In our ongoing search for biological components from the Korea endemic plants, the MeOH extract of Ailanthus altissima leaves (Simaroubaceae) showed cyclooxygenase-2 (COX-2) and 5-lipoxygenase (5-LOX) dual inhibitory activity by assessing their effects on the production of prostaglandin $D_2$ ($PGD_2$) and leukotriene $C_4$ ($LTC_4$) in mouse bone marrow-derived mast cells (BMMCs). In further study, eight compounds, squalene (1), ${\beta}$-sitosterol (2), scopoletin (3), quercetin (4), luteolin (5), astragalin (6), scopolin (7), and daucosterol (8) were isolated, the chemical structures were elucidated on the basis of physicochemical and spectroscopic data and by comparison with those of published literatures. Among the compounds, 2, 4, and 5 strongly inhibited both the COX-2-dependent PGD2 generation with $IC_{50}$ values of 2.6, 7.3 and 2.5 ${\mu}M$, respectively and the generation of $LTC_4$ in the 5-LOX dependent phase with $IC_{50}$ values of 2.0, 5.1 and 1.8 ${\mu}M$, respectively, which suggest that the anti-inflammatory activity of A. altissima might occur in part via the inhibition of both $PGD_2$ and $LTC_4$ generation by 2, 4 and 5.
Alpha-ketoglutarate (AKG) is a key molecule in the Krebs cycle determining the overall rate of the citric acid cycle of the organism. It is a nitrogen scavenger and a source of glutamate and glutamine that stimulates protein synthesis and inhibits protein degradation in muscles. AKG as a precursor of glutamate and glutamine is a central metabolic fuel for cells of the gastrointestinal tract as well. AKG can decrease protein catabolism and increase protein synthesis to enhance bone tissue formation in the skeletal muscles and can be used in clinical applications. In addition to these health benefits, a recent study has shown that AKG can extend the lifespan of adult Caenorhabditis elegans by inhibiting ATP synthase and TOR. AKG not only extends lifespan, but also delays age-related disease. In this review, we will summarize the advances in AKG research field, in the content of its physiological functions and applications.
DA-5018, a non-narcotic analgesic agent, was examined for mutagenicity in the reverse mutation test on bacteria, chromosomal aberration test on cultured mammalian cells and micronucleus test on mice. The reverse mutation test was performed by a plate incorporation method with or without a metabolic activation system(S9 mix) using Salmonella typhimurium strain TA100, TA1535, TA98 and TA1537. DA-5018 did not significantly increase revertant colonies in any of the test strains under any conditions at concentrations ranging from 0.0049 to 1.25 mg/plate, compared with the vehicle control. In the chromosomal aberration test using cultured Chinese Hamster Lung(CHL) cells, DA-5018 did not increase the number of aberrant cells in the presence or absence of S9 mix at concentrations of 0.016 mM/plate to 0.25 mM/plate, compared with the vehicle control. In the micronucleus test, male ICR mice were given DA-5018 intraperitoneally at a dose level of 0.55, 1.10 and 2.20 mg/kg. The incidence of bone marrow micronucleated polychromatic erythrocytes in the DA-5018 treated mice was not significantly different from that of the vehicle control. These results indicate that DA-5018 does not have mutagenic potential under the present test conditions.
DA-3002, an authentic recombinant human growth hormone(rhGH), was examined for mutagenicity in the reverse mutation test on bacteria, in the chromosomal aberration test on cultured mammalian cells and in the micronucleous test on mice. The reverse mutation test was performed by a plate incorporation method with or without a metabolic activation system(S9 Mix) using Salmonella typhimurium strain TA100, TA1535, TA98 and TA1537. DA-3002 did not significantly increase revertant colonies in any of the test strains under any conditions at dose levels ranging from 0.0125 to 0.4 IU/plate, compared with the vehicle control. In the chromosomal aberration test using cultured Chinese hamster lung(CHL) cells, DA-3002 did not increase the number of aberrant cells in the presence or absence of S9 mix at concentrations of 0.0125 IU/mι to 0.4 IU/mι, compared with the vehicle control. In the micronucleus test, male ICR mice were given DA-3002 intraperitoneally at a dose level of 20, 40 and 80 lU/kg. The incidence of bone marrow micronucleated polychromatic erythrocytes in the DA-3002 treated mice did not differ from that of the vehicle control. These results indicate that DA-3002 doesn't have mutagenic potential under the present test conditions.
The Ti-6Al-4V alloy is widely used as an implant material due to its higher fatigue strength and strengthto-weight ratio compared to pure titanium, excellent corrosion resistance, and bone-like properties that promote osseointegration. For rapid osseointegration, the adhesion between the titanium surface and cellular biomolecules is crucial because adhesion, morphology, function, and proliferation are influenced by surface characteristics. Polymeric peptides and similar coating technologies have limited effectiveness, prompting a demand for alternative materials. There is growing interest in 2D nanomaterials, such as MoS2, for good corrosion resistance and antibacterial, and bioactive properties. However, to coat MoS2 thin films onto titanium, typically a low-temperature hydrothermal synthesis method is required, resulting in the synthesis of films with a toxic 1T@2H crystalline structure. In this study, through high-temperature annealing, we transformed them into a non-toxic 2H structure. The implant coating technique proposed in this study has good corrosion resistance and biocompatibility, and antibacterial properties.
The interaction of cell adhesive protein and polypeptide with bone marrow stromal stem cells (BMSCs) grown in tissue engineered films and scaffolds were examined. Several proteins or polypeptide known as cell-adhesive were coated adsorption on poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) films and scaffolds and adhesion and proliferation behavior of BMSC on those surfaces were compared. The protein and polypeptide used include collagen IV, fibrinogen, laminin, gelatin, fibronectin, and poly(L-lysine). The protein and polypeptide were adsorbed on the PLGA film surfaces with almost monolayer coverage except poly(L-lysine). BMSCs were cultured for 1, 2, and 4 days on the protein- or polypeptide-adsorbed PLGA films and scaffolds. The cell adhesion and proliferation behaviors were assessed by sulforho damine B assay. It was observed that the protein- or polypeptide-adsorbed surfaces showed better cell adhesion and proliferation than the control.
The mutagenicity of DA-3030(rhG-CSF)was studied by reverse mutation test, chromosome aberration test and micronucleus test. The reverse mutatuon test in bacteria was performed using salmonella typhimurium strain TA100, TA98, TA1535 and TA1537 with rhG-CSF in any of the concentrations(150, 75, 37.5, 18.75, 9.375 and 4,6875 $\mu\textrm{g}$/plate), no increase in the number of revertant colonies in each strain was observed, irrespective of treatment with the metabolic activation system(S-9 mix) The chromosome aberration test was carried out using CHL cells, cell line from chinese hamster lung. With 4 doses(75, 37.5, 18.75 and 9.375 $\mu\textrm{g}$/ml) of rhG-/CSF the cells were treated for 24 or 48 hours in the direct method or for 6 hours followed by 18 hour-expression time in the metabolic activation method. Results of the study showed, by the direct method or metabolic activation method, no trend toward increase in the number of aberrant metaphase. The micronucleus test was carried out using ICR mice at the age of 8 weeks. Three doses(862.5, 1725 and 3450 $\mu\textrm{g}$/kg) of DA-3030 were admintstered intraperitoneally with single shot and bone marrow cells were sampled at 24 hours after administration. Neither the number of polychromatic erythrocytes with micronuclei nor the ratio of normochromatic erythrocytes to polychromatic erythrocytes increased singinficantly in each dose, compared with a vehicle control. These results indicate that rhG-CSF has not mutagenic potential under the condiions.
This Study was conducted to assess the single dose toxicity of DA-125, a new anthracycline anti-cancer agent, in rats and mice. The Drug was administered once intravenously to both sexes of rats and mice. Then followed a 14-day period of observation. The $LD_{50}$ Values (95% confidence limit) were estimated to be 60.9 mg/kg (57.5~64.3 mg/kg) for male rats and 60.2 mg/kg (56.2~64.5 mg/kg) for female rats, and 85.8 mg/kg (81.0~90.9 mg/kg) for male mice and 84.5 mg/kg (78.2~91.9 mg/kg) for female mice. Both sexes of rats and mice given the drug revealed the clinical sign of decreased locomotor activity, emaciation, hair loss, red-dish brown urine, salivation, and watery diarrhea. In addition, body weight from the next day to the 7th day tended to be decreased slightly in rats and mice treated with DA-125. Death occurred from the next day after administration to the 12th day. Macroscopically, congestion of gastrointestinal organ, lung, and adrenal glands were found in both sexes on the dead rats and mice. Histopathological examination of dead rats manifested atrophy of spleen, hypoplasia of bone marrow, hypcplasia and necrosis of lymphocyte in thymus, atrophy of villi in small intestine (duodenum, jejunum, and ileum), hyperplasia of granular epithelium in small intestine, degeneration of germinal epithelium in testis, defer oration of tubular epithelium in kidney, and vacuolation and myolysis of myocardium in heart. Histopathological examination of dead mice revealed hypoplasia of spleen and mesenteric lymph node, local necrosis of liver, atrophy of villi in small intestine, hyperplasia of glandular epithelium in small and large intestine, degeneration of tubular in kidney, degeneration of germinal cells in testis, and slight vacuolar degeneration of myocardium in heart.
Osteoporosis is a bone pathology leading to increased fracture risk and challenging the quality of life. The aim of this study was to evaluate the effect of an anthraquinone glycoside, aloin, on osteogenic induction of MC3T3-E1 cells. Aloin increased alkaline phosphatase (ALP) activity, an early differentiation marker of osteoblasts. Aloin also increased the ALP activity in adult human adipose-derived stem cells (hADSC), indicating that the action of aloin was not cell-type specific. Alizarin red S staining revealed a significant amount of calcium deposition in cells treated with aloin. Aloin enhanced the expression of osteoblast differentiation genes, Bmp-2, Runx2 and collagen 1a, in a dose-dependent manner. Western blot analysis revealed that noggin and inhibitors of p38 MAPK and SAPK/JNK signals attenuated aloin-promoted expressions of Bmp-2 and Runx2 proteins. siRNA mediated blocking of Wnt-5a signaling pathway also annulled the influence of aloin, indicating Wnt-5a dependent activity. Inhibition of the different signal pathways abrogated the influence of aloin on ALP activity, confirming that aloin induced MC3T3-E1 cells into osteoblasts through MAPK mediated Wnt and Bmp signaling pathway.
Natural Killer (NK) cells are the lymphocytes that are derived from hematopoietic stem cells, developed in the bone marrow from hematopoietic stem cells (HSC) by sequential acquisition of functional surface receptors, and express the repertoire of inhibitory and activating receptors. Recently, Osteopontin (OPN) has been identified as a critical factor for differentiation of natural killer cells. However, the detailed mechanism of OPN-induced NK differentiation has been still to be elucidated. Here, we determined the signaling pathway and possible receptor for OPN in NK differentiation. OPN induced expression of Bcl-2 and activation of Erk kinase. Inhibition of Erk pathway decreased the effect of OPN on NK differentiation. In addition, the expression of integrin ${\alpha}9$ was significantly increased by OPN during NK differentiation, suggesting the possible role of a major signaling molecule for OPN- induced NK differentiation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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