하는 세균성 식중독의 원인균인 C. jejuni의 주 감염원인 계육에 대하여, 식품공전에 등재된 식품첨가물 중 유화제를 이용하여 계육에서 C. jejuni의 부착을 제어 할 수 있는 기술을 확보하고자 하였다. 8종의 유화제를 200 mg/mL의 농도에서 paper disc agar diffusion method로 C. jejuni에 대한 항균활성을 검색한 결과 L-7D, L-1695, polysorbate 20, polysorbate 80 등 4종의 유화제에서 생육억제환을 생성하였다. L-7D, L-1695, polysorbate 20, polysorbate 80 4종의 유화제를 25, 50, 100, 200 mg/mL의 농도에서 항균활성을 검색한 결과, 농도가 작아질수록 생육억제환의 크기도 줄어들었으며, 유화제 중 L-1695 샘플이 200 mg/mL에서 가장 큰 생육억제환을 생성하였다. pH 및 열에 대해 안정성을 측정한 결과 L-7D, L-1695, polysorbate 20, polysorbate 80 4종의 유화제 모두 pH 및 열에 안정성을 가지고 있다는 것을 확인하였다. 최소저해농도를 측정한 결과 다른 유화제 L-7D, polysorbate 20, polysorbate 80 샘플과 비교하였을때 L-1695 샘플이 1.56 mg/mL에서 가장 좋은 최소저해농도를 나타냈다. 최소살균 효과는 L-7D, L-1695, polysorbate 20, polysorbate 80 4종의 유화제 모두 나타나지 않았다. 접촉표면의 부착제어능력을 확인하기 위해서 stainless steel과 ceramic에서 실험한 결과, 두 접촉 표면 모두에서 L-1695 샘플 처리 시 가장 적은 생균수를 나타냈다. 앞선 실험의 종합적인 결과에 따라 L-1695 유화제를 최종적으로 선별하고, 계육 피부에 부착된 C. jejuni에 영향을 주는지 CLSM으로 분석한 결과 대조구에 비하여 conventional spray 및 electrostatic spray를 처리하였을 때 모공에 부착된 균이 대다 수 떨어졌음을 확인하였다. 그러나 생균수를 확인해 본 결과 conventional spray와 electrostatic spray 처리 시에는 유의한 차이가 나타나지 않았다. 위 결과들을 종합한 결과 C. jejuni KCTC 5327에 대하여 L-1695 유화제는 생육을 억제시키지만, 살균효과는 없는 것을 확인하였다. 그러나 L-1695 유화제는 식품접촉표면에서 캠필로박터균의 부착을 저해하는 특성을 갖고 있으며, 계육 피부에 인위접종된 C. jejuni를 효과적으로 감소시키는 것을 볼 때, 실제 도계공정에서 세척수에 포함시켜 C. jejuni의 제어에 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
This study was conducted to determine the epidemiological characteristics of Campylobacter enteritis. A total of 187 fecal specimens of Korean native goat were examined for the presence of C. jejuni and C. coli by direct plating. Fifty strains isolated were examined for biochemical and serological properties and susceptibility to 19 chemotherapeutic agents. A total of 29(15.5%) C. jejuni and 21 (11.2%) C. coli were isolated from the fecal specimen of 187 Korean native goats. Of the 50 isolates of C. jejuni and C. coli, 29 isolates of C. jejuni grouped as 7 biotypes (1,2,3,4,6,7 and 8) and biotypes 1(34.5%), 2(17.2%) and 3(20.7%) were encountered most frequently. Twenty-one C. coli strains were differentated into biotype I (61.9% of the isolates) and biotype II (38.1%). Of the 29 C. jejuni strains examined, 24(83.0%) were typable by the Lior serotyping scheme and five isolates were non typable. C. jejuni grouped as 8 serotypes, serotype 4(24.1%) and 26(20.7%) were encountered most frequently. In the case of 21 strains of C. coli grouped as 6 serotypes, the most frequent serotypes were 21(28.6%) and 25(23.8%). Total of 50 strains of isolated were all susceptible to amikacin, clindamycin and tobramycine. Overall 85% of isolates were sensitive to erythromycin, doxycycline, chloramphenicol, flume-quine, kanamycin, gentamicin, nalidixic acid, polymyxin B, colistin, tetracycline and ampicillin, but about 65% of isolates were resistant to cefamandole and ethyl hydrocuprein hydrochloride.
Kim, Joo-Sung;Lee, Eun-Jung;Cho, Eun-Ah;Kim, Yun-Ji
한국축산식품학회지
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제33권3호
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pp.317-324
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2013
Radio-frequency driven atmospheric pressure plasma using argon gas was studied in the inactivation of Campylobacter jejuni in order to investigate its applicability. First, the inactivation study was conducted on an agar surface. C. jejuni NCTC11168 was reduced by more than 7 Log CFU after an 88 s treatment. Another strain, ATCC49943, was studied; however, the inactivation was less efficient, with a 5 Log CFU reduction after a 2 min treatment. Then, chicken breast ham was studied at the $10^6$ CFU inoculation level. The inactivation efficiency was much lower for both strains compared to that on the agar plates. C. jejuni NCTC11168 and ATCC49943 were reduced by 3 Log CFU after a 6 min treatment and by 1.5 Log CFU after a 10 min treatment, respectively. The scanning electron microscopy analysis indicated that C. jejuni cells were deformed or transformed into coccoid form under the plasma treatment. During the plasma treatment, the temperature of the samples did not rise above $43^{\circ}C$, suggesting that heat did not contribute to the inactivation. Meanwhile, water activity significantly decreased after a 10 min treatment (p<0.05). This study conveyed that radio-frequency atmospheric pressure plasma can effectively inactivate C. jejuni with strain-specific variation.
Growth inhibition of Compylobacter jejuni ATCC 33291 was observed in the presence of various preservatives at various temperatures. The addition of ethanol (0.5% to 5%), hydrogen peroxide (0.05%), acetic acid (1%), propionic acid, benzoic acid, and sorbic acid showed strong antibacterial activities against C. jejuni at pH 5.5 or 6.5. The addition of 1% acetic acid and lactic acid were most effective at $42{\circ}C, followed by $25{\circ}C$ and $4{\circ}C$. This indicated that the inhibitory effect was temperature dependent. In the chicken model system, the practical death rate of C. jejuni in the FBP-media with 1% acetic temperatures ($4{\circ}$C$, $25{\circ}$C, and $42{\circ}$). Therefore, precaution has to be taken in the use of organic acids as a disinfectant in the chicken slaughterhouse.
인체장염 유발균으로 최근 문제가 되고 있는 미호기성 식중독균 Campylobacter jejuni의 오염 방지와 식품 속에서의 검출을 위한 실험으로서 두종의 인체 유래 C. jejuni를 이용하여 증균 선택배지에서의 증식과 우유, 닭고기등에서의 첨가 후의 잔존 양상을 온도별로 조사하였다. C. jejuni는 Supplemented Brucella Broth (SBB)에서 호기적 조건에서도 최적조건인 미호기적 배양에 비해 $60{\sim}80%$ (24시간)의 생육이 관찰되었다. SBB에 C. jejuni를 생균수가 $10^7{\;}cfu/mL$과 $10^3{\;}cfu/mL$ 되도록 접종하여 호기조건에서 42, 25, $5^{\circ}C$에서 7일간 배양하였을 때 $42^{\circ}C$에서는 $10^7{\;}cfu/mL$과 $10^3{\;}cfu/mL$ 접종시료 모두 $1{\sim}2$일 후 $>10^8$으로 급격히 증가하다가 7일에는 $>10^7$으로 유지되었다. $5^{\circ}C$에서는 배양 초기 접종된 량을 거의 유지하다가 7일 경과후에 $<1/2log_{10}$ 정도가 감소하였다. $25^{\circ}C$에서는 $1{\sim}2$일 이 후 급격히 감소하여 4일 이 후에는 균이 거의 검출되지 않는 수준이었다. 가열 처리된 우유와 잘게 썰은 닭고기에 $10^7/mL$ 되도록 균을 접종한 후 42, 25, $5^{\circ}C$에서 14일간의 생균수의 변화를 조사한 결과, 우유에서는 SBB에서와 유사한 결과를 보였고, 닭고기에서는 $42^{\circ}C$의 최적조건에서 4일 이후 균이 검출되지 않아 균의 생육이 유지된 $4^{\circ}C$의 냉장조건과 대조를 이뤘다. 이상의 결과에 의하여 C. jejuni가 오염된 식품이 유통되고 취급될 때 냉장온도에서 가장 그 생육이 안정하게 보존되며, 실온에서는 생육이 불안정하여, 식품에 따라 최적 온도에서도 생육 양상이 다르다는 것을 알 수 있었다.
Campylobacter, Arcobacter, Helicobacter는 분류학적으로 동일한 rRNA superfamily Ⅵ로 식중독 이외에도 위궤양, 위암, 유산 및 신경 장애를 유발한다. Campylobacter, Arcobacter, Helicobacter를 오염된 식품 등에서 선택적으로 검출하기 위해 PCR, multiplex-PCR, RFLP(restriction fragment length polymorphism)의 기법을 이용하였다. Campylobacter, Arcobacter, Helicobacter의 16S rRNA를 target으로 하는 CHA primer를 사용하여 동일한 PCR product의 검출할 수 있었다. C. jejuni와 C.coli를 A. butzleri와 H. pylori로부터 선택적으로 검출하기 위해 fla A gene을 target으로 하는 pg3, p50을 사용하였으며, A. butzleri는 23S rRNA를 target으로 하는 Arco2, Butz를 이용했다. 또한 H. pyloyi는 isocitrate dehydrogenase gene을 target으로 하는 icd1, icd2를 사용하였고, C. jejuni는 ceuE gene을 target으로 하는 JEJ1, JEJ2를 이용하여 효과적으로 분리검출이 이루어졌다. 또한 제한효소 Dde I 을 사용하여 PCR-RFLP를 통해 C. jejuni, C. coli를 A. butzleri, H. pylori로부터 분리할 수가 있었다. 따라서 이러한 primer를 이용하여 C. jejuni, C. coli, A. butzleri, H. pylori가 함께 오염되었을 때 각각 균주의 선택적인 검출이 가능할 것이다.
인체에 설사질환을 일으키는 Campylobacter jejuni에 대하여 염소 및 monochlorarmine의 살균효과를 측정하고 세포의 구조형태 및 단백질과 DNA에 대한 영향을 주사전자현미경과 전기영동방법으로 비교 관찰하였다. 0.5mg/l의 염소용액에서 15분간 처리했을 때에는 쉽게 6 log가 사멸되었다. 그리고 염소용액의 pH가 4.5에서 7.0, 10.0으로 높아짐에 따라 C. jejuni에 대한 염소의 살균효과는 점점 떨어졌다. 또한 monochloramine의 경우 0.5와 1.0mg/l에서 60분간 처리했을 경우 각각 2와 7 log의 세균이 사멸되었다. 살균제로 처리된 C. jejuni들은나선간균의 형태가 모두 구형으로 변하면서 세포표면의 파괴와 용균현상이 일어났고 서로 엉켜져 있는 예가 많았다. 그 효과는 사멸효과의 경우에서와 같이 monochloramine보다 염소처리군에서 더 심하였다. 살균제로 처리된 C. jejuni의 단백질과 DNA는 정상세포의 것에 비하여 전기영동상에서 차이가 나타났으며 260nm에서의 흡광도도 감소하였다. 특히 염소처리된 세포의 단백질과 DNA는 처리한 염소농도에 비례하여 큰 차이를 나타냈다.
LEE YOUNG-DUCK;MOON BO-YOUN;CHOI JUNG-PIL;CHANG HAK-GIL;NOH BONG-SOO;PARK JONG-HYUN
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권5호
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pp.992-1000
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2005
Campylobacter is one of the emerging foodborne pathogens, and its worldwide incidence rate is extremely high. This study was undertaken to isolate and identify Campylobacter strains from chicken carcasses in the local markets, and analyze their characteristics regarding oxygen tolerance. They were isolated after aerobic enrichment and identified by biochemical, physiological, and morphological characteristics, PCR, and 16S rDNA sequencing. Their oxygen tolerances were analyzed in terms of the cell surface hydrophobicity, cell fatty acid composition, and oxidoreductase. Five strains of C. jejuni were isolated and identified from 61 isolates from 50 chickens. Among them, C. jejuni IC21 grew well in Brucella broth and commercial milk under aerobic condition. However, in the aerobic exposure, the cell surface hydrophobicity of C. jejuni IC21 was almost the same as the other isolates, even though its morphology changed from the spiral-bacilli form into the coccoid form. Fatty acid analyses showed that all Campylobacter strains had a high composition of $C_{19:1}$, cyclopropane fatty acid, and that the amount of the other fatty acids were very similar between them. Interestingly, however, only oxidoreductase activities of C. jejuni IC21 increased highly under aerobic exposure even though its activities were almost the same as the other C. jejuni strains just after microaerobic culture. It had 11.8 times higher catalase activity, 4.4 times higher for SOD, and 2.0 times higher for NADH oxidase activities. Therefore, in the case of the aero-adaptive C. jejuni IC21, expression of oxidoreductase significantly increased under oxidative stressed condition, which might allow it to survive for a longer time and grow on food under aerobic exposure. Such new strain might be one of the explanations for the increase of campylobacteriosis.
Chicken are considered as the most important source of human infection by Campylobacter jejuni, which primarily arises from contaminated poultry meats. However, the genes expressed in vivo of the interaction between chicken and C. jejuni have not been screened. In this regard, in vivo-induced antigen technology (IVIAT) was applied to identify expressed genes in vivo during interaction between chicken and C. jejuni, a prevalent foodborne pathogen worldwide. Chicken sera were obtained by inoculating C. jejuni NCTC 11168 into Leghorn chickens through oral and intramuscular administration. Pooled chicken sera, adsorbed against in vitro-grown cultures of C. jejuni, were used to screen the inducible expression library of genomic proteins from sequenced C. jejuni NCTC 11168. Finally, 28 unique genes expressed in vivo were successfully identified after secondary and tertiary screenings with IVIAT. The genes were implicated in metabolism, molecular biosynthesis, genetic information processing, transport, regulation and other processes, in addition to Cj0092, with unknown function. Several potential virulence-associated genes were found to be expressed in vivo, including chuA, flgS, cheA, rplA, and Cj0190c. We selected four genes with different functions to compare their expression levels in vivo and in vitro using real-time RT-PCR. The results indicated that these selected genes were significantly upregulated in vivo but not in vitro. In short, the expressed genes in vivo may act as potential virulence-associated genes, the protein encoded by which may be meaningful vaccine candidate antigens for campylobacteriosis. IVIAT provides an important and efficient strategy for understanding the interaction mechanisms between Campylobacter and hosts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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