An auxin-producing bacterium, Klebsiella michiganensis Jopap-1, was isolated from a button mushroom bed in Buyeo-Gun, Chungcheongnam-Do. The strain Jopap-1 was classified as a novel strain of K. michiganensis based on a chemotaxonomic and phylogenetic analysis. The isolated K. michiganensis Jopap-1 was confirmed to produce indole-3-acetic acid (IAA), which is one of auxin hormones by TLC and HPLC analyses. The maximum concentration of IAA ($96.05mg\;L^{-1}$) was detected in the culture broth incubated in R2A medium containing 0.1% L-tryptophan for 48 h at $35^{\circ}C$ by HPLC quantity analysis. A negative relationship between IAA production and pH variation was estimated to show that the increase of IAA caused acidic pH in the culture. The effect of the supplement on L-tryptophan (precursor of IAA) production was observed to be highest at 0.1% concentration, but was significantly lowered above a concentration of 0.2%. To investigate the growth-promoting effects on the crops, the culture broth of E. michiganensis Jopap-1 was infected to water cultures and seed pots of mung bean and lettuce. Consequently, the adventitious root induction and root growth of mung bean and lettuce were observed to be 2.1 and 1.8 times higher than those of the control.
${\gamma}$-Aminobutyric acid(GABA) is a four carbon non-protein amino acid that has several well-known physiological functions, such as a postsynaptic inhibitory neurotransmitter in the brain and induction of hypotensive and tranquilizer effects. A lactic acid bacterium was isolated from button mushroom bed, which is showing high GABA productivity by TLC or HPLC analysis. The strain was identified as Lactobacillus hilgardii by analysis of 16S rDNA gene sequence. When the maximum production of GABA by L. hilgardii was investigated with various concentration of monosodium glutamate, the yield of GABA reached to be 53.65 mM at 1% mono sodium glutamate (MSG) in flask cultivation. A Glutamate decarboxylase (GAD) enzyme, which was known to convert MSG to GABA, was purified from a cell-free extract of L. hilgardii and the molecular weights of purified GAD was estimated to 60,000 by SDS-PAGE. The optimum pH and temperature of GAD were at pH4.6 and at $37^{\circ}C$, respectively. The GAD activity was increased by the addition of sulfate ions such as ammonium sulfate, sodium sulfate and magnesium sulfate, indicating that the increase of hydrophobic interaction causes the increase of GAD activity.
Kim, Sun-Joong;Seo, Hye-Kyung;Kong, Won-Sik;Yoon, Min-Ho
Journal of Mushroom
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v.11
no.4
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pp.187-193
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2013
A galactose fermentation bacterium producing lactose from red seaweed, which was known well to compromise the galactose as main reducing sugar, was isolated from button mushroom bed in Buyeo-Gun, Chungchugnamdo province. The lactic acid bacteria MONGB-2 was identified as Lactobacillus paracasei subsp. tolerans by analysis of 16S rRNA gene sequence. When the production of lactic acid and acetic acid by L. paracasei MONGB-2 was investigated by HPLC analysis with various carbohydrates, the strain MONGB-2 efficiently convert the glucose and galactose to lactic acid with the yield of 18.86 g/L and 18.23 g/L, respectively and the ratio of lactic acid to total organic acids was 1.0 and 0.91 g/g for both substrates. However, in the case of acetic acid fermentation, other carbohydrates besides galactose and red seaweed hydrolysate could not be totally utilized as carbon sources for acetic acid production by the strain. The lactic acid production from glucose and galactose in the fermentation time courses was gradually enhanced upto 60 h fermentation and the maximal concentration reached to be 16-18 g/L from both substrates after 48 h of fermentation. The initial concentration of glucose and galactose were completely consumed within 36 h of fermentation, of which the growth of cell also was maximum level. In addition, the bioconversion of lactic acid from the red seaweed hydrolysate by L. paracasei MONGB-2 appeared to be about 20% levels of the initial substrates concentration and this results were entirely lower than those of galactose and glucose showed about 60% of conversion. The apparent results showed that L. paracasei MONGB-2 could produce the lactic acid with glucose as well as galactose by the homofermentation through EMP pathway.
An auxin-producing bacterium Yangsong-1 was isolated from a button mushroom bed in Chung cheongnam-do. The strain Yangsong-1 was classified as a novel strain of Arthrobacter enclensis based on a chemotaxonomic and phylogenetic analysis. The isolated A. enclensis Yangsong-1 was confirmed to produce indole-3-acetic acid (IAA), which is one of the auxin hormones. When the concentration of IAA was assessed by HPLC quantity analysis, the maximum concentration of IAA, $152.903mg\;L^{-1}$, was detected from the culture broth incubated in R2A medium containing 0.2% L-tryptophan for 48 h at $35^{\circ}C$. A negative relationship between IAA production and pH was estimated to show that the increase in IAA caused pH acidification of the culture. The effect of the supplement on L-tryptophan, a known precursor of IAA production, appeared to be at maximal production at 0.2% concentration and was rather reduced at concentration above 0.4%. To investigate the growth-promoting effects on the crops, the culture broth of A. enclensis Yangsong-1 was placed in water cultures and seed pots of mung beans and lettuce. In consequence, the adventitious root induction and root growth of mung beans and lettuce were 1.5 and 1.9 times higher, respectively, than those of the control.
Lactic acid bacteria (LAB) producing phenyllactic acid (PLA), which is known as antimicrobial compound, was isolated from button mushroom bed and the isolated LAB was identified to Lactobacillus casei by 16 rRNA gene sequence analysis. Cell-free supernatant (CFS) from L. casei was assessed for both the capability to produce the antimicrobial compound PLA and the antifungal activity against three fungal pathogens (Rhizoctonia solani, Botrytis cinerea, and Collectotricum aculatum). PLA concentration was investigated to be 3.23 mM in CFS when L. casei was grown in MRS broth containing 5 mM phenylpyruvic acid as precursor for 16 h. Antifungal activity demonstrated that all fungal pathogens were sensitive to 5% CFS (v/v) of L. casei with average growth inhibitions ranging from 34.58% to 65.15% (p < 0.005), in which R. solani was the most sensitive to 65.15% and followed by C. aculatum, and B. cinerea. The minimum inhibitory concentration (MIC) for commercial PLA was also investigated to show the same trend in the range of 0.35 mg mL-1 (2.11 mM) to 0.7 mg mL-1 (4.21 mM) at pH 4.0. The inhibition ability of CFS against the pathogens were not affected by the heating or protease treatment. However, pH modification in CFS to 6.5 resulted in an extreme reduction in their antifungal activity. These results may indicate that antifungal activities in CFS was caused by acidic compounds like PLA or organic acids rather than protein or peptide molecules.
Button mushroom compost (BMC) was prepared by fermenting the mixture of waste button mushroom bed collected from Boryeong area in South Korea (4): sawdust (8) : pig and fowl manure (1) for 40 days at $30^{\circ}C$. The BMC compromised diverse microorganisms including aerobic bacteria $8.1{\times}10^6cfu\;g^{-1}$, Gram negative bacteria $1.7{\times}10^7cfu\;g^{-1}$, genus Bacillus $6.4{\times}10^6cfu\;g^{-1}$, genus Pseudomonas $1.5{\times}10^4cfu\;g^{-1}$, actinomycetes $1.0{\times}10^4cfu\;g^{-1}$, and fungi $3.5{\times}10^3cfu\;g^{-1}$. BMC was used as a microbial inoculant for estimating the mobilization of heavy metals in soil or plant. When metal solubilization potential of BMC was assessed in a batch experiment, the inoculation of BMC was shown to increase the concentrations of water soluble Co, Pb, Cd, and Zn by 29, 26, 27, and 43% respectively, than those of non-inoculated soils. BMC-assisted growth promotion and metal uptake in sunflower (Helianthus annuus) was also evaluated in a pot experiment. In comparison with non-inoculated seedlings, the inoculation led to increase the growth of H. annuus by 17, 15, 18, and 21% respectively in Co, Pb, Cd, and Zn contaminated soils. Moreover, enhanced accumulation of Co, Pb, Cd, and Zn in the shoot and root systems was observed in inoculated plants, where metal translocation from root to the above-ground tissues was also found to be enhanced by the BMC. The apparent results suggested that the BMC could effectively be employed in enhancing phytoextraction from the soils contaminated with heavy metals such as Co, Pb, Cd, and Zn.
Kim, Heon-Hee;Kim, Chan-Kyum;Han, Chang-Hoon;Lee, Chan-Jung;Kong, Won-Sik;Yoon, Min-Ho
Journal of Mushroom
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v.13
no.1
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pp.56-62
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2015
A lipase producing bacterium was isolated from button mushroom bed, which showing high clear zone on agar media containing Tributyrin as the substrate. The strain was identified as Burkholderia cepacia by analysis of 16S rDNA gene sequence. Crude lipase (CL) was partially purified from 70% ammonium sulfate precipitation using the culture filtrate of B. cepacia. Immobilized lipases were prepared by cross-linking method with CL from B. cepacia and Novozyme lipase (NL) onto silanized Silica-gel as support. Residual activitiy of the immobilized CL (ICL) and immobilized NL (INL) was maintained upto 61% and 72%, respectively. Biodiesel (Fatty acid methyl ester, FAME) was recovered by transesterification and methanolysis of Canola oil using NaOH, CL and ICL as the catalysts to compare the composition of fatty acids and the yield of FAME. Total FAME content was NaOH $781mg\;L^{-1}$, CL $681mg\;L^{-1}$ and ICL $596mg\;L^{-1}$, in which the highest levels of FAME was observed to 50% oleic acid (C18:1) and 22% stearic acid (C18:0). In addition, the unsaturated FAME (C18:1, C18:2) decreased, while saturated FAME (C16:0, C18:0) increased according to increasing the reaction times with both CL and ICL, supporting CL possess both transesterification and interesterification activity. When reusability of ICL and INL was estimated by using the continuous reaction of 4 cycles, the activity of ICL and INL was respectively maintained 66% and 79% until the fourth reaction.
Burkholderia contaminans PSB-A and Burkholderia ambifaria PSB-B were isolated from button mushroom bed to estimate their phosphate solubility. The phosphate-solubilizing abilities of these strains were assessed by measuring the phosphorus content in a single and co-inoculation medium for 7 days. The co-inoculation of these two strains released the highest content of soluble phosphorus (166.3 ㎍ mL-1) into the medium, followed by single inoculation of B. contaminans PSB-A (143.73 ㎍ mL-1) and B. ambifaria PSB-B (127.1 ㎍ mL-1). The highest pH reduction, organic acid production, and glucose consumption were also observed in the co-inoculation medium. According to the plant growth promotion bioassay, co-inoculation enhanced the growth of romaine lettuce much more than the single inoculation (20.4% for leaf widths and 16.6% for root lengths). Although no significant difference was noted between single and co-inoculation of bacterial strains in terms of phosphorous release and plant growth, co-inoculation of PSB may have a beneficial effect on crop growth due to a synergistic effect between the strains.
Kim, Hong-Kyu;Ham, In-Gi;Lee, Ka-Soon;Lee, Byung-Joo;Kim, Yong Gyun;Yang, Euy-Seog;Yoo, Young-Bok;Kim, Hong-Gi
Journal of Mushroom
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v.9
no.1
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pp.17-21
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2011
Dahyang, a CNARES's newly bred cultivar, is a CM061202 strain isolated and selected from 161 single-spores of brown button mushroom. It was selected as a new cultivar after comparison of yield, mycelial growth and quality with No. 705. Mycelial growth of Dahyang on compost extract mushroom complete medium at $25^{\circ}C$ for 15 days was 63mm when it was compared with that of No. 705 with 38mm. The cultivation temperature of Dahyang was 15 to $19^{\circ}C$ which was $2^{\circ}C$ higher than that of No. 705 with 15 to $19^{\circ}C$ cultivated on rice straw bed. The color of pileus of Dahyang was brown. Pinhead producing period was 30 days which is 1 day late than that of No. 705 with 29 days. Dahyang yielded 37% more with $49.1kg/3.3m^2$ than that of No. 705 with $35.8kg/3.3m^2$, respectively. The weight was 16.0g which was heavier than 14.0g of No. 705. The thickness and diameter were also more than those of No. 705. The stipe was shorter and thicker than that of No. 705. Also physical characteristics such as hardness and elasticity were better than that of No. 705.
This study investigated the synergistic effect of single inoculation and co-inoculation of phosphate-solubilizing bacteria (PSB) Burkholderia metallica JH-7 and Burkholderia contaminans JH-15. Phosphate-solubilizing abilities of these strains were assessed by measuring phosphorus content in culture media that were singly inoculated or co-inoculated with these strains for 7 days. B. metallica JH-7 was found to release the highest content of soluble phosphorus ($140.80{\mu}g\;mL^{-1}$ ) into the medium, followed by single inoculation of B. contaminans JH-15 ($135.95{\mu}g\;mL^{-1}$ ) and co-inoculation of two strains ($134.84{\mu}g\;mL^{-1}$ ). The highest pH reduction, organic acid production, and glucose consumption were observed in the medium inoculated with B. metallica JH-7 alone compared with that in the medium co-inoculated with both the strains. Results of a plant growth promotion bioassay showed 17.4% and 7.48% higher leaf and root growth, respectively, in romaine lettuce inoculated with B. metallica JH-7 alone than in romaine lettuce inoculated with a control strain. However, no significant difference was observed between single inoculation and co-inoculation of these strains with respect to phosphorus release and plant growth. Although the results of the present study did not show the synergistic effect of phosphate solubilization by the PSB strains examined, these results indicate that treatment with PSB exerts a beneficial effect on crop growth.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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