• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제48권4호
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• pp.218-221
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• 2005

Nucleotide sequence of Brevibacterium flavum ptsG gene capable of complementing Escherichia coli ZSC113 mutations defective to glucose permease activity of phosphotransferase system was completely determined, and the gene product was compared with other glucose-specific enzyme II ($EII^{Glc}$). A ptsG gene of B. flavum consisted of open reading frame of 2,025 nucleotides putatively encoding polypeptide of 675 amino acid residues and TAA stop codon. Deduced amino acid sequence of B. flavum ($EII^{Glc}$) had high homology with ($EIIs^{Glc}$) of Corynebacterium glutamicum, C. efficiens, and B. lactofermentum. Arrangement of structural domains, IIBCA, of B. flanum ($EII^{Glc}$) protein was identical to that of EIIs belonging to glucose-phosphotransferase system.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제5권5호
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• pp.250-256
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• 1995

The ddh gene encoding meso-diaminopimelate (meso-DAP)-dehydrogenase (DDH) in Brevibacterium lactofermentum was isolated by complementation of the Escherichia coli dapD mutation. It was supposed from subcloning experiments and complementation tests that the evidence for DDH activity appeared in about 2.5 kb Xhol fragmented genome. The 2.5 kb Xhol fragment containing the ddh gene was sequenced, and an open reading frame of 960 bp encoding a polypeptide comprising 320 amino acids was found. Computer analysis indicated that the deduced amino acid of the B. lactofermentum ddh gene showed a high homology with that of the Corynebacterium glutamicum ddh gene.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제27권4호
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• pp.292-297
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• 1999

Overproduction of L-ornithine by mutant strains isolated from Brevibacterium detoglutamicum BK1046 was investigated. The strain was a L-ornithine auxotroph and exhibited culture instability during fermentation. Through a sequential screening effort, a highly stable strain with lless revertant formation was finally selected and designated B. ketoglutamicum BK52 (KCTC0141BP). It prouduced L-ornithine at a high concentration (above 9 g/L) independent of subculture or cultivation time, and also had a very low tendency of revertant formation. In a long-term storage, this strain maintained its cell stability and productivity of L-ornithine to a reasonable range.

• 미생물학회지
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• 제22권4호
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• pp.249-255
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• 1984

To develop the host-vector system for industrial Coryneform bacteria that seemed to be the most suitable microorganisms for molecular breeding of genes involved in the production of amion acids, nucleotides, and other products of industrial interest, broad host range E. coli plasmid R 1162 DNA was transformed into Brevibacterium ammoniagenes and the plasmids pKU6 isolated from a transformant was physically characterized. All other plasmids from the transformed cells except pKU6 exsisted as multimeric forms in Brevibacterium ammoniagenes. The plasmid DNA was retransformed into Corynebacterium glutamicum with a high frequency ($1.32{\times}10^{-1}$ per cell) and maintained stably both in Brevibacterium ammoniagenes and Corynebacterium glutamicum after 100 generations of cultures with 25-30 copy number per cell. The size of both plasmid pKU6 and plasmid R1162 were the same and restriction maps by EcoR I, Ava I, Pst I, Pvu II and Hinc II were also similar.

• 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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• 한국미생물생명공학회 1986년도 추계학술대회
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• pp.522.1-522
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• 1986

5'-Xanthylic acid 생성균주인 Brevibacterium ammoniagenes ATCC 21263 R에 XMP에서 GMP로의 전환효소인 GMP synthetase활성을 부여하기 위해 동종간 세포융합을 시도하여 융합균주들을 얻었다. 이들 우량 융합균주들과 융합모균의 GMP synthetase 활성을 측정하여 상호 비교하였으며, pH 변화에 따른 GMP synthetase 활성과 GMP 생성량과의 관계를 검토하였다. 또한 최적 pH에서 균성장에 따른 당소모량과 GMP 생성량을 비교하였다.

• 미생물과산업
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• 제26권1호
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• pp.2-7
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• 2000

1. 양조폐수장, 폐수구의 토양에서 분리한 K-173-10은 초산을 자화하여 L굴루타민산을 24g/l생성하였다. 2. 분리된 균주는 행태학적, 생리학적, 분류학적 특성으로 미루어 보면 Brevibacterium ammoniagenes sp.로 간주된다.

• 미생물학회지
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• 제28권2호
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• pp.98-103
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• 1990

원형질체 융합에 사용할 genetic selection marker로써 자외선 조사와 NTG 처리에 의해 Brevibacteriurn lactofermeηturn S SWA(arg trp)와 B. lactofermenturn SWB(met ser)를 분리하였다. 이 균주릎 배양하여 증식기에 penicillin G를 처리한 후, 0.4 M sucrose를 첨가한 lysis fluid에서 lysozyme을 $400\mu\textrm{g}$/ml의 농도로 16시간 처리 하였을 때, B. lactofermenturn SWA는 99.98%, B. lactofermentum SWB는 99.93%의 원형질체 형성률을 나타내었다. 윈형질체 융합에서는 100 mM $CaCl_{2}$, 30%의 PEG 6,000과 fusion fluid릎 15분간 처리하였을때, B. lactofermentum SWA와 B. lactofermentum SWB의 융합빈도는 $2.30\times 10^{-5}$로 나타내었다. 원형질체 융합에 의해 언어진 융합균주의 유전적 분석을 위해 selective media와 non-selective media에서 생장한 colony를 계산함으로써 각 marker간의 재조합주의 형성빈도를 조사하였으며, 이들을 분석하여 유전자간의 순서를 결정하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제26권5호
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• pp.400-405
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• 1998

본 연구는 B. lactofermentum에서 ddh유전자의 증폭이 lysine 생성량에 미치는 영향을 조사하기 위하여, 먼저 E. coli-B. lactofermentum shuttle vector pEB1 및 pEB2를 제조하였으며, 제조된 shuttle vector에 ddh 유전자를 ligation하여 재조합 plasmid pRK1 및 pRK2를 구축하였다. B. lactofermentum에서 ddh 유전자를 증폭시키기 위하여 재조합 plasmld를 B. lactofermentum으로 도입하여 DDH 활성을 측정한 결과 대조균보다 7배 정도 증가하였다. 또한 lysine 생성량의 비교 분석에서는 재조합 plasmid를 함유한 균주의 경우 48시간 이후부터 control 균주보다 lysine 생성량이 증가하기 시작하여 72시간 때에는 최대치를 나타내었으며 그 이후는 오히려 감소하였다. 최대치를 나타낸 72시간 때의 lysine 생성량은 대조균주가 4.30∼4.38 g/l를 나타내었으며 pRK1 및 pRK2를 함유한 균주는 각각 5.34 g/l 및 5.07 g/l이었다. 이상의 결과로 미루어 볼 때 ddh유전자의 증폭에 의한 B. lactofermentum의 lysine 생성량은 대조균주에 비하여 18∼20% 정도 증가하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권5호
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• pp.614-618
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• 1992

Brevibacterium CH1의 회분배양 결과 최적의 초기 포도당 농도는 $20g/{\ell}$이었고, 균체의 최대 성장속도는 $0.21h^{-1}$이었다. pH 를 조절하여 줌으로써 균체농도와 효소의 비활성이 각각 20, 30 정도 증가하였다. 따라서 pH 조절은 균체농도 및 효소생성에 상당한 영향을 주는 것을 알 수 있었다. M3 배지를 연속적으로 공급하면서 유가식 회분배양 한 결과 88시간 배양 후 균체농도는 $68g/{\ell}$로 고농도 배양이 되었으며, 비활성은 6.1units/mg으로 유지되었다. 효소의 총활성은 배양시간에 따라 증가하여 80시간 배양 후 최대 414.8 units/$m{\ell}$ 이었으며, 회분배양에 비해 4.4배 증가하였다. 이 경우에 Yx/s(cell growth yield)는 0.68g cells/g glucose consumed이었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제9권5호
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• pp.582-588
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• 1999

A Brevibacterium lactofermentum gene coding for a glucose-specific permease of the phosphoenolpyruvate-dependent phosphotransferase system (PTS) was cloned, by complementing an Escherichia coli mutation affecting a ptsG gene with the B. lactofermentum genomic library, and completely sequenced. The gene was identified as a ptsG, which enables an E. coli transformant to transport non-metabolizable glucose analogue 2-deoxyglucose (2DG). The ptsG gene of B. lactofermentum consists of an open reading frame of 2,025 nucleotides encoding a polypeptide of 674 amino acid residues and a TAA stop codon. The 3' flanking region contains two stem-loop structures which may be involved in transcriptional termination. The deduced amino acid sequence of the B. lactofermentum enzyme $II^{GIe}$ specific to glucose ($EII^{GIe}$) has a high homology with the Corynebacterium glutamicum enzyme $II^{Man}$ specific to glucose and mannose ($EII^{Man}$), and the Brevibacterium ammoniagenes enzyme $II^{GIc}$ specific to glucose ($EII^{GIc}$). The 171-amino-acid C-terminal sequence of the $EII^{Glc}$ is also similar to the Escherichia coli enzyme $IIA^{GIc}$ specific to glucose ($IIA^{GIc}$). It is interesting that the arrangement of the structural domains, IIBCA, of the B. lactofermentum $EII^{GIc}$ protein is identical to that of EIIs specific to sucrose or $\beta$-glucoside. Several in vivo complementation studies indicated that the B. lactofermentum $EII^{Glc}$ protein could replace both $EII^{ Glc}$ and $EIIA^{Glc}$ in an E. coli ptsG mutant or crr mutant, respectively.