This study was conducted to develop a resistant tobarro against Potato virus Y (PVY) by transformation of the plants with genetically engineered viral genes. The complimentary DNAs (cDNAS) of potato virus Y-necrosis strain (PVY-Vn) replicase mutant genes (3'-deleted, 5'-deleted and ADD-mutant Nlbs) were synthesized through RT-PCR by using purified PVY-VN RNA and synthesized primers, and cloned in the sense orientation into a plant expression vector (pMBPI), The cDNAS of the genes were transferred into Agrobacterium tumefaciens LBA 4404, and then transformed into tobacco (Nicotiana tabacum cv. Burley 21) plants. Regenerated plants were tested for PVY resistance by inoculation test; 13 transgenic plants including 7 for 3'-deleted Nlb, 3 for 5'-deleted Nlb, and 3 for ADD-mutant Nlb appeared to be resistant at 4 weeks after inoculation with PVY-VN. Among the 13 transgenic tobacco plants, 8 plants had no symptom up to 14 weeks after inoculation. The progenies ($T_1$) from self-fertilization of the transgenic lines varied 0.0% to 81.2% in their resistance (% of resistant plants). The analysis of Nlb-31deleted, -5'deleted and -ADD mutant in the $T_1$ plants by polymerase chain reaction (PCR) showed that Nlb-3'deleted, -5'deleted and -ADD mutants were detected in all of the resistant plants. These results suggest that the PVY resistance was inherited in the $T_1$ generation.
Narrow and broad sense heritabilities for the characters ranged from 0.1618 to 0.6914 and from 0.7494 to 0.9357, respectively, in F$_1$ hybrids of $5{\times}5$ full diallel crosses. Plant height and days to flowering had the highest heritabilities and yield and quality the lowest. Partial dominance was exhibited by plant height, number of leaves, leaf area per plant and days to flowering. Over dorminance was detected by leaf width and yield of cured leaf. Leaf length and quality would be considered being controlled by a complete dominance effect.
Experiments on the variability of plant type and factors representing the productivity and quality of the cultivars were subsequently carried out in relation to different plant density. Results are summarized as below. The higher was the plant density, the greater was the plant height and mean leaf inclination(MLI). As the plant density increased, the horizontal leaf area distribution became greater in proximal to the stem in NTN 77 and Br.49 but evenly in distal part in Br.21. Meanwhile, in terms of vertical leaf area distribution, it was decreased much more in middle and lower leaves than in upper in NTN 77 and Br.49 although it steadily decreased in any part of the plant in Br.21. Br.49 was the largest but Br.21 and NTN 77 were similar with respect to both CGR and NAR. The yield was greater in larger MLI cultivars(NTN 77>Br.49>Br.21). These three characteristics became greater when the tobacco were planted more densely in the field. Dry leaf weight and dry matter weight per plant were heavier in the larger MLI and increased with lower plant density. Total nitrogen content was greater in lower plant density and larger MLI cultivar. The plant density increases filling power seems to be enhanced regardless to the plant type. There was no discernible tendency on combustibility according to the plant density or plant type.
Morphology, chromosome and transmission of potato virus Y(PVY) of the green peach aphid populations collected from tobacco fields were examined. Based on the morphological characteristics, especially values of linear discriminant functions and length of ultimate rostral segment, 8 green peach aphid clones with different color morphs could be divided into two groups, namely Myzus persicae and M. nicotianae, according to the proposal by Blackman in 1987. The red (RED)-, Brown (BRN)- and green-colored (GR1, GR2) aphid clones belonged to the M. nicotianae type, while the pale green (PG1, PG2, PG3) and dark brown (DBR) clones to the M. persicae type. The karyotype of the pale green-colored clone (PG1, M. persicae type) appeared normal and was 2n=12 with no indication of chromosomal translocation. On the contrary, in the green-colored aphid clone (GR1, M. nicotianae type), translocation and dissociation of autosome 3 were often found, having karyotype of 2n=13. Both of the above aphid clones transmitted PVY-VN to tabacco plants (cv. Burley 21), but the GR1 clone had higher transmissibility than the PG1 clone.
Field experiment was conducted to find out the effect of lime materials application on yield, and chemical composition of Burley 21 in 1986. Lime materials and application rate were CaSO$_4$ : Ca 35kg/l0a. CaCO$_3$ : Ca 35kg/l0a and Liming: pH6.5. Contents of Ca and Mg in fresh or cured leaves were increased, but AI, Fe and Mn were decreased by applying lime materials. Yield were increased by applying lime materials. Among lime materials treatment, yield of limed and CaCO$_3$ plot were higher than that of CaSO$_4$ plot. Value per kg of cured leaves was not affected by applying lime materials. Cured leaves of CaSO$_4$ plot contained higher NH$_3$-nitrogen and alkalinity number of water insoluble ash than those of unlimed plot. Cured leaves of CaCO$_3$, plot contained higher alkalinity number of water soluble ash, insoluble ash and volatile neutral constituent, but lower protein-nitrogen and petroleum ether extracts than those of unlimed plot. Cured leaves of limed plot contained higher alkalinity number of water soluble and insoluble ash, NO$_3$-nitrogen and volatile neutral constituents, but lower protein -nitrogen, nicotine and petroleum ether extracts than those unlimed plot. Yield was increased, however leaf Quality in respect to chemical and organoleptic characteristics were not affected considerably by applying lime materials. Therefore, it suggests that controlling the soil pH about 6.5 by liming might be necessary for tobacco cultivation.
Proceedings of the Korean Society of Tobacco Science Conference
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1997.10a
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pp.134-152
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1997
Plant viruses of tobacco including tobacco mosaic virus (TMV) and potato virus Y (PVY) cause severe economic losses in leaf-tobacco production. Cultural practices do not provide sufficient control against the viruses. Use of valuable resistant cultivars is most recommendable for the control of the viruses. However, conventional breeding programs are not always proper for the development of virus-resistant plants mostly owing to the frequent lack of genetic sources and introduction of their unwanted properties. Therefore, we tried to develop virus-resistant tobacco plants by transforming commercial tobacco cultivars, NC 82 and Burley 21, with coat protein (CP) or replicase (Nlb) genes of TMV and PVY necrosis strain (PVY-VN) with or without untranslated region (UTR) and with or without mutation. Each cDNA was cloned and inserted in plant expression vectors with 1 or 2 CaMV 35S promotors, and introduced into tobacco leaf tissues by Agrobacterium tumefaciens LBA 4404. Plants were regenerated in kanamycin-containing MS media. Regenerated plants were tested for resistance to TMV and PVY In these studies, we could obtain a TMV-resistant transgenic line transformed with TMV CP and 6 genetic lines with PVY-VN cDNAs out of 8 CP and replicase genes. In this presentation, resistance rates, verification of gene introduction in resistant plants, stability of resistance through generations, characteristics of viral multiplication and translocation in resistant plants, and resistance responses relative to inoculum potential and to various PVY strains will be shown. Yield and quality of leaf tobacco of a promising resistant tobacco line will be presented.
Under the different conditions of planting density and compound fertilizer level, some agronomic and chemical characteristics of burley tobacco were investigated from 1982 to 1984. Leaf area and dry leaf weight per plant, crop growth rate, relative growth rate and net assimilation rate for 40-60 days after transplanting were higher with increasing plant spacing and fertilizer, but leaf area index was lower with increasing plant spacing. At topping stage, the leaf size was increased with increasing plant spacing and amount of fertilizer applied and the stem diameter was increased by increasing plant spacing. Leaf area, leaf weight per plant and weight per unit leaf area of harvested leaf were higher when plant spacing and fertilizer increased. It was estimated that the optimum plant spacing was 105cm x 34cm and level of com-pound fertilizer (N-P$_2$ O$\sub$5/ -K$_2$O =10-10-20) was 263kg/l0a for high yield. There were trends toward increase the contents of total alkaloid and total nitrogen with increasing plant spacing and fertilizer application. There was significant positive correlation between plant spacing and total nitrogen, and between fertilizer application and total nitrogen. The plant spacing of 105cm x 35 to 40cm and 227.5kg/l0a of fertilizer level may be profitable for farm economy and the low nitrogenous leaf.
The aim of this study is to develop a simple and rapid field method for the determination of chloride content in tobacco green or cured leaves. To set up a practical process, several factors such as the proper sampling position of each leaf, the size of leaf lamina pieces for blending, the substitution of deionized water fur the extracting solution, 0.1N $HNO_3$, the submerging durations before blending, and the standing times before measuring were studied using flue-cured and burley tobacco with a stable and reproducible Chloride Meter, KRK CL-2Z. From the results, chloride contents of tobacco leaves could be analyzed with the Chloride Meter(CL-2Z) using the suspension of 14 mm diameter leaf disks after soaking in distilled water for 30 min., blending with a mini-blender for 30 seconds. The chloride contents measured in this way showed highly significant correlations with ones by the conventional potentiometric method using an ion meter-chloride electrode and $AgNO_3$ titration. In our method, the procedures such as drying, powdering and weighing samples, and using chemical reagents for extraction (0.1N $HNO_3$) and titration(0.028N $AgNO_3$) could be eliminated. These results suggest that the newly constructed method using the Chloride Meter is more efficient to determine the chloride content of tobacco leave in comparison with the one by the Ion $Meter:AgNO_3$ titration.
This Study was conducted to estimate the degree of dominance and gene frequency of some sueful characters in tobacco. The eight parents and a set of 28 crosses of F'1s was F'2s were used as materials, and planted on oriental's and burley cultivated system as randomized block designs, respectively. The observed characters were six agronomic characters which were plant height, number of leaves per plant, leaf length, leaf width, days to flowering and yield, and the data obtained from the experiment were analyzed from methods by Hayman's and Jinks. The results obtained are summarized as follows: 1. In Vr-Wr graphical analysis, number of leaves per plant, leaf length, days to flowering and yield were found to be inherited in partial dominance, and plant height was over dominance to be similar to complete dominance, but leaf width was inherited with partial dominance close to complete dominance. 2. In the gene frequency, two varieties Xanthi-Basma and KA 102, for days to flowering and yield had larger number of dominant genes as those were situated near the point of origen. 3. Additive effects of genes(D) were greater than dominance effects of Genes(H) for six agronomic characters except plant height, and mean degree of dominance over all loci was lower than 1 for days to flowering yield, leaf length and number of leaves per plant.
This study was conducted to investigate the influence of air temperature and relative humidity on excessive drying rate of burley tobacco. In experiment I, 4 temperatures and I humidity by day and air curing by night were treated from initial curing stage. In experiment II, 15 combinations of 3 temperatures and 5 humidities were applied from the yellow stage of cure. Yellowish cured leaves resulted from overdrying at high temperature and especially, at low humidity. How- ever, these were not produced at 75-80% RH and under 35$^{\circ}C$ by day with air curing b y night. The proper range of temperature and humidity for desirable color of cured leaf were the combinations of 30$^{\circ}C$, 75-80% RH or 35$^{\circ}C$, 80-85% RH. As excessive drying leaves increased, physical properties of cured leaves were poorer and chemical contents were less decomposed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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