Objectives The object of this study was to assess the effect of Gyejibokryunghwan (GBH) on anti-oxidant and anti-inflammatory activities in RAW 264.7 cells and on factors associated with fracture union in tibia-fractured rats. Methods The 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) radical scavenging activity was measured to assess anti-oxidant activity. The production of nitric oxide (NO), interleukin-6 (IL-6), interleukin-$1{\beta}$ ($IL-1{\beta}$) and tumor necrosis factor-${\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$) in the RAW 264.7 cells were measured to assess anti-inflammatory activity. The production of osteocalcin, calcitonin, carboxy-terminal telepeptides of type II collagen (CTXII), transforming growth factor-${\beta}$ ($TGF-{\beta}$), bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) in serum of tibia-fractured rats were measured to assess the effects of fracture union. X-rays were taken every two weeks from 0 to 4th week to assess fracture union effect. Results DPPH radical scavenging activity of GBH was increased according to concentration of GBH in RAW 264.7 cell. NO, prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$), IL-6, $IL-1{\beta}$ and $TNF-{\alpha}$ were significantly decreased, indicating anti-inflammatory effect. Osteocalcin, calcitonin, $TGF-{\beta}$ were significantly increased in the experimental groups. CTXII was significantly decreased in the experimental groups. BMP-2 was not significantly changed in the experimental groups. The X-ray showed that the experimental group has better healing effects on tibia-fractured rats than control group. Conclusions From above result, GBH has an effect on anti-oxidant, anti-inflammatory activities in RAW 264.7 cells. GBH showed significant results in factors related with fracture union and radiologic examination. In conclusion, GBH can help fracture union and it well be expected to be used actively in clinics.
In this study, biodegradation efficiency improvement of mixed sludge for the anaerobic digestion process in wastewater treatment plant was investigated. In order to release the organic material contained in the sludge cell and promote the hydrolysis step, mixed sludge of 7% TS (Total Solids) was physically shear-treated at a shear strength of 1,000 ~ 4,000 rpm and a maximum of 120 mins. As a result of the comparison between mixed sludge before and after the treatment, the concentration of $SCOD_{Cr}$(Soluble Chemical Oxygen Demand-chromium method) was increased through the conversion of granular organic matter into dissolved organic matter as shear strength and treatment time increases. The solubilization efficiency increased rapidly after 30 min of solubilization application time, and they were 11.23 %, 20.10 %, 22.52 % and 25.43% at 120 min for each shear strength conditions, respectively. Additionally, the BMP(Biochemical Methane Potential) test was conducted with the optimized samples to determine the increase of methane production by the shear pre-treatment. Consequently, methane production of each samples were 0.275, 0.310, 0.323 and $0.335m^3/kg\;VS_{add}$, which indicates that methane production was increased to a maximum of 21.28% compared to the control without the solubilization process ($0.262m^3/kg\;VS_{add}$). As a result, the physical shear-treatment is a promising process for sewage sludge pre-treatment to reduce the organic waste and increase the energy production.
Regenerative therapy holds great promise in the development of cures of some untreatable diseases such as cardiovascular diseases, and pluripotent stem cells (PSCs) including induced PSCs (iPSCs) are the most important regenerative seed cells. Recently, differentiation of human PSCs into functional tissues and cells in vitro has been widely reported. However, although porcine reports are rare they are quite essential, as the pig is an important animal model for the in vitro generation of human organs. In this study, we reprogramed porcine embryonic fibroblasts into porcine iPSCs (piPSCs), and differentiated them into cluster of differentiation 31 (CD31)-positive endothelial cells (ECs) (piPSC-derived ECs, piPS-ECs) using an optimized single-layer culture method. During differentiation, we observed that a combination of GSK3β inhibitor (CHIR99021) and bone morphogenetic protein 4 (BMP4) promoted mesodermal differentiation, resulting in higher proportions of CD31-positive cells than those from separate CHIR99021 or BMP4 treatment. Importantly, the piPS-ECs showed comparable morphological and functional properties to immortalized porcine aortic ECs, which are capable of taking up low-density lipoprotein and forming network structures on Matrigel. Our study, which is the first trial on a species other than human and mouse, has provided an optimized single-layer culture method for obtaining ECs from porcine PSCs. Our approach can be beneficial when evaluating autologous EC transplantation in pig models.
In this paper a detail study of existing steganographic methods are presented. An example is given of LSB substitution with uncompressed domain i.e., BMP image. In case of compressed domain JPEG image steganography is presented. Almost all popular steganographic algorithms, such as JPEG JSteg, F3, F4 and Selective Block Steganography (SBS) are described. The applications of steganographic methods are also presented briefly.
Objectives : The aim of this study was to evaluate the efficacy of Aconiti Lateralis Preparata Radix (AP) and Acanthopanacis Cortex (AT) extracts in bone-derived adipocyte OP9 cell, osteoclast and osteoblast-like MG63 cells. Methods : MTT assay was used to evaluate the cytotoxicity of AP and AT extracts on OP9, osteoclast and MG63 cells. OP9 cells were treated with AP and AT, and the alterations in fat storage in the cells were determined by the Oil red O. To explain effects of RANKL-induced osteoclast differentiation in bone marrow macrophages, we performed the TRAP staining. The protein level of CAAAT/enhancer binding protein alpha ($C/EBP{\alpha}$) and peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$) as a adipocyte differentiation marker, and adiponectin was examined using western blot in differentiated OP9 cells. Effects of related genes were confirmed by luciferase assay using reporter assay. Results : AP and AT was not toxic on OP9 and MG63 cells, but AT was a little cytotoxic to osteoclast at the dose of $100{\mu}g/m{\ell}$. They could inhibit differentiation of OP9 cells and osteoclast with results of oil red O staining and TRAP staining. By western blot, AP and AT decreased the expression of $PPAR{\gamma}$ and $C/EBP{\alpha}$ which is the key transcription factor in adipogenesis and adiponectin secretion. AT also inhibited the BMP-4 activity in luciferase assay. AP also inhibited BMP-4 and Wnt3a activity, stimulated ER-${\beta}$ activity but inhibited androgen receptor activity. Conclusions : These results show AP and AT can be useful in osteoporosis and obesity via inhibition of osteoclast and adipocyte differentiation.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.34
no.2
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pp.220-229
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2008
Purpose: The present study was aimed to examine the effect of acellular dermal matrix ($AlloDerm^{(R)}$) grafted to the experimental tissue defect on tissue regeneration. Materials and Methods: Male albino rabbits were used. Soft tissue defects were prepared in the external abdominal oblique muscle. The animals were then divided into 3 groups by the graft material used: no graft, autogenous dermis graft, and $AlloDerm^{(R)}$ graft. The healing sites were histologically examined at weeks 4 and 8 after the graft. In another series, critical sized defects with 8-mm diameter were prepared in the right and left iliac bones. The animals were then divided into 5 groups: no graft, grafted with autogenous iliac bone, $AlloDerm^{(R)}$ graft, $AlloDerm^{(R)}$ graft impregnated with rhBMP-2, and $AlloDerm^{(R)}$ graft with rhTGF-${\beta}1$. The healing sites of bone defect were investigated with radiologic densitometry and histological evaluation at weeks 4 and 8 after the graft. Results: In the soft tissue defect, normal healing was seen in the group of no graft. Inflammatory cells and foreign body reactions were observed in the group of autogenous dermis graft, and the migration of fibroblasts and the formation of vessels into the collagen fibers were observed in the group of $AlloDerm^{(R)}$ graft. In the bone defect, the site of bone defect was healed by fibrous tissues in the group of no graft. The marked radiopacity and good regeneration were seen in the group of autogenous bone graft. There remained the traces of $AlloDerm^{(R)}$ with no satisfactory results in the group of $AlloDerm^{(R)}$ graft. In the groups of the $AlloDerm^{(R)}$ graft with rhBMP-2 or rhTGF-${\beta}1$, there were numerous osteoblasts in the boundary of the adjacent bone which was closely approximated to the $AlloDerm^{(R)}$ with regeneration features. However, the fibrous capsule also remained as in the group of $AlloDerm^{(R)}$ graft, which separated the $AlloDerm^{(R)}$ and the adjacent bone. Conclusions: These results suggest that $AlloDerm^{(R)}$ can be useful to substitute the autogenous dermis in the soft tissue defect. However, it may not be useful as a bone graft material or a carrier, since the bone defect was not completely healed by the bony tissue, regardless of the presence of osteogenic factors like rhBMP-2 or rhTGF-${\beta}1$.
Insulin-like growth factor I (IGF-I) has the local tissue regulating actions. In bone, IGF-I increases the replication of osteoblastic lineage, probably preosteoblasts, and enhances osteoblastic collagen synthesis and matrix composition rates. The purpose of this study was to investigate the local regulatory effect of IGF-I on periodontium totally, both in an autocrine and paracrine manner. To examine the effect of IGF-I directly on osteoblast (OB) of test rats, and indirectlv on OB via periodontal ligament fibroblast (PDLF), and the effect of gingival fibroblast (GF) on OB via cellular paracrine manner for the understanding of humoral action of adjacent tissue, GF and PDLF were obtained from male Sprague-Dawley rats of six to eight weeks of age. OB was obtained iron frontal and parietal calvarial bone of Sprague-Dawley 21day-old-fetus. After each tell was Incubated 24 hours, for collecting conditioned medium, different concentrations of IGF-I (1,10,100 ng/ml,1ml/well) was adding in the GF, PDLF cells, and the supernatant from these cultures was put into the primary OB culture with $1{\times}10^4$cell/ml/well. The experimental group was divided into six groups control OB, IGF-I treated OB, OB culture with conditioned medium from PDLF, OB culture with conditioned medium from IGF-I treated PDLF, OB culture with conditioned medium from GF, OB culture with conditioned medium from IGF-I treated GF. After final IGF-I treatment, OB was Incubated for 24 hours, and alkaline phosphatase activity assay, BMP expression, cell proliferation measurement using MTT assay, total protein measurement, Collagen synthesis assay using western blot, and examination of bone nodule synthesis were done. Alkaline phosphatase expressions were increased in the group of PDLF-IGF-I supernatant treatment. Direct IGF-I treatment with concentrations of 100ng/m1 showed increased viable tell number measured by MTT assay. And IGF-I treatment did not increase total protein amount. The entire experimental group showed BMP2, 4 expression in western blot, and there was no significant difference between control and experimental groups. These results suggested that supernatant from PDLF effects on increasing cellular activities of OB regardless of IGF-I, and at high concentration, IGF-I increases OB tell proliferation.
Objectives: This study was aimed to investigate the effect of Bojungikgitang-gagambang (BJIG) on longitudinal bone growth in rats. Methods: The BJIG treated group (300 mg/kg) and the control group (vehicle) were administered orally twice daily for 4 days. To investigate the effects of BJIG we measured body weight gain. The bone growth effect was analyzed by measuring between fluorescent lines marked with tetracycline, which plays the role of fluorescent dye on the surface of the tibia. Tetracycline was intraperitoneally injected. The height of growth plates in the epiphyseal plate was measured. The expression of bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) and insuline-like growth factor-1 (IGF-1) was investigated by immunohistochemistry. Results: BJIG caused a significant acceleration of longitudinal bone growth of $349.7{\pm}15.9{\mu}m/day$ compared to control ($319.8{\pm}21.4{\mu}m/day$). The height of overall growth plate was not significantly more compared to the control, but the size of cells in the proliferative zone and hypertrophic zone were. In the immunohistochemistry, BMP-2 and IGF-1 were expressed markedly in the proliferative or hypertrophic zone, respectively. Conclusions: BJIG stimulated the chondrocyte hypertrophy and chondrogenesis in the growth plate and directly increased the longitudinal tibia length of rats.
Kim, Ji-Hyuck;Jo, Joung-Ae;Kim, Soung-Min;Park, Young-Wook;Huh, Jin-Young;Lee, Suk-Keun
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.29
no.5
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pp.293-297
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2003
Florid cemento-osseous dysplasia (FCOD) is a benign, non-neoplastic lesion characterized by multiple sclerosing masses only within jawbones. It is frequently confused with chronic diffuse sclerosing osteomyelitis (CDSO) in previous literatures. In our study, two cases of FCOD were examined to know the characteristics of their calcifying tissues. The first case was non-infected, while the second case was severely infected, displaying the typical features of CDSO in clinico-radiologic findings. The infected FCOD case showed a lot of bacterial colonies in the main lesion with relatively rare inflammatory reaction. The globular cementum-like materials of FCOD showed woven bone pattern and was positive for Alcian blue stain, and also positive for the antibodies of ameloblastin, bone morphogenetic protein (BMP) -2 and -4. On the other hands, in the immunostains of matrix metalloproteinase (MMP) -3, -9, -10, and $TNF-{\alpha}$, macrophage infiltrated in the FCOD lesion was rarely observed. These data suggest that the cementum-like materials of FCOD contain various matrix proteins, and that the cementum-like materials are relevant to the overgrowth of the bacterial colonies by inhibition of the regional inflammatory reactions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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