The efficacy of bovine immune sera to correct the calves with failure of passive transfer(FPT) was evaluated. Immune sera were produced from 14 one-year-old Holstein cattle which were inoculated commercial combined viral vaccine, administered by the challenge of some main enteric or respiratory viruses, aseptically filtered and stored at $4^{\circ}C$ before used. After the treatment of bovine immune sera, Mean transfer factor($mg/d{\ell}$, of IgG administered/kg of body weight) was $5.46{\pm}2.74,\;11.17{\pm}1.27,\;1.40{\pm}0.21$ in K-IP, H-IP and K-IV group, respectively. The corrective effect of bovine immune sera to FPT calf without any clinical signs showed that intravenous route was more effective than intraperitoneal administration(P<0.01). FPT calves with severe signs were not effective response to the immunotherapy used and consequently died within 10 days after the treatment. Ten percentage of controls appeared the clinical signs including diarrhea. On the contrary, there were not any clinical signs in K-IP and H-IV group. There was significant increase of the neutralizing titer against bovine viral diarrhea virus and bovine coronavirus as well as of cell population including CD2, CD4, and monocyte in K-IP and H-IV group after the immunotherapy(P<0.05). Also, K-IP and H-IV group showed the successful correction to FPT within one week after the immunotherapy, but controls had kept the FPT two-four weeks even after the same treatment. Consequently, the results were suggesting that the bovine immune sera could be used the corrective tool to young calves with FPT.
De Graaf, Dirk-C.;Coninck, Hans-De;Petry, Franz;Eeckhout, Ilka-B.;Peeters, Johan-E.
Parasites, Hosts and Diseases
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v.40
no.1
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pp.59-64
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2002
A Cryptosporidium parvum sporozoite and oocyst λgt11 cDNA library was screened with a hyperimmune rabbit serum that was developed against insoluble fragments of ultrasonicated oocysts. A clone named Cp22.4.1 encoding a protein of 231 amino acids with 4 zinc-finger domains characterized by a Cys-X2-Cys-X4-His-X4-Cys motif was isolated and characterized. There was a complete match between the sequencing data of the coding region of Cp22.4.1 and the corresponding gene at chromosomal level. Cloning in a pBAD-TOPO-TA expression vector permitted to evaluate the antigenicty of the recombinant His-tagged antigen. This antigen was recognized by 2 out of 5 sera from Cruptosporidium immune calves and not by sera from parasite naive animals.
The research has been aimed to investigate the effect of different sera including fetal bovine serum (FBS), male bovine serum (MS), female bovine serum (FS), and castrated-male bovine serum (C-MS) on cell proliferation, follicular maturation and ovulation in vitro. Established cell lines and primary cells were cultured in the culture media supplemented with different sera and cells proliferation was observed by cell counting and MTT assay. The results indicated that cell proliferation was significantly different for different serum source. Proliferation of bovine and human myogenic satellite cells was highest in MS. In contrast, proliferation of breast cancer cells and immune cells were the highest in FS and FBS, respectively. There was no difference in the rate of follicular growth, whereas the rate of ovulation was higher in FBS and C-MS. Finally, the wound healing effect and cell proliferation of 3T3-L1 cells showed that wound healing was fastest in FS and cell proliferation was higher in MS. These results suggest the importance of an optimal serum selection in the experiments involving cell culture system, and gender-specific Hanwoo sera may be used as a substitute to FBS.
Lee, Min Ah;Seo, Sung Ig;Han, Seung Kyu;Kim, Woo Kyung
Archives of Plastic Surgery
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v.32
no.4
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pp.529-532
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2005
Expanding cells ex-vivo is very important in tissue-engineering. Culture medium is usually supplemented with fetal bovine serum(FBS) in most of the experiments. However, cells grown in bovine serum media may posses the possibilities of disseminating bovine diseases and/or stimulating the patient's immune reactions. To overcome these problems, autologous or homologous serum should be used instead of the FBS. The purpose of this study is to compare cell proliferation and collagen synthesis depending on the kind of sera mixed on media and to provide a guideline on applying established experimental data to clinical cases. Human dermal fibroblasts were obtained from four patients. Five thousand cells per well in 96-well plates were incubated DMEM/F-12 Nutrient with varying serum mixture; 10% autologous serum, 10% homologous serum, and 10% FBS. Five days after incubation fibroblast proliferation and collagen production were determined by MTT assay and CICP enzyme immunoassay. The mean cell number were; $3.95{\times}10^4/well$, $2.97{\times}10^4/well$ and $2.30{\times}10^4/well$, respectively. The average amounts of collagen synthesized were; 238.13 ng/ml, 204.88 ng/ml, and 163.88 ng/ml in each. These results show that the use of human serum mixture may contribute to, not only preventing disseminated infection of bovine diseases. but also increase cell proliferation and collagen synthesis without simulating the patient's immune reactions.
Kim, Ji-Hoe;Kim, Min-Soo;Nahm, Sang-Soep;Lee, Dong-Mok;Pokharel, Smritee;Choi, In-Ho
Animal cells and systems
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v.15
no.2
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pp.147-154
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2011
Animal cell cultures generally require a nutrient-rich medium supplemented with animal serum. Adult bovine serum contains a variety of nutrients including inorganic minerals, vitamins, salts, proteins and lipids as well as growth factors that promote animal cell growth. To evaluate the potential use of gender-specific bovine serum (GSBS) for cell culture, the biochemical properties of male serum (MS), female serum (FS) and castrated-male serum (CMS) were investigated. Overall, the chemical profile of GSBS was similar to that of bovine references except for glucose, creatine kinase, lactate dehydrogenase and potassium. FS showed elevated total protein and sodium concentrations compared to MS and CMS. Proteins present in MS, FS and CMS but absent in fetal bovine serum (FBS) were selected by two-dimensional gel electrophoresis and identified by peptide mass fingerprinting. Some of the identified proteins are known to be involved in immune responses and the others have unknown physiological roles. Moreover, it was found that some proteins such as alpha-2-macroglobulin appeared to be gender-specific with higher contents in FS. Insulin and testosterone was significantly higher in MS, and $17{\beta}$-estradiol and estrone were higher in FS, as compared to the other sera. Taken together, the results indicate that each GSBS has a different ratio of components. Differences in serum constituents may affect cell cultures in a different manner and could be beneficial, depending on the specific aim of cell cultures.
Neospora caninum is the etiologic agent of bovine neosporosis, which affects the reproductive performance of cattle worldwide. The transmembrane protein, NcSRS2, and dense-granule protein, NcGRA7, were identified as protective antigens based on their ability to induce significant protective immune responses in murine neosporosis models. In the current study, NcSRS2 and NcGRA7 genes were spliced by overlap-extension PCR in a recombinant adenovirus termed Ad5-NcSRS2-NcGRA 7, expressing the NcSRS2-NcGRA7 gene, and the efficacy was evaluated in mice. The results showed that the titer of the recombinant adenovirus was $10^9TCID_{50}/ml$. Three weeks post-boost immunization (w.p.b.i.), the IgG antibody titer in sera was as high as 1:4,096. IFN-${\gamma}$ and IL-4 levels were significantly different from the control group (P<0.01). This research established a solid foundation for the development of a recombinant adenovirus vaccine against bovine N. caninum.
This study was performed to investigate the effects of the peptide to carrier ratio on the immune and biological functions to inhibin immunization in Hanwoo. A peptide sequence kom the alpha -subunit (19~32 peptide) of porcine inhibin was synthesized for antigen and conjugated to human serum albumin(HSA) for carrier protein. Anti-inhibin sera(AI) were produced 52 day later from rabbit after injection of inhibin-$\alpha$ -subunit peptide conjugator for antigen with the interval of 2 weeks. Immune-blotting analysis using antibody specific fur inhibin-$\alpha$ subunits revealed that the inhibin was detected at 1.0 cm bovine follicular fluid(bFF). However, each stage of corpus lutea and 0.1 cm of follicular fluid were not detected. The maximal contents of estradiol-17 $\beta$ in Hanwoo ovarian follicular fluid were detected at 2.0 cm of follicular size(diameter), but the mean total contents of these hormone decreased significantly with decreasing diameter of follicles. However, progesterone contents of follicular fluid were high at 1.0 cm of follicle. Progesterone secretion by Hanwoo granulosa cell cultured for 48 hr in vitro was significantly (p<0.05) inhibited in 5% bFF and 5% bFF + 5% AI addition group compared with control group. Estradiol-17 $\beta$ secretion by Hanwoo granulosa cell cultured for 48 hr in vitro was significantly (p<0.05) increased in 5% AI and 5% AI + 5% bFF addtion group compared with control group. However, the groups added 5% AI were not changed compared to control groups in progesterone and estradiol-17 $\beta$. Taken together, we suggested that inhibin in the mature FF plays a pivotal role on the biosynthesis of steroid hormone of follicular cells during follicular development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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