We have synthesized branched oligosaccharides (BOS) by the mixed-culture fermentation (MBOS), fructosyltransferase (FBOS) or glucosyltransferase (GBOS) with high concentration of sucrose (3M). MBOS was further modified as iron and sulfate-oligosaccharides. The modified MBOS were stable at high temperatures (up to $140^{\circ}C$) and low pHs (2 to 4). Most highly branched and modified oligosaccharide (0.34%, w/v) effectively inhibited fructose release from sucrose by Streptococcus mutans 6715 mutansucrase. FBOS, GBOS, iron-MBOS inhibited the mutansucrase activities from Streptococcus sobrinus about 46.8%, 49.2% and 43.1%, respectively. Most highly branched and modified oligo- saccharides (0.5%, w/v) effectively inhibited the fonnation of insoluble glucan and adherence of S. mutans or S. sobrinus cell in the presence of sucrose. Modified oligosaccharides affected the growth and acid production of oral pathogens. Cytotoxicity test showed that highly branched and modified oligosaccharides was non-toxic.
Damage to cells exposed to radiation is primarily attributed to direct effects on the structure of cellular DNA. Radiation-induced damage of pBluescript SK plasmid DNA and Escherichia coli $DH5\alpha$ were examined in the presence of various branched oligosaccharides, polysaccharides, and/or 8-MOP (8-methoxypsoralen). Branched oligosaccharides efficiently protected DNA and cells exposed to ultrasoft X-ray and UV irradiation. In the presence of 0.2% (w/v) branched oligosaccharides and polysaccharides, DNA can be protected from damage due to W and ultrasoft X-ray by a factor of 1.3-2.1 fo1d and 3.2-8.3 fold, respectively. The protective effect of cells exposed to UV or ultrasoft X-ray was also observed by branched oligosaccharides. The combination of MOP, a photoreagent, with carbohydrates increased the protective effects for DNA and cells, compared with that of a single use of MOP or carbohydrate alone.
State diagram of highly concentrated branched oligosaccharides (HBOS) was constructed to better understand phase behavior of mixtures with different size of oligosaccharides. It showed dramatic plasticizing effect on glass transition, which was successfully described based on Couchman-Karasz equation model. $T_g$' estimated from state diagram corresponded well with previous empirical data measured by maximum ice formation through isothermal holding (annealing) process. Estimated $T_g$' and $C_g$' values were $-36.3^{\circ}C$ and 79.99%, respectively. $T_g$' value of HBOS was approximately $10^{\circ}C$ higher than that of sucrose, while $C_g$' value was similar to those of general carbohydrate materials, which could be useful for applications in frozen system.
효소를 이용하여 전분을 수식하여 묵의 텍스쳐 특성을 개선하고 아울러 기능성 탄수화물을 첨가시켜 불성을 개선하고 건강식품화하고자 하였다. 전분의 분자수식을 위하여 maltogenic amylase를 이용하였으며 고구마 전분의 구조를 modification시켜 묵을 제조하고 또한 분지 글루코올리고당과 도토리 전분을 혼합하여 10% 전분겔을 제조한 후 Instron을 사용한 기계적 검사와 관능검사를 병행하여 텍스쳐 특성을 시험하였다. 고구마 전분에 maltogenic amylase를 0.02% 첨가하였을 때 텍스쳐 개선효과가 가장 켰으며 묵의 품질이 우수하였다. 이는 효소에 의해 긴 아밀로오스와 아밀로펙틴이 묵이 형성될 수 있는 길이로 잘라졌기 때문으로 생각된다. Bacillus licheniformis maltogenic amylase(BLMA)를 이용하여 제조한 분지글루코올리고당을 첨가한 경우, 12.5%를 첨가하였을 때 텍스쳐 특성이 가장 향상되었다. 도토리 전분을 혼합하여 전분겔을 제조한 경우에는 50%를 혼합하였을 때 가장 텍스쳐 특성이 향상되었고 100% 도토리만으로 제조한 전분겔보다 수응력이 우수하였다.
효소반응과 부분 산가수분해 결과를 해석하여 Leuconostoc mesenteriodes M-12 덱스트란수크라제 억셉터 반응 산물인 새로운 분지올리고당의 구조를 확인하였다. 분지올리고당 B4의 구조는 62-O-$\alpha$-D-kojibiosylmaltose인 것으로 확인되었으며, 분지올리고당 B5의 구조는 63-O-$\alpha$-D-kojibiosylpanose였다. 억셉터 반응산물을 덱스트라나제로 분해한 결과 새로운 올리고당인 D4를 확인할 수 있었다. 억셉터 반응산물을 억셉터로 이용한 두 번째 억셉터 반응의 생성물을 덱스트라나제 처리하여 D4를 얻었는데 덱스트라나제와 글\ulcorner아밀라제에 의해 분해되지 않았다. 그 구조는 62-O-$\alpha$-D-kojibiosylisomaltose로 확인되었다. 직선상 또는 분지 결합을 가진 d.p. 6 이하의 억셉터 반응산물의 생성 패턴도 확인하였다.
Certain indigestible oligosaccharides may benefit gastrointestinal tract via fermentation and proliferation of desirable bacterial species. The purose of this study was to elucidate the effect of selected oligosaccharides, such as fructooligosaccharides(FOS), soybean oliosaccharides(SOE), and highly concentrated branched oligosaccharides(HiBOS), on fecal micorflora proliferation, lipid concentration, lipid peroxide formation and antioxidant enzymes acitivies in plasma and liver of the rats. Thirty two male Sprague-Dawley rats were randomly assigned to one of four treatments ; 1) control diet(AIN-93G diet); 2) control diet +5% FOS ; 3) control diet + 5% SOE ; 4) control diet + 5% HiBOS. The duration of the study was 4 weeks. Fecal bifidobacteria concentration were significantly higher (p<0.05) in the HiBOS group compared with the control after 4 weeks of dietary treatment. FOS and SOE groups also had higher fecal bifidobacteria levels than control, but statistical significance was not found. The concentration of plasma total lipid was decreased by oligosaccharide consumption, especially in HiBOS group(p<0.05). The concentration of plasma total triglyceride was significantly lower in all of the oligosaccharide containing groups compared with the control(p<0.05). The plasma total cholesterol concentration tended to be lower in the oligosaccharide consuming groups than control. The concentrations of hepatic total lipid, triglyceride and total cholesterol were not affected by consumption of oligosaccharides. Thiobarbituric acid reactive substance(TBARS) concentrations and antioxidant enzyme activities in plasma and liver were not affected much by experimental diets. There results suggest that dietary oligosaccharides may be beneficial for increasing intestinal bifidobacteria and lowering plasma lipid levels.
In this study we tried to optimize the enzyme reaction conditions for the synthesis of highly branched isomaltodextrin (Mw > 2.5 kDa) using two dextransucrases from L. mesenteroides B-742CB and B-512FMCM that are dextransucrase constitutive mutants. As the concentration of sucrose or the ratio of maltose to sucrose increased, the amount of dextran decreased and the number and the amount of acceptor-products (of sucrose or maltose) increased. With high sucrose concentration (over 34%), there was more branched isomaltodextrin (as acceptor products) than dextran. When the ratio of sucrose to maltose was 2.5, there produced 86.7% of isomaltodextrin were produced. The Mw of dextrans, however, was over 2${\times}$10(sup)6 and there was no significant amounts of branched clinical dextran or high molecular weight oligosaccharides. With the combined activities of B-742CB dextransucrase and B-512FMCM dextransucrase we could synthesize high molecular weight branched isomaltodextrin (Mw>2.5 kDa). The high molecular weight dextran was composed of high branches as B-742CB dextran.
The influence of process conditions on highly branched glucooligosaccharides production by mixed culture of Leuconostoc mesenteroides ATCC 13146 and Lipomyces starkeyi ATCC 74054 was studied. We divided the batch culture fermentations into two groups according to inoculation method. One-point inoculation was performed by coinoculation of L. mesenteroides and L. starkeyi at the ration of 10 to 1, and two-point inoculation by L. mesenteroides inoculation first and L. starkeyi inoculation after L. mesenteroides grew to the end of the log phase of growth. Two-point inoculation improved the yield of oligosaccharide by 1.5 to 20 fold more than one-point inoculation. In this process, the highest yield of oligosaccharides (48% of theoretical yield) and productivity (0.85 g/l/h) were obtained with starch as an initial substrate for L. starkeyi growth. The estimated composition of the end product consisted of 31.5% oligosaccharides, 17.6% dextran, and 46.5% mannitol.
본 연구는 시판 올리고당들 중 이소말토올리고당, 프락토올리고당, 및 갈락토올리고당들을 8% 첨가하여 수리미를 제조한 후 3개월간 냉동저장하여 수리미에 냉동변성방지제로의 이용가능성을 살펴보았다. 준비된 수리미로 겔을 만든 후, 이들의 물성, 수분 보유능, 미세구조, 그리고 겔의 색깔을 측정하였으며 현재 상업적으로 이용되는 냉동변성방지제들(설탕, 설탕+솔비톨 혼합물)과 겔 특성을 비교하였다. TPA test에서 시판 올리고당들 중 프락토올리고당의 경우 가장 높은 hardness와 fracturability를 보였고, 다른 올리고당들은 기존의 냉동변성방지제들과 유사한 특성을 나타내었다. 또한 수분 보유능, 미세구조 그리고 겔의 색깔에 있어서도 시판 올리고당들은 기존의 냉동변성방지제들과 유사한 결과를 나타내어 시판 올리고당들의 수리미 냉동변성방지제로의 이용가능성을 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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