A rapid, sensitive, and specific enzyme-linked immuno-sorbent assay (ELISA) for bovine casein was developed. Biotinylated casein and peroxidase-conjugated avidin were used in the assay with antibody separated from yolks of immunized hens. Caseins were biotinylated with sulfo-N-hydroxy succinimido biotin and peroxi-dase-conjugated avidin bound the biotinylated casein which became bound to immobilized anti-body on a microplate. The antibodies were specific for bovine $\alpha$- and $\beta$-caseins, and their cross-reactivities with whey proteins, IgG, and serum albumin from bovine were not detectable by ELISA and Western blot. Various sensitivities ranging from 2ng/ml to 20${\mu}\textrm{g}$/ml of casein were achieved, and were controlled by adding vanous concentrations of the biotinylated casein. Parallelism was observed between standard and sample curves. The coefficients of variation of intra-assays and inter-assays from the most sensitive assay were 5.5 and 5.7%, respectively, at the 50% displacement. Casein contents of peripaturient milk samples showed that casein secretion rapidly increased 3d prepartum.
A total of 80 cows, including 40 top mastitis resistant and 40 top mastitis susceptible animals as Group I and Group II, were selected from a population of 520 cows based on clinical mastitis occurrence. PCR-SSCP analysis on four fragments within the 5'region and two fragments of Exons 4,15 of bovine lactoferrin (bLF) revealed that four fragments-P1,P4,E4,E15-had polymorphisms which totally included six base mutations, and only two of them had significant differences in allele frequencies between resistant and susceptible groups, P1 (53.7% vs. 70.0%, p<0.05) and P4 (55.0% vs. 68.8%, p<0.05). Further study on these two promising markers combined with the milk performance traits of cows demonstrated that their selection would result in higher fat percentage (p<0.05), lower Somatic Cell Score (SCS) (p<0.05) and Clinical Mastitis Residuals (CMR) (p<0.01) indicating higher mastitis resistance and lower milk yield (p<0.05). The putative transcription factor binding sites in the 5'region were also studied by using MatInspector 7.2.2 software, and two signal pathways regulating the expression of bLF including the NF-${\kappa}B$ pathway and nuclear hormone receptor pathway were predicted.
Streptococcus spp. comprising Streptococcus (S.) uberis S. dysgalactiae strains is major causeof bovine mastitis from particularly well-managed or low somatic cell count herds that have successfullycontrolled contagious pathogens. In this study, antimicrobial susceptibility and genetic characteristics of S.uberis isolated from clinical or subclinical mastitis milk at 2003 were investigated. Eighty seven isolatesof Streptococus spp. were identified by the conventional biochemical methods. The antimicrobialsusceptibility by disk diffusion method was determined for 46 S. uberis, 11 S. bovis, 10 S. oralis, 6 S.uberis and 14 other Streptococcus spp.. Overall, the tested strains were susceptible to tetracycline (11.5%),amikacin (14.9%), streptomycin (16.1%), neomycin (26.4%), kanamycin (35.6%), gentamicin (65.2%),oxacillin (70.1%), ampicillin (75.9%), chloramphenicol (78.2%), and cephalothin (97.7%). Additionally, S.uberis strains were susceptible to pencillin G (97.8%), but resistant to erythromycin (76.0%) by minimalinhibitory concentration test. The multiple-drug resistance rate of isolated bacteria to 4 more thanamplification fingerprinting patterns amplifed with primer 8.6d showed that 3 to 8 number of distinguishableDNA fragments ranged from 180 bp to 1,20 bp. Thirty seven isolates of S. uberis strains were subtypedinto 8 distinct patterns. Each subtype revealed a typical pattern of antimicrobial susceptibilities. Thesefindings demonstrate that S. uberis isolates were mastitis pathogens of diverse serotypes, and oftenencountered the diverse resistant patterns.
Li, Cong;Cai, Wentao;Liu, Shuli;Zhou, Chenghao;Cao, Mingyue;Yin, Hongwei;Sun, Dongxiao;Zhang, Shengli;Loor, Juan J.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
/
v.33
no.11
/
pp.1725-1731
/
2020
Objective: An initial RNA-Sequencing study revealed that UDP-galactose-4-epimerase (GALE) was one of the most promising candidates for milk protein concentration in Chinese Holstein cattle. This enzyme catalyzes the interconversion of UDP-galactose and UDP-glucose, an important step in galactose catabolism. To further validate the genetic effect of GALE on milk protein traits, genetic variations were identified, and genotypes-phenotypes associations were performed. Methods: The entire coding region and the 5'-regulatory region (5'-UTR) of GALE were re-sequenced using pooled DNA of 17 unrelated sires. Association studies for five milk production traits were performed using a mixed linear animal model with a population encompassing 1,027 Chinese Holstein cows. Results: A total of three variants in GALE were identified, including two novel variants (g.2114 A>G and g.2037 G>A) in the 5'-UTR and one previously reported variant (g.3836 G>C) in an intron. All three single nucleotide polymorphisms (SNPs) were associated with milk yield (p<0.0001), fat yield (p = 0.0006 to <0.0001), protein yield (p = 0.0232 to <0.0001) and protein percentage (p<0.0001), while no significant associations were detected between the SNPs and fat percentage. A strong linkage disequilibrium (D' = 0.96 to 1.00) was observed among all three SNPs, and a 5 Kb haplotype block involving three main haplotypes with GAG, AGC, and AGG was formed. The results of haplotype association analyses were consistent with the results of single locus association analysis (p<0.0001). The phenotypic variance ratio above 3.00% was observed for milk protein yield that was explained by SNP-g.3836G >C. Conclusion: Overall, our findings provided new insights into the polymorphic variations in bovine GALE gene and their associations with milk protein concentration. The data indicate their potential uses for marker-assisted breeding or genetic selection schemes.
Purified bee venom was collected from colonies of honeybees (Apis mellifera L.) using a bee venom collector under sterile conditions and then purified under strict laboratory conditions. Purified bee venom contained $63.9{\pm}5.4%$ melittin, $10.9{\pm}1.6%$ phospholipase A2, and $2.3{\pm}0.3%$ apamin. Purified bee venom has various anti-bacterial, anti-inflammatory and immunostimulating effects. In this study, we evaluated purified bee venom which are mammary gland cells, MAC-T cells are used to increase the synthesis of milk protein. Purified bee venom promoted the proliferation of MAC-T cells at concentrations below $1{\mu}g/mL$, but cytotoxicity at $10{\mu}g/mL$ and above. As a result of the increase in the synthesis of ${\beta}-casein$, a milk protein after treatment with MAC-T cells at a concentration of the bee venom without cytotoxicity, the ${\beta}-casein$ content in the cell culture was increased when treated at a concentration of 1 ng/mL or more. In addition, it was confirmed that purified bee venom significantly increased the expression of bovine ${\beta}-casein$ (bCSNB) mRNA, a ${\beta}-casein$ synthesis gene, at a concentration of 1 ng/mL or more. These results suggest that purified bee venom can be used to increase the production of livestock by ultimately increasing the expression of milk protein.
This study was performed to investigate Mycoplasma (M) spp. infection status of dairy cow in South Korea. Among 8,485 bulk tank milk collected from dairy farms of the 5 areas, 26 samples (0.30%) were positive for Mycoplasma by direct culture method. The isolation rates of Mycoplasma spp. according to the areas were 0.51% in Kyonggi, 0.16% in Cholla, 0.23% in Gyoungsang, 0.12% in Chungchong, and 0.08% in Kangwon. In the species identification test by indirect immunoperoxidase test, 16 out of 26 isolates were identified as M bovis (61.53%), M bovigenitalium (23.07%), M californicum (7.69%), M alkalescens and Acholeplasma laidlawii (3.84%), respectively. The isolation rate of Mycoplasma spp. from 208 quarter milk samples in culling cows due to severe clinical mastitis was 3.0%. These Mycoplasma spp. were identified as M bovis (62.0%), M bovigenitalium (12.0%), M californicaum (12.0%), and M alkalescens (12.0%). This study shows that the bovine mammary gland infected by Mycoplasma spp. is present in some dairy farms and the routine culture test of bulk tank milk samples for Mycoplasma is needed for a high quality milk promotion services.
Major objective was to evaluate three doses of bST (POSILAC(R)) injected into Holstein cows during the transition period and through 56 d of lactation for potential to improve DMI, BCS, BW, metabolites, hormones, IGF-I and milk production. Biweekly injections of bST (0, 5.1, 10.2, or 15.3 mg bST/d) began 28 d before expected parturition and continued through 56 d postpartum. Twenty-three of the 25 multiparous Holstein cows assigned randomly to four groups completed experiment (7, 5, 6 and 5 cows/group, respectively). The DMI, BW and BCS were recorded weekly throughout the prepartum and postpartum periods and blood samples were collected thrice weekly for analyses of ST, insulin, $T_{4}$, $T_{3}$, IGF-I, glucose and NEFA. Milk yields were recorded daily through 60 d postpartum and milk components measured once weekly. Mathematical model for data analyses for prepartum and postpartum periods included treatment, calving month, and the two-factor interaction. Cows injected with 10.2 and 15.3 mg bST prepartum had greater mean prepartum concentrations of ST and IGF-I. Prepartum injections of bST did not affect prepartum BW or BCS. On average, cows injected postpartum better maintained their BCS during first 60 d of lactation (3.15$\pm$0.06, 3.12$\pm$0.007, 3.20$\pm$0.006 and 3.58$\pm$0.009). Treatments did not affect mean prepartum DMI but cows injected with 15.3 mg bST/d had greatest DMI and greatest mean daily MY during the first 3 wk and tended to be greater during first 60 d of lactation. Cows injected with two highest bST doses (10.1 and 15.2 mg/d) had greater mean postpartum concentrations of ST and $T_{3}$, but IGF-I, $T_{4}$, glucose and NEFA did not differ across groups. No adverse effects of bST treatment were observed.
Porcine colostrum and milk were separated into the acid-soluble and casein fractions by acidification followed by centrifuge. The acid-soluble fraction of porcine colostrum was further separated by liquid chromatography and anisotropic membrane filtration. Trypsin and chymotrypsin inhibitory capacity in porcine colostrum, milk and their components was determined by incubating bovine trypsin or chymotrypsin in a medium containing their corresponding substrates with or without addition of various amounts of porcine colostrum, porcine milk or their components. The inhibition of insulin-like growth factor I (IGF-I) and epidermal growth factor (EGF) degradation in pig small intestinal contents by porcine colostrum was measured by incubating iodinated IGF-I or EGF with the intestinal contents with or without addition of porcine colostrum. Degradation of labeled IGF-I or EGF was determined by monitoring the generation of radioactivity soluble in 30% trichloroacetic acid (TCA). The results showed that porcine colostrum had high levels of trypsin and chymotrypsin inhibitory activity and increased the stability of IGF-I and EGF in pig intestinal contents. The inhibitory activity declined rapidly during lactation. It was also found that trypsin and chymotrypsin inhibitory activity and the inhibition on IGF-I and EGF degradation in the acid-soluble fraction were higher than that in the casein fraction. Heat-resistance study indicated that trypsin inhibitors in porcine colostrum survived heat treatments of $100^{\circ}C$ water bath for up to 10 min, but exposure to boiling water bath for 30 min significantly decreased the inhibitory activity. Compared with the trypsin inhibitors, the chymotrypsin inhibitors were more heatsensitive. Separation of the acid-soluble fraction of porcine colostrum by liquid chromatography and anisotropic membrane filtration revealed that the trypsin and chymotrypsin inhibitory capacity was mainly due to a group of small proteins with molecular weight of 10,000-50,000. In conclusion, the present study confirmed the existence of high levels of protease inhibitors in porcine colostrum, and the inhibition of porcine colostrum on degradation of milk-borne growth factors in the pig small intestinal tract was demonstrated for the first time.
Bee venom has been used as to prevent and treat bovine mastitis as natural antimicrobial compounds in some dairy cattle farms in Korea. It is needed to determine the residual of bee venom in milks of dairy cattle treated with bee venom. Since bee venom is not approved as a raw material for animal drugs, the preprocessing method to detect bee venom residual in milk and the tolerance limit for its residue has not been established yet in Korea. Therefore, the purpose of this study was to develop pre-processing method not affecting major component of bee venom for detection of its residue in milks using ultra-high performance liauid chromatography (UHPLC). In addition, bee venom residue was also analyzed in milk samples of dairy cattle treated for mastitis with bee venom using UHPLC with the developed pre-processing method in this study. As a result, melittin, histamin and phospolipase A2, the major components of bee venom, were all detected by UHPLC with the pre-processing method developed in this study. The results of this study suggest that the pre-processing method developed in this study can be useful to detect bee venom residue in dairy cattle milk. We also found that no bee venom residues were detected in milk samples collected from dairy cattle treated with bee venom after 1 and 3 days, respectively.
A study was carried out to define the relationship between the N-acetyl-$\beta$-D-glucosaminidase(NAGase) levels and isolated pathogenic bacteria in 379 quarter fore milk of mastitis suspected samples collected in this clinics. All samples were tested the NAGase, California mastitis test(CMT), Somatic cell count(SCC) and bacterial culture. Except 111 from 379 samples, 268 bacteria-positive quarter fore milk samples were classified into the latent and mastitis infection group by SCC($500,000cells\;per\;m{\ell}$), and the mean NAGase levels($nmol/min/m{\ell}$) of each isolated pathogen in mastitis infection group were Staphylococcus aureus 3.067, Coagulase-negative staphylococci 4.083, Staphylococcus aureus 3.594, Str. uberis 3.513, Str. dysgalactiae 1.640, E coli 4.441 and gram negative rods 4.560, respectively. Most of the relationship between mean SCC and NAGase in each pathogen group were highly significant using a student t test(p<0.05). When the mastitis pathogens were classified into minor(Coagulase-negative staphylococci, Corynebacterium sp.) and major pathogen group(Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Str. uberis, Str. dysgalactiae, gram negative rods), the NAGase levels were higher at major than minor pathogen group. On the other hand, when the mastitis milk samples were classified by SCC($500,000cells\;per\;m{\ell}$) and by the presence of pathogen(IDF scheme), the NAGase levels were also higher at the mastitis than latent infection. The possibility of combining SCC and NAGase data in order to give the more difinitive diagnosis is discussed.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.