Kim, Suk-Weon;Kwon, Yong-Kook;Kim, Jong-Hyun;Liu, Jang-R.
Journal of Plant Biotechnology
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v.37
no.1
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pp.12-24
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2010
Plant metabolomics is a research field for identifying all of the metabolites found in a certain plant cell, tissue, organ, or whole plant in a given time and conditions and for studying changes in metabolic profiling as time goes or conditions change. Metabolomics is one of the most recently developed omics for holistic approach to biology and is a kind of systems biology. Metabolomics or metabolite fingerprinting techniques usually involves collecting spectra of crude solvent extracts without purification and separation of pure compounds or not in standardized conditions. Therefore, that requires a high degree of reproducibility, which can be achieved by using a standardized method for sample preparation and data acquisition and analysis. In plant biology, metabolomics is applied for various research fields including rapid discrimination between plant species, cultivar and GM plants, metabolic evaluation of commercial food stocks and medicinal herbs, understanding various physiological, stress responses, and determination of gene functions. Recently, plant metabolomics is applied for characterization of gene function often in combination with transcriptomics by analyzing tagged mutants of the model plants of Arabidopsis and rice. The use of plant metabolomics combined by transcriptomics in functional genomics will be the challenge for the coming year. This review paper attempted to introduce current status and prospects of plant metabolomics research.
The objective of this study was to develop a fast and accurate method of variety discrimination and geographical discrimination origin of Korean angelica (Korean variety, Angelica gigas Nakai) by using TDU-GC/MS. Two peaks of decursin and decursinol, which are coumarin derivatives were identified in the range of Total Ion Chromatogram (TIC) RT 26.9-27.2 of the Korean angelica by GC/MS analysis at the time of condensation in a refrigerated condensation system after thermal desorption of sample extracts. In case of Chinese angelica (Chinese variety), ligustilide peak was detected at the RT 17.2. In order to investigate the difference of volatile components according to the geographical origin of Korean variety, the mass spectra were measured by TDU-GC/MS at the range of m/z 40-400 amu. The TIC of domestic cultivation and Chinese cultivation of the Korean variety, Angelica gigas Nakai showed the same tendency as a whole. However, in partial scans of TIC, two peaks detected at 15.54 and 16.05 of RT showed different peak patterns between Korean angelica (Korean variety) cultivated in Korea and in China. The ratio of Peak A (RT 15.54) and B (RT 16.05) was 0.0-0.2 for domestic cultivation and 0.5-2.8 for Chinese cultivation, confirming the possibility of discriminating origin by comparing the TIC peak pattern of TDU-GC/MS.
The major color component of a Korean pigmented rice (Oeyza sativa var. Suwon 415) was purified with Amberlite XAD-7 column and preparative paper chromatography. The purified pigment was determined as anthocyanin by paper chromatography, UV/Vis and NMR spectroscopy. The $\lambda_{max}$ of the Purified anthocyanin on UV/Vis spectrum were 529 nm and 281 nm. The $A_{440}/A_{529}$ value of the purified anthocyanin was 23% suggesting the presence of 3-glycosidic structure. The aglycone from acid hydrolysis showed bathochromic shift (18 nm) in the presence of $AlCl_3$ indicating that the anthocyanidin contained free adjacent hydroxyl groups such as cyanidin, delphinidin, petunidin or luteolinidin. The sugar moiety obtained from acid hydrolysis was determined as glucose by paper chromatography. The NMR spectra showed that the aglycone was cyanidin and the sugar was ${\beta}-D-glucopyranose$. Thus, the chemical structure of the purified anthocyanin was identified as cyanidin $3-O-{\beta}-D-glucopyranoside$.
We used electrospary ionization ion trap tandem mass spectrometry (ESI-IT tandem MS) to structural elucidation of three different biantennary-type glycans having zero, one, two galactoses (G0, G1, G2). The highest fragment ion in the MS/MS spectra of three glycans was produced by 0,2-ring cleavage of fucose-linked N-acetylglucosamine (GlcNAc) in reducing end. The fragment ions both from precursor ions and 0,2-ring cleaved ions ($^{0.2}An$; n=5 for G0, n=6 for G1 and G2) were not overlapped each other. As results of $MS^n$ analyses, tandem fragmentation trees of each glycans were generated and 2,4-ring cleavages ($^{2.4}A_6$) were occurred in GlcNAc linked to reducing end GlcNAc. This structural elucidation and fragmentation study of N-linked glycans by tandem mass spectrometry can be applied to structural analysis of more complicated glycans.
The cultivation of ginseng plant (Panax ginseng C.A. Meyer) in Korea as an eminent medicinal herb may be traced far back in history. However, the practices in cultivation have not much improved in terms of efficiency and scientific farming. In the present study some experiments were undertaken for the search of the soil and nutrition conditions, because of the nutritional requirement of ginseng plant shaws quite unique compared with other crops. In both the seed bed and the field 'Yakto' has been traditionally employed or the prime source of nutrition of the crop. Yakto is a complex matter prepared from raw foliage of the broad-leaved trees as the main portion with the admixture of a variety of organic nitrogen source through fermentative processes. The composition of Yakto may be classified coarsely into the decomposed and undecomposed substances, the former being further fractionated according their solubilities, comprising also various colloidal matters whose composition and structure are yet to be known. The Yakto-fractions were subjected to analyze for search of its nature and coarse composition in terms of the distribution of nitrogen, contents of organic functional groups such as -COOH, phenolic-OH, alcholic-OH and methoxyl and hydrolysable sugars. Furthermore, absorption-spectra of each fraction were determined in visible and infrared region and compared the results each other.
The curing behavior of a phenolic resin (F/p: 1.3, 1.9, 2.5 for resol resin, F/P: 0.5, 0.7, 0.9 for novolac resin) has been studied by FT-IR spectroscopy. In this study is to synthesis of resol and novolac type phenolic resin with different F/P molar ratios and to compare the level of cure at different curing temperature conditions ($130^{\circ}C$, $160^{\circ}C$, $180^{\circ}C$ for resol resin, $160^{\circ}C$, $170^{\circ}C$, $180^{\circ}C$ for novolac resin) for 3, 5, 7, 10, 20, and 60 (min.), respectively. The conversion (${\alpha}$) was determined by the ratio of the peak area with time to the peak area of non-baked phenolic QH ($3300cm^{-1}$) at spectra. It is concluded that the initial curing rate of resol and novolac resin was increased as the molar ratio of formaldehyde/phenol increased and as the curing temperature of resin increased. According to the analysis was by the homogenous first-order model, the initial curing rate of resol and novolac resin was increased as the molar ratio of formaIdehyde/phenol increased at specific curing temperature.
Thermal stability of the major color component, cyanidin 3-glucoside, isolated from Korean pigmented rice (Oryza sativa var. Suwon 415) were investigated to explore possible application of value-added natural colors as food additives. The anthocyanin showed red and blue color with maximum absorption peaks at 511 nm and 572 nm in acidic (pH 2.0) and alkaline (pH 9.0) buffer solutions, respectively, and the thermal degradation reactions were carried out with different temperature ranges at $50{\sim}95^{\circ}C$. Degree of degradation was determined with UV/Vis spectra which indicate characteristic absorption patterns with sharp isosbestic points at 350 nm (pH 2.0), and 275, 310, and 405 nm (pH 9.0). Thus the reaction follows simple first-order kinetics. The anthocyanin was very stable against heat at acidic pH and relatively stable at alkaline pH with half-life values of 50.3 hr and 0.6 hr at $70^{\circ}C$, respectively. The activation energies and Arrhenius frequency factors of the pigment were 26.9 kcal $mol^{-1}\;and\;6.0{\times}10^{11}\;s^{-1}$, at pH 2.0, and 15.2 kcal $mol^{-1}\;and\;1.4{\times}10^{6}\;s^{-1}$, pH 9.0, and respectively.
Kim, Chan-Jo;Nagasawa, Toru;Tani, Yoshiki;Yamada, Hideaki
Applied Biological Chemistry
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v.22
no.4
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pp.191-197
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1979
${\beta}-Tyrosinase$ was purified and crystallized from cells of Escherichia intermedia A-21 grown in a medium supplemented with 0.2% L-tyrosine. Molecular weight of its subunit, Km value and absorption spectra were determined. Crystallization methods were also studied to eliminate any unnecessary procedures. The results obtained were as follows: 1. The purification procedure included ammonium sulfate fractionation, dialysis against potassium phosphate buffer, pH 6.0 and pH 7.0, and DEAE-Sephadex column chromatography. In the column chromatography, 11 mg of protein was applied per ml of DEAE-Sephadex for efficiency. 2. Steps of protamine sulfate treatment and Sephadex G-150 gel filtration could be eliminated for this enzyme from the known procedures. 3. The purified enzyme was dissolved in 0.01M potassium phosphate buffer containing 2-mercaptoethanol, with a concentration of 20mg/ml. Crystalline enzyme, which appears as hexagonal rods, was obtained by adding solid fine powdered ammonium sulfate to the enzyme solution. 4. Absorption maxima of the enzyme appeared at 340 and 430nm when associated with pyridoxal phosphate. 5. Km value of the enzyme for L-tyrosine was $2.31{\times}10^{-4}M$ and the molecular weight of its subunit was determined by SDS-polyacrylamide electrophoresis to be approximately 50,000.
Cellobiose dehydrogenases (CDHs) are a group of enzymes belonging to the hemoflavoenzyme group, which are mostly found in fungi. They play an important role in the production of acid sugar. In this research, CDH annotated from the actinobacterium Cellulomonas palmilytica EW123 (CpCDH) was cloned and characterized. The CpCDH exhibited a domain architecture resembling class-I CDH found in Basidiomycota. The cytochrome c and flavin-containing dehydrogenase domains in CpCDH showed an extra-long evolutionary distance compared to fungal CDH. The amino acid sequence of CpCDH revealed conservative catalytic amino acids and a distinct flavin adenine dinucleotide region specific to CDH, setting it apart from closely related sequences. The physicochemical properties of CpCDH displayed optimal pH conditions similar to those of CDHs but differed in terms of optimal temperature. The CpCDH displayed excellent enzymatic activity at low temperatures (below 30℃), unlike other CDHs. Moreover, CpCDH showed the highest substrate specificity for disaccharides such as cellobiose and lactose, which contain a glucose molecule at the non-reducing end. The catalytic efficiency of CpCDH for cellobiose and lactose were 2.05 × 105 and 9.06 × 104 (M-1 s-1), respectively. The result from the Fourier-transform infrared spectroscopy (FT-IR) spectra confirmed the presence of cellobionic and lactobionic acids as the oxidative products of CpCDH. This study establishes CpCDH as a novel and attractive bacterial CDH, representing the first report of its kind in the Cellulomonas genus.
The recovery of vegetatiion and soil properties in the burned fields after forest fire were studied in Chung Cheong Buk Do area, Korea, from July 23 to 28, 1981. Miscanthus sinensis var. purpurascens, Carex humilis and Lespedeza bicolor were dominant species in the burned field of the second year after forest fire as well as unburned field. Especially, Lespedeza bicolor was gradually grown to the dominant species. Lespedeza bicolor, Carex humilis and Miscanthus sinensis var. purpurascens were the dominant species in the burned field of the fifth year after forest fire. Biological spectra of the burned fields were similar to the umburned fields with $H-e-D_1-R_5$ or $Ph-e-D_1-R_5$ from the second year after forest fire. Accordingly, biological spectra were recovered to the unburned fields from the second year. Degree of successiion was DS=423 in the burned field and DS=524 in the unburned field in 1981. The DS of the burned fields was gradually increased and recovered to be similar to the unburned from the second year. In the species diversities and evenness index, H,e and $\beta$ of the burned field in 1981 were higher and $\lambda$ was lower than the unburned field, but all of the indices were recovered to the unburned field from the second or third years. Accordingly, the vegetation of the first year was the complex community in view floristic composition, but it was recovered to the simple community as unburned field fromthe second or third years. In the soil preperties, pH, total nitrogen, available phosphorus, exchangeable potassium, exchangeable calcium and exchangeable magnesium were increased and organic matter was decreased due to forest fire, and then was recovered to the unburned field from the second or third years. The vegetation and soil properties of the burned field after forest fire were similary recovered to the unburned field from the second or third years. Accordingly, there was a close relationship between the trend of vegetation recovery and the changes of soil characteristics after forest fire.
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