A study was undertaken to determine the thermal inactivation of Escherichia coli O157:H7 as influenced by the effects of temperature, time, suspension medium and ascorbate. Tryptic soy broth was more heat resistant than pfosphate buffer (pH 7.1), with D values of 1.52~1.68 min at 6$0^{\circ}C$ and 1.51~1.63 min at 7$0^{\circ}C$ compared with 1.52~1.65 min at 6$0^{\circ}C$ and 1.26~1.61 min at 7$0^{\circ}C$ for phosphate buffer as suspension medium. E. coli O157:H7 was completely inhibited within 30 min when small inoculum (106 CFU/$m\ell$) was heated at 7$0^{\circ}C$. When E. coli O157:H7 was preheated at 48$^{\circ}C$ for 60 min in phosphate buffer before heating, D values were 1.28~1.60 min at 6$0^{\circ}C$, and 1.13~1.56 min at 7$0^{\circ}C$, showing that preheating increases the heat resistance of the strain. Phosphate buffer containing ascorbate (0.001 M) was enhanced the thermal inactivation of the strain when inoculated as large inoculum (109 CFU/$m\ell$), while ascorbic acid was no effect at low cell concentrations (109 CFU/$m\ell$).
The Escherichia coli mixed-function serC-aroA operon encodes biosynthethic enzymes for unrelated pathways leading to the syntheses of serine and aromatic amino acids. It has been proposed that the operon is expressed in a cAMP-dependent manner. In this work experiments were performed to investigate the cAMP-dependent expression of the operon. Exogenous cAMP increased ${\beta}$-galactosidase synthesis in the $cya^+$ and cya strains harboring the serC-aroA-lac fusion plasmid. This enhancement was more dramatic in the $cya^-$ strain grown in a minimal medium. In a dot blot assay the serC-aroA mRNA content increased in a concentration-dependent pattern after the addition of exogenous cAMP. The activity of phosphoserine aminotransferase, encoded by the serC gene, apparently increased in E. coli cells after the addition of cAMP. All results obtained confirmed that the expression of the E. coli serC-aroA operon is positively regulated by cAMP at the level of transcription.
This experiment was designed to study the effects of temperature on the peroxidase isoenzymes of a mesophilic microorganism, Escherichia coli (grown within biokinetic zone). Optimum temperature for the growth of E. coli was $37{\circ}C.$ Three different temperatures, 20, 30 and $40{\circ}C,$ were selected. And the isoenzyme patterns of peroxidase of E. coli, growth respectively at each temperature, were analysed by disc electrophoresis. The sample of 20.deg.C showed 4 bands, that of 30.deg.C, 5 bands and that of 40.deg.C, 6 bands. Two dark bands (higher molecular weight, 56,000 and 54,000) and two light bands (lower molecular weight, 11,500 and 10,000) were constant at all samples. But two intermediate bands (M.W.44,000 and 34,000) were variable ; at $20{\circ}C,$ no banding pattern, one band 9M.W. 34,000) only at $30{\circ}C,$ and at $40{\circ}C$ two bands were appeared. And the shifts of growth temperatures between 30.deg.C and 40.deg.C showed the alteration of the isoenzyme patterns ; the isoenzyme patterns of the smaple of tmeperature shift from $30{\circ}C$ to $40{\circ}C$ were same as that of 40.deg.C and vice versa.
This study was conducted to determine the epidemiological characteristics of Campylobacter enteritis. A total of 187 fecal specimens of Korean native goat were examined for the presence of C. jejuni and C. coli by direct plating. Fifty strains isolated were examined for biochemical and serological properties and susceptibility to 19 chemotherapeutic agents. A total of 29(15.5%) C. jejuni and 21 (11.2%) C. coli were isolated from the fecal specimen of 187 Korean native goats. Of the 50 isolates of C. jejuni and C. coli, 29 isolates of C. jejuni grouped as 7 biotypes (1,2,3,4,6,7 and 8) and biotypes 1(34.5%), 2(17.2%) and 3(20.7%) were encountered most frequently. Twenty-one C. coli strains were differentated into biotype I (61.9% of the isolates) and biotype II (38.1%). Of the 29 C. jejuni strains examined, 24(83.0%) were typable by the Lior serotyping scheme and five isolates were non typable. C. jejuni grouped as 8 serotypes, serotype 4(24.1%) and 26(20.7%) were encountered most frequently. In the case of 21 strains of C. coli grouped as 6 serotypes, the most frequent serotypes were 21(28.6%) and 25(23.8%). Total of 50 strains of isolated were all susceptible to amikacin, clindamycin and tobramycine. Overall 85% of isolates were sensitive to erythromycin, doxycycline, chloramphenicol, flume-quine, kanamycin, gentamicin, nalidixic acid, polymyxin B, colistin, tetracycline and ampicillin, but about 65% of isolates were resistant to cefamandole and ethyl hydrocuprein hydrochloride.
Penicillin G amidase (PGA, benzylpenicillinaminohydrolase, EC 3.5.1.11) is industrially important enzyme which converts penicillin G to 6-aminopenicillanic acid (6-APA) and phenylacetic acid (PAA). The PGA in E. coli ATCC 11105 is secreted into the periplasm after removing signal sequences and becomes heterodimer which composed of two subunits, small subunit (24 kDa) and large subunit (65 kDa). In this study, the PGA gene was obtained from E. coli ATCC 11105 using PCR (polymerase chain reaction) technique. The active PGA was successfully secreated into periplasm in E. coli BL2 1(DE3) harboring pET-pga plasmid. The optimized fed-batch fermentation, consisting of a three-step shift of culture temperature from $37^{\circ}C$ to $22^{\circ}C$, gave a productivity of 19.6 U/mL with a cell growth of 62 O.D. at 600 nm.
The present study was carried out to investigate the incidence of C jejuni and C coli in chicken. Also were examined the pathogenicity of the isolates in chick by experimental inoculation. Thermophilic Campylobacter were isolated from 34(45.9%) of the 74 specimens, and classified as 21.6% C jejuni, and 24.3% C coli. In the biotyping of 16 stranis of C jejuni isolates, 37.5% of the strains were grouped as biotype I, 62.5% as biotype II. In the case of 18 strains of C coli isolates, 49.9% of isolates were grouped as biotype I, 55.6% as biotype II. n oral inoculation with $10^4cfu$ of Campylobacter isolates into infant chicks(1 to 3 days-old), 17 days-old and 34 days-old chicks, 32.5% of the chicks developed diarrhea on day 1, 52.5% on day 3, 70.0% on day 5, and 27.5% on day 7, and the peak incidence of diarrhea was reached on day 5. The organisms were found to be discharged in feces one day afterwards. C jejuni and C coli strains were detected from the feces in 87.5% of the chicks on day 5. The organisms were multiplied from $10^4$ to $10^6cfu/gm$ in feces 5 to 7 days after inoculation. C jejuni and C coli recovered from 100% of the cecum, 64.3% of the duodenum, 50.0% of the spleen, 42.9% of the livers, and from 21.4% of gallbladders 7 days after inoculation.
The antibacterial effect of low concentrations of oregano (Origanum vulgare L.) in culture broth against Escherichia coli O157:H7 and Staphylococcus aureus 196E was tested at 35,5 and -20$^{\circ}C$. Tryptic soy broth (TSB) containing 0∼2% (w/v) of oregano was inoculated with 10$\^$6/∼10$\^$7/ CFU/$m\ell$ of E. coli or S. aureus and incubated at each temperature. The growth of E. coli was not inhibited at 0.1∼1.0% oregano and the growth occured at 2% oregano but only after a prolonged lag period. The death rate of E. coli after stationary phase was increased with increasing concentration of oregano in culture broth. The growth of S. aureus was inhibited with increasing concentration of oregano at 35$^{\circ}C$. Growth of S. aureus occured at the presence of 0.3∼0.5% oregano after a long lag period while the viability at 1.0∼2.0% was decreased during storage at 35$^{\circ}C$. During refrigerated storage at 5$^{\circ}C$, inhibition of E. coli or S. aureus was increased with the progress of time and increasing spice concentration. At the presence of 0.5∼2.0% oregano, E. coli and S. aureus were dead after 20 and 16 days of refrigerated storage, respectively. During frozen storage at -20$^{\circ}C$, the antibacterial activity of oregano against E. coli was increased with increasing storage time and spice concentration while the antibacterial activity against S. aureus was effective during the early period of storage, and no changes in the population of S. aureus occurred at different concentrations of oregano during frozen storage. Viable counts of E. coli were 1/3∼l/7 and S. aureus were 1/18∼l/46 of the control at 0.1% oregano in culture broth during frozen storage.
A cellulase gene of Clostridium themocellum was transferred to Escherichia coli by molecular cloning with pBR322. The gene was carried in a Hind III digested DNA sequence of about 1.8 kb. This Rind III fragment expressed activities on carboxymethyl cellulose (CMC) and on filter gaper in E. coli. The expression of clostridial cellulase gene in E. coli was studied and compared with the pro-ducts of cellulase genes in C. themocellum.
Water-soluble glucan was produced by mutants of E. coli BL21(DE)/CrdS-F and E. coli BL21(DE)/CrdS-C in a fermentor. Mutants of E. coli BL21(DE)/CrdS-F which has putative ${\beta}-1,3-glucan$ synthase catalytic subunit (gi:40556679) gene and E. coli BL21(DE)/CrdS-C which contains the active catalytic domain of partial curdlan synthase gene. The molecular weight of water-soluble glucan was analysed with HPLC.
In this study, we developed kinetic models to predict the growth of pathogenic Escherichia coli on cheeses during storage at constant and changing temperatures. A five-strain mixture of pathogenic E. coli was inoculated onto natural cheeses (Brie and Camembert) and processed cheeses (sliced Mozzarella and sliced Cheddar) at 3 to 4 log CFU/g. The inoculated cheeses were stored at 4, 10, 15, 25, and $30^{\circ}C$ for 1 to 320 h, with a different storage time being used for each temperature. Total bacteria and E. coli cells were enumerated on tryptic soy agar and MacConkey sorbitol agar, respectively. E. coli growth data were fitted to the Baranyi model to calculate the maximum specific growth rate (${\mu}_{max}$; log CFU/g/h), lag phase duration (LPD; h), lower asymptote (log CFU/g), and upper asymptote (log CFU/g). The kinetic parameters were then analyzed as a function of storage temperature, using the square root model, polynomial equation, and linear equation. A dynamic model was also developed for varying temperature. The model performance was evaluated against observed data, and the root mean square error (RMSE) was calculated. At $4^{\circ}C$, E. coli cell growth was not observed on any cheese. However, E. coli growth was observed at $10{\circ}C$ to $30^{\circ}C$C with a ${\mu}_{max}$ of 0.01 to 1.03 log CFU/g/h, depending on the cheese. The ${\mu}_{max}$ values increased as temperature increased, while LPD values decreased, and ${\mu}_{max}$ and LPD values were different among the four types of cheese. The developed models showed adequate performance (RMSE = 0.176-0.337), indicating that these models should be useful for describing the growth kinetics of E. coli on various cheeses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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