Betulinic acid (BA), a naturally occurring triterpene found in the bark of the white birch tree, has been investigated to induce apoptosis in various cancer cells and animal models. However, there is no report of the chemopreventive effect of BA in cervical cancer cells. Using KB human cervical cancer cells as a model, we currently show that BA decreases cell viability and induces apoptotic cell death. The mechanism of the BA-induced anti-growth response in KB cells is due to the down-regulation of specificity protein 1 (Sp 1) and its downstream targets, myeloid cell leukemia-1(Mcl-1) and survivin. Thus, BA acts as a novel chemopreventive agent through the regulation of Sp1 that is highly expressed in tumors.
Lee, Deog-Yong;Seo, Yeon-Soo;Kang, Sang-Gyun;Yoo, Han Sang
Korean Journal of Veterinary Research
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v.47
no.2
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pp.157-162
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2007
Lactic acid bacteria (LAB) has been regarded as a useful microorganism and tried to manipulate plasmid DNA for increasing the usefulness. Although several methods have been developed to isolate plasmid DNA from Escherichia coli (E. coli), these methods were not sufficient to apply to LAB with exception of O'Sullivan's lysis method. So, we evaluated plasmid DNA extraction from LAB using general E. coli preparation methods and tried to improve the extraction yield and DNA purity by modifying O'Sullivan's alkaline lysis method. To improve the extraction yield, salt and carrier were added to precipitant and those were incubated at $-70{^{\circ}C}$. Only incubation at $-70{^{\circ}C}$ was the effective method of those modifications. Purity of plasmid DNA was improved by two times of each centrifugation and phenol/chloroform extraction. However, DNA was damaged by twice extraction with phenol/chloroform. Also, exclusion of ethidium bromide showed negative effect to purity. Additionally, it was recommended that improvement of the extraction yield may be due to centrifugation at high speed for more time and to dissolving complete DNA pellet before addition of 7.5 M ammonium acetate. Extraction using this modification produced higher quality of plasmid DNA.
Kim, Sam Woong;Jeong, In Sil;Jeong, Eun Ju;Tak, Je Il;Lee, John Hwa;Eo, Seong Kug;Kang, Ho Young;Bahk, Jeong Dong
Molecules and Cells
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v.26
no.1
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pp.26-33
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2008
The plasmid pJB01, a member of the pMV158 family isolated from Enterococcus faecium JC1, contains three open reading frames, copA, repB, and repC. Plasmids included in this family produce counter-transcribed RNA (ctRNA) that contributes to copy number control. The pJB01 ctRNA, a transcript which consists of 54 nucleotides (nts), is encoded on the opposite strand from the copA/repB intergenic region and partially overlaps an atypical ribosome binding site (ARBS) for repB. The ARBS is integrated by the two underlined conserved regions: 5'-TTTTTGTNNNNTAANNNNNNNNNATG-3', and the ctRNA is complementary only to the 5' conserved sequence 5'-TTTTTGT-3'. This complementary sequence is located at a distance from the terminal loop of the ctRNA secondary structure. The ctRNA structure predicted by the mfold program suggests the possible generation of a terminal and an internal hairpin loop. The amount of in vitro translation product of repB mRNA was inversely proportional to the ctRNA concentration. Mutations in the terminal and internal hairpin loops of the ctRNA had inhibitory effects on its binding to the target mRNA. We propose that the intact structures of the terminal and internal hairpin loops, respectively, play important roles in forming the initial kissing and extending complexes between the ctRNA and target mRNA and that these regulate the copy number of this plasmid.
Background: Epstein-Barr virus associated gastric lymphoepithelioma-like carcinoma (LELC) is characterized by the intensive infiltration of lymphoid cells, the presence of EBV, and the better prognosis over typical adenocarcinoma. Thus, it was assumable that viral latent proteins may be responsible for the recruitment of a certain T cell repertoire to EBV-associated gastric carcinoma. Methods: To examine above possibility, EBV gene expression in gastric carcinoma tissues and usage of TCR among the tumor infiltrating lymphocytes were analyzed. Results: EBV specific DNA and EBERs RNA were detected in 4 out of 30 patients. RT-PCR analysis revealed that all 4 of EBV-positive tumor tissues expressed EBNA1 mRNA and BARTs and LMP2a was detected only one sample out of 4. However, the EBNA2 and LMP-1 transcripts were not detected in these tissues. $CD8^+$ T cells were the predominant population of infiltrating lymphocytes in the EBV-positive gastric carcinoma. According to spectra type analysis of infiltrating T cells, 10 predominant bands were detected by TCR $V{\beta}$ CDR3 specific RT-PCR from 4 EBV-positive tumor tissues. Sequence analysis of these bands revealed oligoclonal expansion of T cells. Conclusion: These findings suggest that clonally expanded T cells in vivo might be a population of cytotoxic T cells reactive to EBV-associated gastric carcinoma.
Cyclosporin A (CsA) has been used clinically as an immunosuppressive drug to prevent organ transplant rejection and in basic research as a mitochondrial permeability blocker. It has been reported that CsA has a protective role in severed neurons and a neurotrophic effect in neuronal cells. However, the molecular mechanisms underlying the stimulation of neuronal cell proliferation by CsA have not yet been elucidated. In our current study, we investigated CsA responsive proteins in PC12 cells using a systematic proteomic approach. The viability of these cells following CsA treatment increased in a dose- and time-dependent manner. Proteins in the CsA-treated PC12 cells were profiled by two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) and identified by matrix-assisted laser desorption ionization time-of flight (MALDI-TOF) and electrospray ionization quadupole time-of-flight mass spectrometries (EIQ-TOFMS). This differential expression analysis showed significant changes for 10 proteins (6 up-regulated and 4 down-regulated) upon CsA treatment that were related to cell proliferation, metabolism and the stress response. These proteomics data further our understanding of the proliferation mechanisms of PC12 cells exposed to CsA and demonstrate that our methodology has potential to further elucidate the mechanisms and pathways involved.
Park, Ji-Eun;Kim, Tae-Gyun;Jung, Ui-Won;Kim, Chang-Sung;Choi, Seong-Ho;Cho, Kyoo-Sung;Kim, Chong-Kwan;Chai, Jung-Kiu
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.35
no.4
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pp.1039-1052
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2005
IMZ는 "intramobile cylinder implant system" (IMZ)로 독일에서 가장 오래되고 많이 사용되어진 임플란트 중 하나이다. 이 임플란트에 관한 장기적 성공률과 생존률에 대한 연구는 대개 80% 이상을 보고하고 있다. 그러나, 연세대학교 치과병원 치주과에서 식립된 83개의 임플란트에서는 이전의 연구와는 다른 결과를 나타내었다. 1. IMZ 임플란트의 생존률은 67.5% 였다. 2. 변연 치조골 소실에 대한 성공 기준을 적용한 결과 성공률은 49.4%로 나타났다. 3. 발거된 총 27개의 임플란트 중에서 임플란트 주위 골소실을 가지는 경우는 17개, 내부구조 파절은 4개, 식립체 파절은 5개로 보고되었다. 4. 10년 이상 생존된 임플란트에서 변연골 소실의 평균치는 2.82mm였다. IMZ 임플란트는 장기적으로 높은 실패율을 보고하였다. 이는 cylindrical design, titanium plasma flame spray coating, prosthodontic complication 등의 요소에 기인한 것으로 사료된다. 임플란트는 그 형태, 표면 처리 등 여러 가지 요인들에 의해 실패가 나타날 수 있으며 본 연구를 통해 임플란트의 개발 및 선택에 바탕이 될 수 있을 것으로 생각된다.
Objectives Aim of this study was to evaluate the clinical use and the efficacy of Frialit-2 implant system. Experimental Methods Fifty nine patients received placement of Frilalit-2 implants(137 implants) in their maxillary anterior and posterior sites(40 and 97 implants). Intraoral & clinical examination, chart review and radiographs were taken from each patient. Results 1. The total implant survival rate was 92.7% after a mean follow-up period of 19.9 months. 2. The implant survival rate placed in anterior region was 97.5%. 3. The implant survival rate placed in posterior region was 90.7%. 4. The implant survival rate placed in atrophic posterior maxilla with advanced technique (GBR, Sinus elevation) was 87.2%. 5. The implant survival rate placed in type N(D4) bone was 82%, while 95.7% in type III (D3), and 100% in type II(D2) bone. 6. Most of the failed implants(7 of 10) were removed during the maintenance stage after prosthodontic treatment. Conclusion It was concluded that Frialit-2 implant could be used satisfactorily in the esthetic anterior region, but the use in the posterior region, especially with poor bone quality and quantity, further studies are needed.
Since CKD-712 has been developed as an anti-inflammatory agent, we examined the effect of CKD-712 during TLR4 signaling. Using HEK293 cells expressing TLR4, CKD-712 was pre-treated 1 hr before LPS stimulation. Activation of NF-${\kappa}B$ was assessed by promoter assay. The activation of ERK, JNK, p38, IRF3 and Akt was measured by western blotting. CKD-712 inhibited the NF-${\kappa}B$ signaling triggered by LPS. The activation of ERK, JNK, p38 or IRF3 was not inhibited by CKD-712. On the contrary the activation of these molecules was augmented slightly. The activation of Akt with stimulation of LPS was also enhanced with CKD-712 pre-treatment at lower concentration, but was inhibited at higher concentration. We suggest that during TLR4 signaling CKD-712 inhibits NF-${\kappa}B$ activation. However, CKD-712 augmented the activation of Akt as well as Map kinases. Therefore, we suggest that CKD-712 might have a role as an immunomodulator.
Endochondral bone formation is the process by which mesenchymal cells condense to become chondrocytes, which ultimately form new bone. The process of chondrogenic differentiation and hypertrophy is critical for bone formation and as such is regulated by many factors. In this study, we aimed to indentify novel factors that regulate chondrogenesis. We investigated the possible role of isopsoralen in induction of chondrogenic differentiation in clonal mouse chondrogenic ATDC5 cells. Isopsoralen treatment stimulated the accumulation of cartilage nodules in a dose-dependent manner. Further, ATDC5 cells treated with isopsoralen were stained more intensely with Alcian blue than control cells, suggesting that isopsoralen increases the synthesis of matrix proteoglycans. Similarly, isopsoralen markedly induced the activation of alkaline phosphatase activity compared with control cells. Isopsoralen enhanced the expressions of chondrogenic marker genes such as collagen II, collagen X, OCN, Smad4 and Sox9 in a time-dependent manner. Furthermore, isopsoralen induced the activation of extracellular signal-regulated kinase (ERK) and p38 MAP kinase, but not that of c-jun N-terminal kinase (JNK). Isopsoralen significantly enhanced the protein expression of BMP-2 in a time-dependent manner. PD98059 and SB 203580, inhibitors of ERK and p38 MAPK, respectively, decreased the number of stained cells treated with isopsoralen. Taken together, these results suggest that isopsoralen mediates a chondromodulating effect by BMP-2 or MAPK signaling pathways, and is therefore a possible therapeutic agent for bone growth disorders.
Sushil K. Dwivedi;Abhinav Bhise;Rajkumar Subramani;Jeongsoo Yoo
Journal of Radiopharmaceuticals and Molecular Probes
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v.7
no.1
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pp.33-40
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2021
Recently, antibody-drug conjugates (ADCs) are used to deliver efficient cytotoxic payloads selectively in cancer cells. In the designing of an ADC, the antibody is connected to a toxic payload via a covalent linker, which helps to solubilizes the typical hydrophobic payload as well as stabilizes the linkage over circulation. The development of the linkers for the antibody drug conjugate is still in demand. Initially, the acid, disulfide, and cathepsin-sensitive ADCs attracted considerable attention for the delivery of a potent cytotoxic payload but suffer from instability in human and mouse plasma with a short half-life. In addition, It also suffer from a solubility issue that induces aggregation, which is the major problem in their development. ADCs associated with sulfatase and phosphatase cleavable linker are highly soluble due to the anionic nature of sulfate and phosphate groups. The ADCs also showed high stability in human and mouse plasma. Therefore, to overcome these limitations, sulfatase and phosphatase cleavable linkers were developed. This review focuses on the recently reported advantages of sulfatase and phosphatase cleavable linkers for ADCs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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