The purpose of this study was to perform on the biological activity of Magnolia and Zizyphi fructus extract mixtures on the wound healing of defected rat calvaria. For the determination of the mixture ratio of two extracts for oral administration, preliminary experiments were performed with the mixture combination of 2000 and $3000{\mu}g/ml$ of Magnolia extract, and also 20, 30, 200, 300, 2000 and $3000{\mu}g/ml$ of Zizyphi fructus extract, respectively and divided into 6 groups. The combination of extracts mixture were tested on the enhancing effect of cellular activity. The effect of the extracts mixture on the cellular activity was evaluated using MTT method and measured on the results with optical density by ELISA reader. The ability to tissue regeneration of the extracts mixture was performed by measuring new bone and new connective tissue regeneration on the 5mm defected rat calvaria for 1, 2 and 3 weeks after oral administration of 2 different dosages groups : 10:1(0.1g/kg) and 10:1(0.5g/kg). It was employed the same dosages of unsaponifiable fraction of Zea Mays L as positive controls. Each group of rat was sacrificed and en bloc section for histological examination. The effect on the cellular activity of each mixture ratio showed significantly higher in $2000{\mu}g/ml$ of Magnolia extract and $200{\mu}g/ml$ of Zizyphi fructus extract group to compare with other groups. These preliminary results showed that appropriate mixture ratio of two extracts was 10:1 of Magnolia and Zizyphi fructus extract. Histological examination on the activity of tissue regeneration of each group showed that 2weeks and 3weeks specimens of 0.5g/kg of 10:1 extract mixture of Magnolia and Ziziphi fructus administrated rat calvaria revealed significantly more osteoid and new bone formation of defected calvaria with unification of defected area than the specimens of any other negative and positive controls. Even though the specimen administrated the same dosages of unsaponifiable fraction of Zea Mays L, positive controls, showed the trend that they promote significantly the repair of calvarial defect, their bone reparative activities were less inductive than the same dosages of Magnolia and Ziziphi fructus extract mixture. These results implicated that the mixture of Magnolia and Zizyphi fructus extracts should be highly effective on the wound healing of bony defected site and might have potential possibilities as an useful drug to promote periodontal tissue regeneration.
For reconstruction of the bony defect, various artificial substitutes were developed. Among them, there has been a study of calcium phosphate coated bone substitutes for increasing attachment of osteoblasts in vivo. The purpose of this study was to evaluate the effects of serum and platelet-rich plasma (PRP) on calcium phosphate coated culture plate for the initial attachment, proliferation and activity of osteoblasts. After sampling the blood from white rats and concentrating by centrifugation, the amount of attachment of PDGF-BB and $TGF-{\beta}$ on the calcium phosphate coated culture plate was measured. Cultured HOS and ROS 17/2.8 cell was measured on attachment level and proliferation rate of osteoblasts. Alkaline phosphatase activity of HOS and ROS 17/2.8 cell was measured for studying on the activating rate of osteoblast. 1. Counting the amount of platelets of seperated plasma and PRP, the average number of platelets was 177,003 $cell/{\mu}l$ in plasma, and 1,656,062 $cell/{\mu}l$ in PRP, which was about 9 times as high as in plasma. 2. Amount of PDGF-BB deposited at calcium phosphate coated plate had increased by the total amount of plasma and PRP on the culture plate, whereas $TGF-{\beta}$had been deposited on the plate only when treated by $50{\mu}{\ell}$ of PRP(p<0.01). 3. After plating serum and PRP for 3 hours, we attached with HOS and ROS17/2.8 cell for 1 hour and 4 hours. There were no significant difference of the attachment between serum and control group, whereas there were significantly difference of the attachment between depositioning of PRP and control group. 4. After attaching plasma and PRP for 3 hours, cell number has much increased when HOS and ROS17/2.8 cell had been cultured for 48 hours(p<0.05). 5. After attaching plasma and PRP for 3 hours, concentration of alkaline-phosphatase has increased when HOS and ROS17/2.8 cell had been cultured for 48 hours(p<0.01). These results suggested that PRP affected on initial cell attachment rather than proliferation and activation of osteoblasts at calcium phosphate coated plate.
The aim of this study was to compare periodontal conditions around mesially tipped molars by a tipping degree. Patients who had been consecutively treated at the Department of Periodontology, Chonbuk National University Hospital from October 1999 to August 2001 were assessed with radiographs taken at their molar regions. Of all molars investigated, 142 molars of 116 patients tipped mesially more than 10 degrees to the line perpendicular to an occlusal plane were selected for the study. The tipped molars were divided into 2 groups with a reference to a tipping degree, i.e., 66 slightly tipped(group 1 : <$30^{\circ}$) and 76 severely tipped molars (group 2 : ${\geq}30^{\circ}$). Probing depth(PD), plaque retention index(PRI) at mesial surfaces of tipped molars and tooth mobility(TM) were recorded at the clinical examination. Tipping degree(TD) and alveolar bony defect(ABD) at the mesial surface of the molars were measured in a radiograph. The results showed that no statistical differences were found between groups in all measured variables. In Pearson correlation analysis performed in the same group, a positive relationship was shown between PRI and PD in the group 1 and, in the group 2, between PRI and PD as well as PRI and ABD(p < 0.01). However, no statistically significant relationship was found between TD and all other variables in both groups. Within limitations of this study, it may be concluded that tipping degree did not seem to influence periodontal conditions, i.e., PD, ABD and TM of mesially tipped molars per se, but plaque presence/absence seemed to mainly affect the periodontal conditions of the tipped molars.
The purpose of the present study was to evaluate the histologic results of bone cavities that were surgically created in the calvaria of rabbit and filled with $HA/{\beta}-TCP$ composite powders, which had been developed in Korea (Dentium, Korea). Ten young adult rabbits were used. Four defects were surgically produced in calvaria of each rabbit. Each rabbit was anesthetized with Ketamine-HCI (5 mg/kg, Yuhan Cor. Korea) and Xylazine-HCI (1.5 ml/kg, Yuhan Cor. Korea)). An incision was made to the bony cranium and the periosteum was reflected. Using a trephine bur (external diameter: 8 mm, 3i, USA), 4 'through-and-through' bone defects were created with copious irrigation, and classified into 4 groups: control group: no graft materials, experimental group I: normal saline + graft materials: experimental group II: venous blood + graft materials: experimental group III: graft materials only. The defects were randomly filled with graft materials. The defects were closed with resorbable suture material. At the end of the surgical procedure, all animals received a single intramuscular injection of antibiotics Gentamicin (0.1 mg/kg, Dae Sung Microb. Korea). Rabbits were sacrificed with phentobarbital (100 mg/kg) intravenously at 1-, 2-, 4-, 6- and 8-week after. Specimens were treated with hydrochloric acid decalcifying solution (Fisher Scientific, Tustin, CA) and sectioned by bisecting the 8 mm diameter defects. The histologic specimens were prepared in the general method with H & E staining at 6 ${\mu}m$ in thickness. The results were as follows; 1. New bone formation showed from after 2-week of surgery in defect area. As time lapsed, lots of new bone formation and mature bones showed. 2. Histologically, degree of new bone formation could not be discerned among the experimental groups. But, for experimental group II, lots of cells gathered around graft materials after 1-week of surgery, new bone formed slightly faster and than the others at 1-week after. For experimental group I, a few inflammatory finding showed around graft material at after 1-week and after 2-week of surgery. 3. No bone formation did show for control group. Based on histologic results, the new $HA/{\beta}-TCP$ composite powders appeared to act as a scaffolding material for regeneration of osseous defects.
Purpose: Recently, bioceramics have become popular as a substitute graft material for reconstruction of bony defect after trauma or tumor surgery. Among the bioceramic materials, hydroxyapatite (HA) is favored due to its biocompatibility. HA scaffold is composed of the interconnected reticular framework, macropores and micropores. Macropores play an important role in cell migration, nutrients supply and vascular ingrowth. On the other hand, a number of micropores less than $10{\mu}m$ form an irregular surface on HA scaffolds, which prevents the osteoblast from adhering and proliferating on the surface of HA scaffold. Methods: In this study, three different groups were designed for comparison. In the first group (group A), conventional method was used, in which HA pellet was applied without surface pretreatment. The second group (group B) was given a HA pellet that has been coated with crystalline HA solution prior to application. In the third group (group C), the same method was used as the second group, where the pretreated HA pellet was heated ($1250^{\circ}C$, 1 hour) before application. Osteoblast-like cells ($2{\times}10^4$/mL) were scattered onto every pellet, then they were incubated in 5% $CO_2$ incubator at $37^{\circ}C$ for twelve days. During the first three days, osteoblast cells were counted using the hemocytometer daily. ALP activity was measured on the 3, 6, 9 and 12 culture days using the spectrophotometer. Results: Under SEM, group A showed a surface with numerous micropores, and group B revealed more rough crystal surface. Group C revealed a fused crystal appearance and flattened smooth surface. In proliferation and ALP activity of osteoblast cells, group C showed better results compared to group B. Group A which lacks pretreatment of the surface showed less osteoblast proliferation and ALP activity than group C, but showed better results than group B. Conclusion: We found that crystallized HA with heat treatment method enhances the osteoblasts proliferation and differentiation on the surface of HA pellets.
The rh-BMP-4 is a subgroup of TGF-${\beta}$ superfamily. The application of rh-BMP in alveolar bony defect was reported to new alveolar bone and new cementum formation. For minimized complications following tooth replantation, a operator must replant a tooth fast at the pertinent position. This study was to evaluate the effect of rh-BMP-4 on periodontal regeneration and root resorption following tooth replantation in rats. The 50 Sprague-Dawley rats weighting about 130gm were used in this study. The animals were divided into three groups. Group 1 ; immediate replantation after extraction : Group 2 ; replantation stored teeth extraction of first molar, the removal of periodontal ligament with collagenase, and etching with citric acid : Group 3 ; replantation stored teeth with treated rh-BMP-4 in mesial root. Experimental animals were sacrificed 3, 7, 14 days after replantation by heart infusion. The maxillae were removed, fixed, demineralized, dehydrated, infiltrated and embedded with JB-4 mixture. For light microscopic observation, 5 micron sections were cut and stained with toluidine blue. The results of this study were as follows : 1. After experimental 3 days, all groups were observed dead space between periodontum and root. 2. After experimental 7 days, group 1 and group 3 were observed filling periodontal fibers between alveolar bone and root but group 2 were not. 3. After experimental 7 days, group 3 were observed appearance of attached cementoblast like cell on root surface. Group 1 were observed regular arrangement of fibroblasts and collagen fibers at ${\times}400$ observation. 4. After experimental 14 days, all group were observed filling periodontal fibers between alveolar bone and root. Group 1 were observed normal arrangement of periodontal fibers. Group 3 were observed less abnormal arrangement of periodontal fibers. Group 2 were not observed functional normal arrangement of periodontal fibers. 5. After experimental 14 days, group 2 and 3 were observed several root resorption and irregular root surface but group 1 were not. These results suggest that the rh-BMP-4 can stimulate cementogenesis and enhance to attach collagen fibers.
골재생을 위해 사용되는 골이식재로 자가골, 동종골, 이종골 등이 있다. 자가골은 가장 예지성이 높은 골이식재이지만, 부가적인 수술, 환자의 동통과 불편, 채취하는 양의 제한, 비용의 증가 등의 단점이 있다. 따라서 많은 연구자들은 오랫동안 자가골을 대체할 골이식재 개발에 힘써왔고, 다양한 연구가 있었다. 소로부터 유래한 이종골은 천연 다공성의 골 무기질로서, 인간의 골의 구조와 유사하면서, 골 전도성이 있고, 생체 적합성이 뛰어나다고 보고되었다. 이에 최근에 개발된 Ca-P 박막이 이종골과 조작성을 용이하게 하기 위해 부가적으로 type I collagen을 혼합한 골이식재를 토끼 두개골 결손부에 매식하여 골형성 능력 및 주변 조직의 반응을 보고자 하였다. 총 16마리의 New Zealand white rabbits를 사용하였고, 두개골에 4부위의 결손부를 형성한 후, 다음과 같이 적용하였다. 이식재를 넣지 않은 군을 음성대조군으로, 자가골 분말을 이식한 군을 양성대조군으로, Ca-P 박막 탈단백 우골 분말을 이식한 군을 실험1군으로, Ca-P 박막 탈단백 우골 분말과 type I collagen을 같은 부피로 혼합하여 이식한 군을 실험2군으로 하였다. 1, 2, 4, 8주째 4마리씩 희생하여, H-E 염색과 Masson's trichrome 염색을 시행한 후, 광학현미경을 사용하여 조직학적으로 관찰하였다. 토끼 두개골 결손부에 이식한 Ca-P 박막 탈단백 우골은 골성회복초기에 골결손부 변연에서 골전도성을 보였지만, 완전한 골성회복을 이루지 못하였고, 신생골과 직접적인 유합을 보이지 않았다. 또, collagen의 부가적인 사용은 조작성은 가장 우수했으나, 조직소견상 신생골의 형성을 보이지는 않았다. 반면 자가골을 이식한 부위는 신생골 형성양과 밀도에 있어서 가장 우수한 결과를 보였다.
상완골 근위부 골절은 상완골의 외과적 경부 또는 근위부에 발생하는 골절로 정의할 수 있으며, 적절한 치료에도 불구하고 다양한 합병증 및 후유증이 발생할 수 있어 그 치료가 매우 까다롭고 견관절 치환술 등의 수술적 치료를 요하는 경우가 많다. 상완골 근위부 골절 후 후유증은 Boileau가 제시한 분류법이 가장 많이 사용되며, 2개의 카테고리 및 4가지의 타입으로 분류할 수가 있다. 카테고리 I은 관절 내 감입 골절로 결절들과 상완골 두 사이에 저명한 해부학적 변형이 동반되지 않아 결절 절골술을 시행하지 않고도 해부학적 치환물을 사용할 수 있는 경우로서 결절의 불유합이 거의 없이 두경부의 붕괴(cephalic collapse)나 괴사가 있는 타입 1과 잠김 탈구(locked dislocation) 또는 골절-탈구와 관련이 있는 타입 2로 나눌 수 있다. 카테고리 II는 관절 외 골절이며 결절들과 상완골 두 사이에 육안적인 변형이 있는 경우로서 해부학적 치환물을 사용하기 위해서는 결절 절골술을 시행해야 하며, 외과적 경부의 불유합이 동반된 타입 3와 심각한 결절의 부정유합이 동반된 타입 4로 분류할 수 있다. 각 타입별 치료를 위해서 타입 1의 경우에는 결절 절골술을 시행하지 않고 비구속형 치환술을 우선적으로 고려해야 하지만, 타입 1C, 1D와 같이 외반이나 내반 변형이 동반되거나 회전근 개의 지방 변성이 심할 경우에는 역행성 견관절 전치환술 또한 고려해야 한다. 타입 2는 일반적으로 비구속형 치환술로 좋은 결과를 기대할 수 있으나 관절와 골 결손이 없으며 회전근 개의 결손이 동반된 경우 역행성 견관절 전치환술 또한 하나의 치료 방법으로 고려할 수 있다. 타입 3는 견관절 치환술보다는 골쐐기 이식 등을 함께 시행하여 내고정을 시행하는 것이 효과적일 것으로 보이며, 최근 역행성 견관절 전치환술의 결과에 대한 보고 또한 점차 증가하고 있는 추세이다. 마지막으로 타입 4는 역행성 견관절 전치환술이 우선적으로 고려되어야 할 것으로 보인다.
육안적 검사결과 실험군과 대조군 모두에서 특별한 염증 소견이나 창상 이개 없이 반원 모양의 골형성이 관찰되었다. 조직학적으로 3주째에 대조군, 실험 1군, 실험2군, 실험 3군 모두 이식골 주위 및 티타늄 반구 내면을 따라 신생 골형성이 관찰되었다. 조직학적으로 6주째에 모든 군에서 3주째에 비하여 신생골 면적의 증가 및 성숙 소견이 관찰되었고, 실험2군에서는 부분적으로 이식골이 흡수되면서 신생골이 형성되는 것이 관찰된 반면, 실험 3군에서는 이식골의 흡수 소견이 관찰되지 않았다. 조직형태계측학적으로 3주, 6주 모두 자가골에서 가장 많은 신생골 형성이 나타났고, 신생골 면적 비교시 자가골, 이종골, 합성골 순으로 크게 나타났고, 각 군간의 통계학적으로 유의한 차이는 없었다(p>0.05). 본 연구결과 골유도 재생술시 골형성 능력은 자가골이 가장 좋지만, 자가골 채취가 불가능할 경우, 적절한 차폐막을 사용한 합성골과 이종골 복합 이식방식도 좋은 대체제가 될 것으로 생각된다.
목적: 장관골의 골육종 치료로써 한국에서 시행된 항암제 치료 및 수술적 치료 후의 결과와, 중국에서 시행된 비침습적인 초음파 치료(high intensity focused ultrasound, HIFU)간의 다국적 임상 결과를 비교하고자 한다. 대상 및 방법: 한국에서 1993년 이래로 통상적인 항암요법과 사지구제술을 시행한 총 67예(IIA; 4 cases, IIB; 58 cases, III; 5 cases)와, 중국에서 1997년 이래로 초음파 치료를 시행한 총 71예(II; 57 cases, III; 14 cases)를 연구 대상으로 하였다. 한국에서는 총 67예 중, 66예에서 수술 전 선행 화학치료를, 반면 중국에서는 총 71예 중, stage II의 34예에서 9회 이상의 full protocol 화학치료가 시행되었고, stage II의 23예와 stage III의 14예에서 8회 이하의 부분 화학치료를 시행하였다. 한국의 67예는 모두 광범위 절제술을 시행하였고, 56예에서 국소 재건술을 병행하였다. 5예에선 국소 재건 없이 광범위 절제만 시행하였고, 6예에선 절단술만을 시행하였다. 반면 중국의 총 71예는 평균 1.5회(1~4회)의 초음파 치료가 시행되었다. 결과: 한국의 stage II의 5년 생존율은 평균 92.7%(IIA 100%, IIB 85.5%), 반면, 중국의 5년 생존율이 평균 78.7%로써 항암제를 병행한 군은 91.8% 및 항암제 치료를 못 받은 군은 56.6%였다. Stage III의 3년 생존율은 한국 20%(5예중 1예 생존), 중국은 7.1%(14예 중 1예 생존)였으며, 전 예의 평균 생존율은 한국 65.2%, 중국 51.8%였다(Table 2). 한국 환자들의 ISOLS에 의한 최종 기능 평가 결과는 평균 24.3(81%)였고, 중국 환자들은 19.8(73%)였으며, 치료의 합병증은 한국 25.4%(17/67 cases), 중국 31%였다. 결론: 한국에서 시행한 수술적 치료전후 화학요법을 시행한 결과는 초음파 치료를 이용한 비침습적 열괴사 방법보다 양호하였으나, 골종양에 대한 초음파 치료도 적응증을 잘 선택한다면 장관골 골육종의 치유 및 국소 재발율을 감소시킬 수 있을 것으로 생각한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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