The hormonal requirement suiting micropropagation of Morus alba during any season throughout the year was studied. Sprouting frequency from axillary buds of M. alba was greatly influenced by the time of explant collection, the highest value was achieved when nodal explants were collected at the end of bud dormancy period (late in March) and cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with low concentration (0.5 mg/L) of BAP, kinetin or IBA (85-68%). In addition, they showed higher axillary bud sprouting on growth-regulators-free medium (49%) than others collected in autumn or winter and cultured on medium supplemented with various growth regulators (47-48%). Regardless of that period, young explants with greenish buds collected in summer exhibiting high sprouting frequency (66%) on MS medium supplemented with 0.5 mg/L kinetin and 0.5 mg/L GA3. Shoot multiplication via adventitious bud formation was achieved when the nodal explants were cultured on MS medium supplemented with 2 mg/L BAP and 0.2 mg/L IBA. Further multiplication via nodal explants of in vitro grown shoots was obtained on MS medium supplemented with 0.5 mglL BAP and 0.5 mg/L GA3. While half strength MS medium supplemented with low concentration (0.5 mg/L) of IBA, IAA or 2,4-D stimulated adventitious root formation, IBA was the best. After transfer the plantlets to the soil, acclimatization for three weeks was essential prerequisite for survival in high frequency (92%). Peroxidase activity is related to break of bud dormancy where maximum enzyme activity was detected when the lateral buds were induced to commence growth under field condition (early in spring) or in vitro.
This study describes an efficient protocol for Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of two subgroups of genotype AAA bananas (Musa acuminata cv. Pei Chiao and Musa acuminata cv. Gros Michel). Instead of using suspension cells, cauliflower-like bud clumps, also known as multiple bud clumps (MBC), were induced from sucker buds on MS medium containing $N^6$-Benzylaminopurine (BA), Thidiazuron (TDZ), and Paclobutrazol (PP333). Bud slices were co-cultivated with A. tumefaciens C58C1 or EHA105 that carry a plasmid containing Arabidopsis root-type ferredoxin gene (Atfd3) and a plant ferredoxin-like protein (pflp) gene, respectively. These two strains showed differences in transformation efficiency. The EHA105 strain was more sensitive in Pei Chiao, 51.3% bud slices were pflp-transformed, and 12.6% slices were Atfd3-transformed. Gros Michel was susceptible to C58C1 and the transformation efficiency is 4.4% for pflp and 13.1% for Atfd3. Additionally, gene integration of the putative pflp was confirmed by Southern blot. Resulting from the pathogen inoculation assay, we found that the pflp transgenic banana exhibited resistance to Fusarium oxysporum f. sp. cubense tropical race 4. This protocol is highly advantageous to banana cultivars that have difficulties in setting up suspension cultures for the purpose of quality improvement through genetic transformation. In addition, this protocol would save at least 6 months in obtaining explants for transformation and reduce labor for weekly subculture in embryogenic cell suspension culture systems.
Jo, Yeonhwa;Choi, Hoseong;Kim, Sang-Min;Lee, Bong Choon;Cho, Won Kyong
Journal of Applied Biological Chemistry
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제63권3호
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pp.189-195
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2020
The soybean (Glycine max L.), also known as the soya bean, is an economically important legume species. Pathogens are always major threats for soybean cultivation. Several pathogens negatively affect soybean production. The soybean is also known as a susceptible host to many viruses. Recently, we carried out systematic analyses to identify viruses infecting soybeans using soybean transcriptome data. Our screening results showed that only few soybean transcriptomes contained virus-associated sequences. In this study, we further carried out bioinformatics analyses using a soybean flower bud transcriptome for virus identification, genome assembly, and single nucleotide variations (SNVs). We assembled the genome of Soybean yellow common mosaic virus (SYCMV) isolate China and revealed two SNVs. Phylogenetic analyses using three viral proteins suggested that SYCMV isolate China is closely related to SYCMV isolates from South Korea. Furthermore, we found that replication and mutation of SYCMV is relatively low, which might be associated with flower bud tissue. The most interesting finding was that SYCMV was not detected in the cytoplasmic male sterility (CMS) line derived from the non-CMS line that was severely infected by SYCMV. In summary, in silico analyses identified SYCMV from the soybean flower bud transcriptome, and a nearly complete genome of SYCMV was successfully assembled. Our results suggest that the low level of virus replication and mutation for SYCMV might be associated with plant tissues. Moreover, we provide the first evidence that male sterility might be used to eliminate viruses in crop plants.
인삼 자엽을 식물호르몬을 전혀 첨가하지 않은 Murashige와 Skoog배지에 배양할 경우 고빈도로 자엽의 표면으로부터 체세포배가 발생되었다. 그러나 cytokinin을 첨가배지에서는 체세포배의 발생이 억제되면서 부정아가 발생되었다. BAP처리배지에서 kinetin 처리보다 부정아의 발생이 높은 경향을 보였으며, IBA와 사이토카이닌의 혼합 처리시에는 부정아의 발생빈도가 단일처리보다 훨씬 증가한 경향을 보였다. 특히 0.05mg/1 IBA와 5mg/l BAP 혼합처리구에서 부정아의 형성이 $40\%$로 매우 높은 빈도로 발생하였다. 체세포배의 발생은 자엽의 기부에서만 발생된 반면 부정아는 자엽의 정부에서 주로 발생되었기 때문에 체세포배의 발생 부위와는 뚜렷이 구분되는 특징을 보였다. 또한 부정아는 접합자배의 측아와 같이 포로 둘러싼 녹색돌기로 자라다가 포가 열개되면서 유경이 생장하였는데 줄기의 구조가 아닌 단엽의 구조를 지니며 생장되었다.
저년생 인삼의 잠아 및 화기형성시기와 양상은 고년생 인삼의 이차적인 양상과 상이하기 때문에 1년생 묘삼의 잠아발달 및 다식된 2년생 인삼의 화기형성과정을 조사관찰하였던 바 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 2년생 이상의 인삼 잠아조직은 4월중순경 분제조직의 조기포분제로 시작하는데 1년생 묘삼에서는 유근발근시인 3월 하순경 시작하는 것으로 추측되었으며 잠아의 위치는 자엽간 줄기하단 문부위에 생성되었다. 2. 3년생 이상의 인삼 화기분화는 전년도 형성된 뇌두조직내에서 형성되지만 2년생 인삼의 화기는 줄기선단 엽병사이의 경단분제조직에서 분제세포의 분열과 함께 분화, 형성되었다.
본 연구에서는 신선 농산물의 미생물학적 안전성을 제고하기 위해 항균 효과가 있는 clove bud essential oil(CBEO)과 mild heat(MH) 처리를 병합 처리하여 Escherichia coli O157:H7이 접종된 red oak leaf의 미생물 수 변화를 측정하였다. 0.2% CBEO와 $50^{\circ}C$ MH 병합 처리구는 단순 물세척 처리구보다 1.45 log CFU/g 더 낮은 미생물 수를 나타내어 모든 병합 조건 중 가장 높은 미생물 제어 효과를 보였다. 또한, 본 병합 처리구는 비 세척 처리구와 비교하여 9일간의 저장 기간 동안 1.67~2.25 log CFU/g 더 낮은 미생물 수를 나타내어 미생물 제어 효과가 지속됨을 확인하였다. 따라서 이러한 결과들로부터 CBEO와 MH의 병합 세척 처리는 저장 중 red oak leaf와 같은 신선 농산물의 미생물학적 안전성을 확보하는 데 효과적으로 사용될 수 있다고 판단된다.
Park, Yeo Ok;Lee, Jeong Ah;Park, Seong Moon;Ha, Min Hee;Joo, Woo Hong;Kim, Dong Wan
대한의생명과학회지
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제26권2호
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pp.85-92
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2020
Various beneficial effects of sweet persimmon (Diospyros kaki T.) including anti-oxidation, anti-bacteria and viruses, anti-allergy were widely reported previously. However, the anti-inflammatory effect and its molecular mechanisms are not clear. In this study, the anti-inflammatory effect of the extracts of flower bud and fruit of sweet persimmon was investigated in LPS-treated RAW264.7 cells. Both extracts of flower bud and fruit showed strong inhibitory effect on the LPS-induced NF-κB activation. IκBα, the inhibitor of NF-κB, was increased and the expressions of NF-κB target genes, COX-2 and iNOS, were suppressed by the treatment with the extracts of flower bud and fruit. The expressions of pro-inflammatory cytokines, IL-1β, IL-6, TNF-α were also suppressed by the extracts. In addition, the LPS-induced wnt/β-catenin pathway and its related gene expressions including cyclin D1, wnt 3a, wnt 5a were suppressed by the extracts. The extracts also showed anti-oxidant activity and suppressive effect on the LPS-induced apoptosis of RAW264.7 cells. These results suggest that the flower bud and fruit of sweet persimmon display strong anti-inflammatory effect through inhibiting the pro-inflammatory signaling pathways in the cells.
액아가 포함된 줄기절편을 $0.5\;mgl^{-1}$ BA와 함께 IAA, NAA, 2,4-D를 농도별 $(1,2,3\;mgl^{-1})$로 조합한 MS기본배지에 치상하여 신초를 유도하였다. 액아로부터 신초의 형성은 $0.5\;mgl^{-1}$ BA와 $2;mgl^{-1}$ IAA를 혼합처리한 배지에서 57%의 효율로 가장 높게 나타났다. 신초로부터 발근은 MS배지에 IBA를 $1\;mgl^{-1}$를 첨가하였을 때 가장 좋았다. 발생한 root의 길이는 평균 4주 후 약 4 cm로 측정되었다.
멸종위기수종인 둥근잎꿩의비름 기내 부정아유도에 미치는 식물생장조절물질의 종류 및 배양부위의 영향과 기내생육 및 엽록소함량에 미치는 배지, sucrose 농도 및 배양용기에 따른 환기효과를 연구하였다. 부정아 유도는 3.0 m g/L의 BA와 0.01 mg/L의 IBA가 첨가된 배지에 액아포함 줄기를 배양하였을 때 가장 효과적이었다. 기내 부정아의 줄기와 뿌리 신장에 MS배지의 농도와 sucrose의 농도는 영향을 주지 않았다. 환기처리가 기내 건전 식물체 생산에 미치는 영향을 조사한 결과, 기내 환기처리구는 줄기신장에 효과적이었고, 뿌리의 신장은 유의적 차이는 없이 모든 실험구에서 10 cm 이상 증식하였다. 엽록소의 함량은 환기처리 시 총엽록소 함량이 3.12 mg/g으로 높게 나타남을 확인하였다. 둥근잎꿩의비름의 부정아 유도에 농도와 배양부위가 중요한 요인으로 작용하고 기내식물체 신장에 미치는 배지 및 sucrose농도의 영향은 크지 않은 것으로 나타났다. 기내 건전식물체의 생산은 환기가 용이한 배양용기하에서 양호한 것으로 나타났다.
절화 장미의 식물공장적 생산을 위해 삽수용 모주의 성숙정도, 삽수의 채취 절위와 엽면적이 단경삽목묘(single-node cuttings)의 발근과 신초발아에 미치는 영향을 조사하였다. 모주의 성숙정도는 SNC의 발근 및 신초 발아 활성에 큰 영향을 주지는 않았다. 전체적으로 95% 이상의 발근 및 신초발아율을 나타났으며, 'Rote Rose'는 발근과 신초발아가 삽목 후 34일 경에 동시에 일어난 반면, 'Teresa'의 신초발아 소요기간은 18일로 발근보다 9일 먼저 시작되었으며 'Rote Rose'보다는 16일이나 짧았다. 삽수 채취 절위가 줄기 기부방향으로 내려갈수록 발근 및 신초발아의 소요일수는 늘어나고 발근율과 신초발아율은 감소하였다. 특히 'Teresa' 품종에서 더욱 뚜렷하였는데 신초발아의 소요일수는 최대 12일 지연되었고 신초발아율은 14.4%나 감소하였다. 또한 삽수의 엽면적이 클수록 발근 및 신초 발아율이 증가하고 소요일수도 단축되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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